摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 前言 | 第12-28页 |
1.1 FoxO蛋白 | 第12-18页 |
1.1.1 概述 | 第12-13页 |
1.1.2 FoxO的蛋白结构 | 第13页 |
1.1.3 FoxO蛋白的调控方式 | 第13-17页 |
1.1.4 FoxO的生物学功能 | 第17-18页 |
1.2 表观遗传修饰 | 第18-24页 |
1.2.1 概述 | 第18-19页 |
1.2.2 表观遗传修饰的分类 | 第19-23页 |
1.2.3 表观遗传与肿瘤 | 第23-24页 |
1.3 趋化因子 | 第24-26页 |
1.3.1 概述 | 第24-25页 |
1.3.2 趋化因子与肿瘤 | 第25-26页 |
1.4 立体背景、内容及意义 | 第26-28页 |
第二章 材料和方法 | 第28-54页 |
2.1 材料 | 第28-33页 |
2.1.1 细胞系 | 第28页 |
2.1.2 菌株 | 第28页 |
2.1.3 质粒 | 第28-30页 |
2.1.4 主要试剂 | 第30-32页 |
2.1.5 主要仪器 | 第32-33页 |
2.2 DNA相关实验方法 | 第33-40页 |
2.2.1 制备大肠杆菌感受态细胞 | 第33-34页 |
2.2.2 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
2.2.3 普通PCR | 第35-36页 |
2.2.4 目的片段的回收纯化、酶切鉴定、连接与转化 | 第36-38页 |
2.2.5 质粒DNA的提取 | 第38页 |
2.2.6 氯化铯梯度离心法大提质粒 | 第38-40页 |
2.2.7 RNA干扰载体的构建 | 第40页 |
2.3 细胞培养相关实验 | 第40-43页 |
2.3.1 培养基的配制 | 第40页 |
2.3.2 细胞培养及传代 | 第40-41页 |
2.3.3 细胞转染 | 第41-43页 |
2.4 蛋白相关实验 | 第43-47页 |
2.4.1 蛋白的提取 | 第43-44页 |
2.4.2 蛋白浓度测定 | 第44页 |
2.4.3 蛋白免疫印迹实验 | 第44-47页 |
2.5 RNA相关实验 | 第47-48页 |
2.5.1 细胞总RNA的提取 | 第47页 |
2.5.2 逆转录 | 第47-48页 |
2.5.3 实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第48页 |
2.6 荧光素酶活性检测 | 第48-50页 |
2.6.1 原理 | 第48-49页 |
2.6.2 步骤 | 第49-50页 |
2.7 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第50-52页 |
2.7.1 原理 | 第50页 |
2.7.2 实验步骤 | 第50-52页 |
2.8 细胞侵袭实验(Invasion) | 第52-53页 |
2.9 细胞迁移实验(Migration) | 第53-54页 |
第三章 结果与讨论 | 第54-64页 |
3.1 结果 | 第54-62页 |
3.1.1 FoxO调控乳腺癌细胞的侵袭转移 | 第54-56页 |
3.1.2 FoxO转录调控DME | 第56-59页 |
3.1.3 FoxO通过调控DME影响乳腺癌细胞的侵袭转移 | 第59-60页 |
3.1.4 FoxO通过调控DME影响CCLX的表达 | 第60-62页 |
3.2 讨论与展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70页 |