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HrpZm抗大豆疫霉根腐病功能解析及新种质创制

中文摘要第4-7页
abstract第7-10页
第一章 绪论第16-39页
    1.1 Harping蛋白诱导的植物抗病反应第16-19页
        1.1.1 hrp基因的功能及Harpin蛋白的遗传学特征第16-17页
        1.1.2 Harpin蛋白的作用机理第17-18页
        1.1.3 Harpin蛋白的生物功能第18-19页
        1.1.4 转Harpin蛋白编码基因的植物改良第19页
    1.2 大豆在农业生产中的重要地位第19-20页
    1.3 大豆疫霉根腐病对大豆生产的影响第20-22页
    1.4 植物的诱导防御及大豆抗疫霉根腐病的作用机理第22-31页
        1.4.1 植物的抗病的信号途径及调控机制第23-27页
        1.4.2 植物抗病相关的生理指标的变化第27-30页
        1.4.3 大豆抗疫霉根腐病作用机制研究进展第30-31页
    1.5 我国发展转基因大豆的必要性第31-33页
    1.6 抗病转基因大豆国内外发展现状第33-35页
    1.7 研究目的意义、主要内容和技术路线第35-39页
        1.7.1 研究的目的和意义第35-37页
        1.7.2 主要研究内容第37-38页
        1.7.3 技术路线第38-39页
第二章 hrpZpsta基因的优化及在大豆中的遗传转化第39-53页
    2.1 引言第39-40页
    2.2 材料与方法第40-42页
        2.2.1 试验材料第40页
        2.2.2 基因及菌株第40页
        2.2.3 试剂第40页
        2.2.4 实验试剂配制第40-41页
        2.2.5 引物第41-42页
        2.2.6 实验仪器与设备第42页
    2.3 实验方法第42-46页
        2.3.1 hrpZPsta基因优化及载体构建第42页
        2.3.2 农杆菌介导大豆子叶节遗传转化及转基因植株的获得第42-46页
    2.4 结果与分析第46-52页
        2.4.1 hrpZpsta基因的优化第46-47页
        2.4.2 以Bar为选择标记的植物表达载体的构建第47页
        2.4.3 大豆遗传转化与T0代转基因单株的获得第47-52页
    2.5 结论与讨论第52-53页
第三章 HrpZm功能解析与抗性种质材料筛选第53-95页
    3.1 引言第53页
    3.2 材料与方法第53-54页
        3.2.1 实验材料第53页
        3.2.2 Western杂交抗体第53页
        3.2.3 引物第53-54页
        3.2.4 实验试剂第54页
        3.2.5 仪器与设备第54页
    3.3 实验方法第54-70页
        3.3.1 转基因后代单株 PCR 检测第54-55页
        3.3.2 转基因后代单株Bar试纸条检测第55页
        3.3.3 转基因后代单株抗草丁膦筛选第55页
        3.3.4 转基因后代的Southernblot杂交检测第55-64页
        3.3.5 转基因后代的RT-PCR检测第64-66页
        3.3.6 转基因后代的Westernblot杂交检测第66-67页
        3.3.7 转基因后代的ELISA杂交检测第67-68页
        3.3.8 转基因后代的Realtime-PCR检测第68-69页
        3.3.9 受体材料及后代转基因株系生物学功能鉴定及筛选第69-70页
        3.3.10 转hrpZm基因株系遗传和抗病性的稳定性研究第70页
    3.4 试验结果第70-93页
        3.4.1 T_1代转基因材料材料的筛选和获得第70页
        3.4.2 T_2代转基因后代HrpZm功能鉴定及材料筛选第70-74页
        3.4.3 T_3代转基因后代HrpZm功能鉴定及材料筛选第74-80页
        3.4.4 T_4代转基因后代HrpZm功能鉴定及材料筛选第80-88页
        3.4.5 T_5代转基因后代HrpZm功能鉴定及材料筛选第88-91页
        3.4.6 稳定遗传新种质的获得第91-93页
    3.5 讨论与结论第93-95页
第四章 大豆抗病信号途径对HrpZm的响应第95-115页
    4.1 引言第95页
    4.2 材料与方法第95-96页
        4.2.1 材料第95页
        4.2.2 接种方法第95-96页
    4.3 实验方法第96-103页
        4.3.1 信号途径关键基因荧光定量表达分析第96页
        4.3.2 转hrpZm基因抗大豆疫霉根腐病株系抗病防御酶活性的测定第96-103页
    4.4 结果与分析第103-111页
        4.4.1 植物抗病信号途径中关键酶基因转录水平的变化第103-109页
        4.4.2 植物抗病防御相关酶活性的变化第109-111页
    4.5 结论与讨论第111-115页
第五章 结论第115-116页
参考文献第116-133页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第133-134页
致谢第134-135页

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