摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1.1 引言 | 第11页 |
1.2 脱水素研究进展 | 第11-13页 |
1.2.1 植物脱水素简介 | 第11-12页 |
1.2.2 脱水素的作用机制 | 第12-13页 |
1.3 小麦转基因研究进展 | 第13-19页 |
1.3.1 小麦转基因方法 | 第13-18页 |
1.3.2 小麦再生体系研究进展 | 第18-19页 |
1.4 RNA干扰在植物中的应用及研究进展 | 第19-22页 |
1.4.1 RNA干扰的发现和机制 | 第19-21页 |
1.4.2 RNA干扰在植物育种的研究 | 第21-22页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 小麦脱水素WZY1-2干扰基因的遗传转化 | 第23-37页 |
2.1 材料与方法 | 第23-27页 |
2.1.1 材料 | 第23-27页 |
2.2 基因枪转化方法 | 第27-28页 |
2.2.1 构建的质粒载体的鉴定 | 第27-28页 |
2.3 准备供体材料 | 第28-29页 |
2.3.1 收集和消毒小麦颖果 | 第28页 |
2.3.2 分离和预培养幼胚盾片 | 第28页 |
2.3.3 DNA包裏金粉颗粒 | 第28页 |
2.3.4 使用PDS-1000/He基因枪轰击 | 第28-29页 |
2.4 轰击后未成熟盾片培养 | 第29-30页 |
2.4.1 诱导愈伤 | 第29页 |
2.4.2 分化和选择 | 第29页 |
2.4.3 将转基因苗移到土中 | 第29-30页 |
2.5 转基因T_0代植株PCR检测 | 第30页 |
2.6 T_0代转基因小麦中wzy1-2基因表达量的检测 | 第30页 |
2.7 结果与分析 | 第30-35页 |
2.7.1 小麦叶片总RNA的提取 | 第30页 |
2.7.2 目的基因wzy1-2的获得 | 第30-31页 |
2.7.3 质粒转化大肠杆菌的结果 | 第31-32页 |
2.7.4 基因枪介导幼胚转化过程 | 第32-33页 |
2.7.5 抗性植株的PCR检测结果 | 第33-34页 |
2.7.6 T_0代转基因小麦中wzy1-2基因表达量的检测 | 第34-35页 |
2.8 讨论 | 第35-37页 |
第三章 小麦脱水素WZY1-2在不同生育期的时空表达规律 | 第37-44页 |
3.1 材料 | 第37页 |
3.1.1 植物材料 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
3.2 方法 | 第37-39页 |
3.2.1 小麦栽培 | 第37页 |
3.2.2 小麦干旱胁迫处理 | 第37页 |
3.2.3 干旱胁迫下WZY1-2蛋白的表达分析 | 第37-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-43页 |
3.3.1 不同发育时期不同程度干旱胁迫对小麦脱水素WZY1-2表达量分析 | 第39-43页 |
3.4 讨论 | 第43-44页 |
第四章 结论与展望 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |