摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文缩略表 | 第10-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-31页 |
1.1 转基因棉花的发展历史及现状 | 第13-15页 |
1.1.1 转基因棉花的发展历史及现状 | 第13-14页 |
1.1.2 我国转基因棉花的现状 | 第14-15页 |
1.2 转基因棉花培育常用方法 | 第15-18页 |
1.2.1 农杆菌介导法 | 第15-16页 |
1.2.2 花粉管通道法 | 第16-17页 |
1.2.3 基因枪轰击法 | 第17-18页 |
1.3 常用的抗虫基因 | 第18-23页 |
1.3.1 苏云芽孢杆菌 | 第18-19页 |
1.3.2 蛋白酶抑制剂 | 第19-20页 |
1.3.3 动物毒素蛋白 | 第20-21页 |
1.3.4 具有抗虫作用的植物凝集素 | 第21-23页 |
1.4 雪花莲凝集素(GNA) | 第23-28页 |
1.4.1 雪花莲凝集素的结构和功能 | 第23-24页 |
1.4.2 GNA杀虫机理 | 第24页 |
1.4.3 雪花莲凝集素的应用 | 第24-26页 |
1.4.4 雪花莲凝集素的其它作用 | 第26-28页 |
1.5 本课题研究的目的意义 | 第28-31页 |
第2章 转ASGNA拟南芥的鉴定及抗虫性分析 | 第31-49页 |
2.1 实验材料 | 第31-34页 |
2.1.1 植物材料、载体和宿主菌以及蚜虫、小菜蛾 | 第31-32页 |
2.1.2 实验试剂 | 第32-33页 |
2.1.3 实验主要使用仪器和设备 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-37页 |
2.2.1. 拟南芥RNA提取及逆转录 | 第34-35页 |
2.2.2 转基因拟南芥ASGNA蛋白含量测定 | 第35-36页 |
2.2.3 转基因拟南芥的抗虫性分析 | 第36-37页 |
2.3 结果分析 | 第37-46页 |
2.3.1 转ASGNA拟南芥筛选 | 第37-39页 |
2.3.2 转基因拟南芥抗蚜虫分析 | 第39-43页 |
2.3.3 转ASGNA基因拟南芥对小菜蛾的影响 | 第43-46页 |
2.4 讨论 | 第46-49页 |
第3章 利用棉花子叶瞬时表达系统分析ASGNA的抗虫性 | 第49-61页 |
3.1 实验材料 | 第49-54页 |
3.1.1 试剂盒 | 第49页 |
3.1.2 ASGNA-eGFP融合蛋白载体构建 | 第49-53页 |
3.1.3 瞬时表达ASGNA-eGFP的检测 | 第53-54页 |
3.1.4 瞬时表达ASGNA-eGFP的抗虫性分析 | 第54页 |
3.2 结果分析 | 第54-59页 |
3.2.1 构建ASGNA-eGFP融合蛋白表达载体 | 第54-55页 |
3.2.2 ASGNA瞬时表达检测 | 第55-56页 |
3.2.3 瞬时表达ASGNA蛋白子叶的抗虫性分析 | 第56-59页 |
3.3 讨论 | 第59-61页 |
第4章 转ASGNA棉花的培育及鉴定 | 第61-69页 |
4.1 实验材料 | 第61-63页 |
4.1.1 使用棉种 | 第61页 |
4.1.2 农杆菌转化法转ASGNA棉花组织培养 | 第61-62页 |
4.1.3 转基因棉花再生苗DNA检测 | 第62-63页 |
4.2 结果与分析 | 第63-67页 |
4.2.1 转ASGNA棉花愈伤组织的诱导 | 第63页 |
4.2.2 转ASGNA胚性愈伤的诱导 | 第63-64页 |
4.2.3 转ASGNA棉花再生苗的获得 | 第64-65页 |
4.2.4 再生棉花植株的分子鉴定 | 第65-67页 |
4.3 讨论 | 第67-69页 |
结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第85页 |