摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 绪论 | 第10-17页 |
1.1 卵母细胞成熟 | 第10-12页 |
1.1.1 卵母细胞成熟过程 | 第10-11页 |
1.1.2 卵母细胞成熟过程中的关键物质的积累 | 第11-12页 |
1.2 小RNA | 第12-15页 |
1.2.1 Pi RNA | 第14-15页 |
1.2.2 MicroRNA | 第15页 |
1.2.3 Endo-siRNA | 第15页 |
1.3 Endo-siRNA对卵母细胞成熟的影响 | 第15-16页 |
1.4 研究目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-23页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂及配置 | 第17-19页 |
2.1.4 主要生物信息学分析软件及信息库 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 卵母细胞获得及体外成熟培养 | 第19页 |
2.2.2 显微注射 | 第19-20页 |
2.2.3 卵母细胞总RNA提取 | 第20页 |
2.2.4 反转录反应 | 第20-21页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR | 第21-22页 |
2.2.6 免疫荧光检测 | 第22页 |
2.2.7 Western Blot | 第22页 |
2.2.8 Annexin-V凋亡检测 | 第22页 |
2.2.9 数据分析 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-33页 |
3.1 DICER1、DROSHA和DGCR8敲减效率的检测 | 第23-24页 |
3.2 DICER1、DROSHA和DGCR8的敲减对猪卵母细胞成熟的影响 | 第24页 |
3.3 DICER1的敲减对猪卵母细胞染色质形态的影响 | 第24-25页 |
3.4 DICER1、DROSHA和DGCR8的敲减对猪卵母细胞减数分裂期纺锤体形态的影响 | 第25-27页 |
3.4.1 猪卵母细胞减数分裂各时期时间点的确定 | 第25-26页 |
3.4.2 DICER1、DROSHA和DGCR8的敲减对猪卵母细胞减数分裂期纺锤体形态的影响 | 第26-27页 |
3.5 DICER1的敲减引起猪卵母细胞凋亡 | 第27-28页 |
3.6 DICER1敲减对卵母细胞小RNA表达的影响 | 第28-30页 |
3.7 讨论 | 第30-32页 |
3.8 本章小结 | 第32-33页 |
结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-44页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |