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转ASGNA拟南芥鉴定、抗虫性分析和对棉花的遗传转化

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
中英文缩略表第10-13页
第1章 文献综述第13-31页
    1.1 转基因棉花的发展历史及现状第13-15页
        1.1.1 转基因棉花的发展历史及现状第13-14页
        1.1.2 我国转基因棉花的现状第14-15页
    1.2 转基因棉花培育常用方法第15-18页
        1.2.1 农杆菌介导法第15-16页
        1.2.2 花粉管通道法第16-17页
        1.2.3 基因枪轰击法第17-18页
    1.3 常用的抗虫基因第18-23页
        1.3.1 苏云芽孢杆菌第18-19页
        1.3.2 蛋白酶抑制剂第19-20页
        1.3.3 动物毒素蛋白第20-21页
        1.3.4 具有抗虫作用的植物凝集素第21-23页
    1.4 雪花莲凝集素(GNA)第23-28页
        1.4.1 雪花莲凝集素的结构和功能第23-24页
        1.4.2 GNA杀虫机理第24页
        1.4.3 雪花莲凝集素的应用第24-26页
        1.4.4 雪花莲凝集素的其它作用第26-28页
    1.5 本课题研究的目的意义第28-31页
第2章 转ASGNA拟南芥的鉴定及抗虫性分析第31-49页
    2.1 实验材料第31-34页
        2.1.1 植物材料、载体和宿主菌以及蚜虫、小菜蛾第31-32页
        2.1.2 实验试剂第32-33页
        2.1.3 实验主要使用仪器和设备第33-34页
    2.2 实验方法第34-37页
        2.2.1. 拟南芥RNA提取及逆转录第34-35页
        2.2.2 转基因拟南芥ASGNA蛋白含量测定第35-36页
        2.2.3 转基因拟南芥的抗虫性分析第36-37页
    2.3 结果分析第37-46页
        2.3.1 转ASGNA拟南芥筛选第37-39页
        2.3.2 转基因拟南芥抗蚜虫分析第39-43页
        2.3.3 转ASGNA基因拟南芥对小菜蛾的影响第43-46页
    2.4 讨论第46-49页
第3章 利用棉花子叶瞬时表达系统分析ASGNA的抗虫性第49-61页
    3.1 实验材料第49-54页
        3.1.1 试剂盒第49页
        3.1.2 ASGNA-eGFP融合蛋白载体构建第49-53页
        3.1.3 瞬时表达ASGNA-eGFP的检测第53-54页
        3.1.4 瞬时表达ASGNA-eGFP的抗虫性分析第54页
    3.2 结果分析第54-59页
        3.2.1 构建ASGNA-eGFP融合蛋白表达载体第54-55页
        3.2.2 ASGNA瞬时表达检测第55-56页
        3.2.3 瞬时表达ASGNA蛋白子叶的抗虫性分析第56-59页
    3.3 讨论第59-61页
第4章 转ASGNA棉花的培育及鉴定第61-69页
    4.1 实验材料第61-63页
        4.1.1 使用棉种第61页
        4.1.2 农杆菌转化法转ASGNA棉花组织培养第61-62页
        4.1.3 转基因棉花再生苗DNA检测第62-63页
    4.2 结果与分析第63-67页
        4.2.1 转ASGNA棉花愈伤组织的诱导第63页
        4.2.2 转ASGNA胚性愈伤的诱导第63-64页
        4.2.3 转ASGNA棉花再生苗的获得第64-65页
        4.2.4 再生棉花植株的分子鉴定第65-67页
    4.3 讨论第67-69页
结论第69-71页
参考文献第71-83页
致谢第83-85页
攻读学位期间的研究成果第85页

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