| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 术语及符号说明 | 第11-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-36页 |
| 1.1 虾青素概述 | 第16-23页 |
| 1.1.1 青素的结构与性质 | 第16-17页 |
| 1.1.2 虾青素的安全性及其应用 | 第17-21页 |
| 1.1.2.1 作为饲料或食品添加剂 | 第17-18页 |
| 1.1.2.2 抗肿瘤及增强免疫性的作用 | 第18-21页 |
| 1.1.3 虾青素的生产 | 第21-22页 |
| 1.1.3.1 化学合成的虾青素 | 第21页 |
| 1.1.3.2 天然虾青素的积累 | 第21-22页 |
| 1.1.4 虾青素积累与脂肪酸合成的关系 | 第22-23页 |
| 1.2 雨生红球藻的研究概况 | 第23-33页 |
| 1.2.1 雨生红球藻的一般特征 | 第23-25页 |
| 1.2.1.1 雨生红球藻的形态学特征 | 第23-24页 |
| 1.2.1.2 雨生红球藻的培养 | 第24-25页 |
| 1.2.2 雨生红球藻诱导生产虾青素的特点 | 第25-28页 |
| 1.2.2.1 雨生红球藻积累虾青素的生理机制 | 第25-26页 |
| 1.2.2.2 雨生红球藻积累虾青素的分子机制 | 第26-28页 |
| 1.2.3 雨生红球藻积累虾青素的诱导因素 | 第28-33页 |
| 1.3 论文的研究内容、目的及意义 | 第33-36页 |
| 1.3.2 研究目的和意义 | 第34-35页 |
| 1.3.3 实验技术路线 | 第35-36页 |
| 第二章 雨生红球藻Haematococcus pluvialis LUGU生长和诱导培养基的筛选 | 第36-44页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第36页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.3 八种培养基的配置 | 第37页 |
| 2.1.4 雨生红球藻的培养方法 | 第37页 |
| 2.1.5 雨生红球藻的诱导方法 | 第37-38页 |
| 2.1.6 生物量及生物量产率的测定方法 | 第38-39页 |
| 2.1.7 虾青素的提取与测定方法 | 第39页 |
| 2.2 结果与分析 | 第39-43页 |
| 2.2.1 H pluvialis LUGU在不同培养基中生物量的测定 | 第39-41页 |
| 2.2.2 不同培养基对H pluvia LUGU诱导条件下藻细胞生长与虾青素积累的影响 | 第41-43页 |
| 2.3 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 不同诱导条件对雨生红球藻Haematococcus pluvialis LUGU积累虾青素的影响 | 第44-51页 |
| 3.1 材料与方法 | 第44-45页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第44页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第44页 |
| 3.1.3 雨生红球藻的诱导方法 | 第44-45页 |
| 3.1.4 黄腐酸、茴香醚分别诱导雨生红球藻 | 第45页 |
| 3.1.5 茴香醚与黄腐酸协同诱导雨生红球藻 | 第45页 |
| 3.1.6 雨生红球藻诱导阶段生物量及生物量产率的测定方法 | 第45页 |
| 3.1.7 虾青素的提取与测定 | 第45页 |
| 3.2 结果与分析 | 第45-49页 |
| 3.2.1 茴香醚对雨生红球藻生长及积累虾青素的影响 | 第45-47页 |
| 3.2.2 黄腐酸对雨生红球藻生长及积累虾青素的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.3 茴香醚与黄腐酸的协同作用对雨生红球藻生长及积累虾青素的影响 | 第48-49页 |
| 3.3 本章小结 | 第49-51页 |
| 第四章 种子液的不同生长状态在茴香醚对雨生红球藻Haematococcus pluvialis LUGU诱导中的影响及其机理研究 | 第51-70页 |
| 4.1 材料与方法 | 第51-53页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第51-52页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 4.1.3 不同状态的种子液的培养 | 第52页 |
| 4.1.4 茴香醚对不同状态种子液的诱导 | 第52页 |
| 4.1.5 测定诱导阶段生物量以及虾青素的提取与产量测定 | 第52-53页 |
| 4.1.6 诱导阶段脂肪酸甲酯化 | 第53页 |
| 4.1.7 脂肪酸组成的测定 | 第53页 |
| 4.2 雨生红球藻合成虾青素及脂肪酸关键酶基因的克隆与表达 | 第53-58页 |
| 4.2.1 Trizo1法提取雨生红球藻中总RNA | 第53-54页 |
| 4.2.2 合成及验证cDNA | 第54页 |
| 4.2.3 克隆与生物合成虾青素及脂肪酸相关的酶基因 | 第54-57页 |
| 4.2.3.1 雨生红球藻相关酶基因PCR扩增 | 第54-55页 |
| 4.2.3.2 雨生红球藻酶基因PCR胶回收、连接及转化 | 第55-56页 |
| 4.2.3.3 菌液PCR及测序比对 | 第56-57页 |
| 4.2.4 设计并验证荧光定量引物 | 第57页 |
| 4.2.5 对诱导后的样品进行实时荧光定量PCR | 第57-58页 |
| 4.2.6 关键酶基因表达分析方法 | 第58页 |
| 4.3 结果与分析 | 第58-68页 |
| 4.3.1 茴香醚对不同生长状态下雨生红球藻的生长、虾靑素及脂肪睃的影响 | 第58-60页 |
| 4.3.2 酶基因克隆结果 | 第60-61页 |
| 4.3.3 荧光定量引物验证结果及定量分析方法的确定 | 第61页 |
| 4.3.4 茴香醚对藻细胞合成虾青素关键酶基因表达量的影响 | 第61-64页 |
| 4.3.5 虾青素诱导过程中脂肪酸成分及相关基因表达量的测定 | 第64-68页 |
| 4.3.5.1 茴香醚对藻细胞内脂肪酸组成的影响 | 第64-66页 |
| 4.3.5.1 茴香醚对脂肪酸相关基因表达量的影响 | 第66-68页 |
| 4.4 本章小结 | 第68-70页 |
| 第五章 结论、创新点与展望 | 第70-74页 |
| 5.1 结论 | 第70-72页 |
| 5.2 创新点 | 第72-73页 |
| 5.3 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文 | 第88-89页 |
| 附录B 八种常见培养基的配方 | 第89-90页 |
| 附录C Haematococcus pluvialis LUGU中七个酶基因序列构建的进化树 | 第90-91页 |
| 附录D 18S rRNA及七个虾青素酶基因荧光定量的扩增曲线、溶解曲线和标准曲线 | 第91-98页 |
