| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 一、前言 | 第13-23页 |
| 1.1 干旱胁迫下植物的应答机制 | 第13-17页 |
| 1.1.1 干旱影响植物生长 | 第13-14页 |
| 1.1.2 干旱条件下植物的胁迫应答反应 | 第14-17页 |
| 1.2 ABA信号通路的分子机制 | 第17-20页 |
| 1.2.1 ABA信号通路的分子机制 | 第18-20页 |
| 1.3 植物PP2C蛋白磷酸酶 | 第20-21页 |
| 1.4 立题依据及研究意义 | 第21-23页 |
| 二、材料与方法 | 第23-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 载体和菌种 | 第23页 |
| 2.1.3 常用化学试剂、工具酶及试剂盒 | 第23页 |
| 2.1.4 常用储液、缓冲液、培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.5 常用仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 制备大肠杆菌感受态细胞 | 第24-25页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第25-27页 |
| 2.2.3 酵母双杂交实验 | 第27页 |
| 2.2.4 棉花的种植、干旱处理及材料的收取 | 第27-28页 |
| 2.2.5 棉花基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.6 丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_2O_2)含量、植物总超氧化物歧化酶(SOD)活力的过氧化物酶(POD)活力的测定 | 第29页 |
| 2.2.7 棉花叶片RNA的提取、消化及逆转录 | 第29-30页 |
| 2.2.8 cDNA质量的检测 | 第30页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
| 2.2.10 生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 三、实验结果 | 第32-57页 |
| 3.1 GhDRPP1T3、T4代转基因棉花的种植、阳性苗鉴定及表达量检测 | 第32-35页 |
| 3.1.1 转基因棉花的种植 | 第32页 |
| 3.1.2 GhDRPP1T3、T4代转基因棉花的阳性鉴定 | 第32-34页 |
| 3.1.3 GhDRPP1T3、T4代转基因棉花的表达量检测 | 第34-35页 |
| 3.2 T3、T4代转基因棉花的干旱处理及生理指标的测定 | 第35-39页 |
| 3.2.1 T3代转基因棉花的干旱处理及生理指标的测定 | 第35-37页 |
| 3.2.2 T4代转基因棉花的干旱处理及生理指标的测定 | 第37-39页 |
| 3.3 对T4代转基因转基因棉花其他功能探究 | 第39-40页 |
| 3.4 酵母双杂交验证GhDRPP1与5个全长蛋白的相互作用 | 第40-42页 |
| 3.4.1 pGADT7载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.4.2 酵母双杂交验证GhDRPP1与5个全长蛋白的相互作用 | 第41-42页 |
| 3.5 GhDRPP1转基因株系干旱时期棉花叶片转录组分析及验证 | 第42-57页 |
| 3.5.1 RNA-seq整体质量评估 | 第42-44页 |
| 3.5.2 转录组中差异基因的整体分布情况 | 第44-48页 |
| 3.5.3 差异表达基因与GhDRPP1的共表达分析 | 第48-50页 |
| 3.5.4 干旱条件下GhDRPP1 OE转基因株系与野生型相比差异基因的KEGG分析 | 第50-51页 |
| 3.5.5 干旱条件下GhDRPP1 RNAi株系与野生型相比差异基因的KEGG分析 | 第51-53页 |
| 3.5.6 干旱条件下GhDRPP1 OE与GhDRPP1 RNAi株系相比差异基因的KEGG分析 | 第53-54页 |
| 3.5.7 GhDRPP1通过作用于广泛的调控网络来影响棉花的抗旱性 | 第54-57页 |
| 四、讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 GhDRPP1参与棉花干旱胁迫应答 | 第57页 |
| 4.2 Gh DRPP1可能与其他蛋白互作从而实现对代谢的调控 | 第57-58页 |
| 4.3 GhDRPP1对棉花抗旱性的影响是通过激素信号转导途径和多种代谢通路广泛地调控的结果 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-80页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
