| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-21页 |
| 1 我国海水鱼类养殖的现状 | 第14-15页 |
| 2 半滑舌鳎病害及免疫研究 | 第15-17页 |
| 2.1 主要病原微生物 | 第15-16页 |
| 2.1.1 哈维氏弧菌 | 第15-16页 |
| 2.1.2 鳗利斯顿氏菌 | 第16页 |
| 2.1.3 迟缓爱德华氏菌 | 第16页 |
| 2.2 半滑舌鳎免疫基因研究现状 | 第16-17页 |
| 3 凝集素研究概述 | 第17-19页 |
| 3.1 半乳糖凝集素galectin的研究概况 | 第17-18页 |
| 3.1.1 galectin的结构和分类 | 第17-18页 |
| 3.2 GRP概述 | 第18-19页 |
| 3.2.1 galectin-10 | 第18页 |
| 3.2.2 OfGallikeB | 第18页 |
| 3.2.3 C-GRP | 第18-19页 |
| 3.3 VIP36概述 | 第19页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 半滑舌鳎CsGRP基因的克隆和表达分析 | 第21-46页 |
| 1 引言 | 第21页 |
| 2 材料方法 | 第21-36页 |
| 2.1 实验用鱼 | 第21-25页 |
| 2.1.2 实验仪器耗材 | 第22页 |
| 2.1.2.1 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.2.2 实验耗材 | 第22页 |
| 2.1.3 实验试剂及配方 | 第22-25页 |
| 2.1.3.1 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3.2 试剂配置方法 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 总RNA提取和cDNA合成 | 第25-26页 |
| 2.2.2 半滑舌鳎GRP基因的克隆 | 第26-32页 |
| 2.2.3 Real time-PCR | 第32-33页 |
| 2.2.4 甲基化分析 | 第33页 |
| 2.2.5 重组蛋白质粒构建 | 第33-34页 |
| 2.2.6 重组蛋白质原核表达 | 第34-35页 |
| 2.2.7 Westernblot | 第35-36页 |
| 2.2.8 重组蛋白的纯化回收 | 第36页 |
| 3 实验结果 | 第36-44页 |
| 3.1 GRP基因全长cDNA克隆 | 第36-38页 |
| 3.2 多重序列比对和进化分析 | 第38-40页 |
| 3.3 Real-timePCR分析 | 第40-42页 |
| 3.3.1 CsGRPmRNA的组织分布 | 第40-41页 |
| 3.3.2 哈维氏弧菌感染后在CsGRP免疫组织中表达 | 第41-42页 |
| 3.4 CsGRP在抗病和易感家系中的表达及甲基化调控分析 | 第42-43页 |
| 3.5 CsGRP蛋白的重组表达 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 5 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 半滑舌鳎VIP36基因的克隆和特征分析 | 第46-57页 |
| 1 引言 | 第46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-49页 |
| 2.1 实验用鱼 | 第46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 2.2.1 总RNA提取和cDNA合成 | 第46页 |
| 2.2.2 VIP36–X1和VIP36-X2ORF区序列验证 | 第46-47页 |
| 2.2.3 全长cDNA的扩增 | 第47页 |
| 2.2.4 序列分析及进化分析 | 第47-49页 |
| 2.2.5 Realtime-PCR | 第49页 |
| 3 实验结果 | 第49-55页 |
| 3.1 VIP36基因两个转录本全长cDNA克隆 | 第49-50页 |
| 3.2 VIP36基因组序列分析 | 第50-51页 |
| 3.3 氨基酸多重比对 | 第51-53页 |
| 3.4 进化分析 | 第53页 |
| 3.5 VIP36-X1和VIP36-X2mRNA的组织分布 | 第53-54页 |
| 3.6 哈维氏弧菌感染后VIP36-X1和VIP36-X2mRNA在免疫组织中表达 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 5 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 论文发表情况 | 第63页 |
