| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 文献综述 | 第10-24页 |
| 引言 | 第24-26页 |
| 1.实验材料 | 第26-28页 |
| 1.1 试验试剂 | 第26页 |
| 1.2 试剂溶液的配制 | 第26-27页 |
| 1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 1.4 细胞与毒株 | 第28页 |
| 1.5 引物设计与合成 | 第28页 |
| 2.VHSV M蛋白的表达与纯化 | 第28-35页 |
| 2.1 VHSV M基因的克隆 | 第28-31页 |
| 2.1.1 VHS病毒粒子总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.1.2 反转录合成cDNA | 第28-29页 |
| 2.1.3 目的片段的扩增 | 第29-30页 |
| 2.1.4 载体与目的基因的连接 | 第30页 |
| 2.1.5 重组质粒的提取 | 第30-31页 |
| 2.1.6 重组质粒的双酶切 | 第31页 |
| 2.2 构建重组质粒pET32a-M原核表达与筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.1 表达质粒的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.2 重组质粒的阳性筛选 | 第32页 |
| 2.3 M融合蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.4 VHSV M蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 2.4.1 目的蛋白的诱导表达 | 第33页 |
| 2.4.2 试剂盒切胶法纯化蛋白 | 第33-34页 |
| 2.5 融合蛋白抗血清的制备 | 第34页 |
| 2.6 多克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.6.1 简接ELISA的步骤 | 第34-35页 |
| 2.6.2 Western Blot的检测 | 第35页 |
| 2.6.3 间接免疫荧光试验 | 第35页 |
| 3.结果与分析 | 第35-40页 |
| 3.1 VHS病毒M蛋白的扩增及重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2 基质蛋白的诱导结果 | 第36-37页 |
| 3.3 间接ELISA预试验结果和抗体效价的检测 | 第37-38页 |
| 3.4 Western blot结果 | 第38-39页 |
| 3.5 间接免疫荧光试验结果 | 第39-40页 |
| 4.讨论 | 第40-41页 |
| 5.结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |