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陆地棉高强纤维QTL(qFSD03)的精细定位与候选基因的克隆

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略词第12-14页
第一部分 文献综述第14-30页
    第一章 棉花纤维强度研究进展第14-22页
        1.1 棉纤维品质性状相关研究第14-16页
            1.1.1 纤维长度第14页
            1.1.2 纤维强度第14-15页
            1.1.3 纤维细度、成熟度第15-16页
        1.2 棉纤维细胞次生壁合成期研究第16-19页
            1.2.1 棉纤维发育概述第16-17页
            1.2.2 棉纤维细胞次生壁合成相关基因的研究进展第17-19页
        1.3 棉纤维品质性状的基因定位研究第19-22页
            1.3.1 分子标记技术的发展第19页
            1.3.2 纤维品质性状的QTL定位第19-22页
    第二章 测序技术的研究进展第22-30页
        2.1 测序技术的发展第22-24页
            2.1.1 第一代测序技术第22页
            2.1.2 第二代测序技术第22-23页
            2.1.3 第三代测序技术第23-24页
        2.2 简化基因组测序第24-27页
            2.2.1 简化基因组测序的研究进展第24页
            2.2.2 简化基因组测序的技术流程第24-26页
            2.2.3 简化基因组测序的应用第26-27页
        2.3 转录组测序第27-30页
            2.3.1 转录组测序技术的研究进展第27-28页
            2.3.2 转录组测序技术在棉花纤维发育研究领域的应用第28-29页
            2.3.3 转录组测序技术在其他研究领域的应用第29-30页
本研究目的和意义第30-32页
第二部分 研究报告第32-100页
    第三章 陆地棉种内高密度遗传图谱构建及高强纤维QTL的精细定位第32-64页
        3.1 材料与方法第33-38页
            3.1.1 供试材料第33页
                3.1.1.1 高密度遗传图谱构建的实验材料第33页
                3.1.1.2 次级分离群体的构建第33页
            3.1.2 表型鉴定第33-34页
            3.1.3 基因组DNA提取第34页
            3.1.4 群体分析第34页
                3.1.4.1 InDel标记第34页
                3.1.4.2 SNP标记第34页
            3.1.5 RAD文库的构建第34-35页
            3.1.6 RAD标记的开发及分型第35-37页
            3.1.7 遗传图谱的构建和QTL定位第37-38页
        3.2 结果与分析第38-61页
            3.2.1 测序DNA样品的质量检测第38页
            3.2.2 RAD测序文库的构建及质量检测第38页
            3.2.3 RAD测序的数据量统计第38-39页
            3.2.4 RAD标记的开发及基因分型第39-40页
            3.2.5 遗传图谱的构建第40-47页
            3.2.6 遗传图谱与雷蒙德氏棉基因组物理图谱的共线性分析第47-49页
            3.2.7 QTL定位第49-53页
            3.2.8 高强纤维QTL的精细定位第53-61页
                3.2.8.1 F_2群体纤维品质性状的表现第53-54页
                3.2.8.2 F_2群体纤维品质构成因子的相关性分析第54-55页
                3.2.8.3 F_2群体亲本的基因型分析第55-56页
                3.2.8.4 精细定位标记的开发第56-58页
                3.2.8.5 利用F_2群体对高强纤维QTL精细定位第58-61页
        3.3 讨论第61-64页
            3.3.1 标记的开发在遗传研究中的意义第61-62页
            3.3.2 多倍体作物的SNP鉴定第62页
            3.3.3 使用高密度的RAD遗传图谱精细定位高强纤维QTL第62-64页
    第四章 转录组分析与QFS_(D03)候选基因的克隆第64-100页
        4.1 材料与方法第64-68页
            4.1.1 转录组测序的材料准备第64-65页
            4.1.2 总RNA的提取及质量检测第65页
            4.1.3 RNA测序文库的构建第65页
            4.1.4 生物信息学分析第65-67页
                4.1.4.1 测序数据的质量评估第66页
                4.1.4.2 差异表达基因分析第66页
                4.1.4.3 结构变异基因分析第66-67页
            4.1.5 实时荧光定量PCR第67-68页
            4.1.6 候选基因的克隆第68页
                4.1.6.1 引物设计第68页
                4.1.6.2 PCR扩增,胶回收,连接,转化及阳性克隆的检测第68页
        4.2 结果与分析第68-96页
            4.2.1 测序RNA样品的提取与检测第68-69页
            4.2.2 测序cDNA文库构建及质量检测第69页
            4.2.3 测序数据质量评估及预处理第69-73页
                4.2.3.1 FASTQC质量评估第70页
                4.2.3.2 SolexaQA对原始数据的预处理第70-73页
            4.2.4 差异表达基因分析第73-85页
                4.2.4.1 Reads回帖参考基因组的结果分析第73-74页
                4.2.4.2 RNA-seq整体质量评估第74-75页
                4.2.4.3 差异表达基因的筛选第75-76页
                4.2.4.4 差异基因的聚类与功能富集第76-78页
                4.2.4.5 差异基因的GO富集分析第78-85页
            4.2.5 结构变异分析及InDel引物的开发第85-86页
            4.2.6 候选基因分析第86-96页
                4.2.6.1 候选基因的筛选第86-89页
                4.2.6.2 候选基因的定量验证第89-91页
                4.2.6.3 候选基因的克隆第91页
                4.2.6.4 候选基因的分析第91-94页
                4.2.6.5 候选基因与纤维品质性状的相关性检测第94-96页
        4.3 讨论第96-100页
            4.3.1 纤维强度相关基因的表达调控第96-97页
            4.3.2 转录组测序辅助纤维强度基因的鉴定第97-98页
            4.3.3 候选基因的功能分析第98页
            4.3.4 SSR重复基元与性状表现的关系第98-100页
全文结论第100-102页
创新点第102-104页
参考文献第104-118页
附录第118-136页
致谢第136-138页
攻读博士学位期间发表及待发表论文第138页

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