| 摘要 | 第7-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 植物的次生代谢及储藏器官 | 第9-11页 |
| 1.1.1 植物的次生代谢 | 第9页 |
| 1.1.2 棉酚及其生物学作用 | 第9-10页 |
| 1.1.3 棉酚的储藏器官 | 第10-11页 |
| 1.2 棉酚代谢途径及其关键酶基因的克隆 | 第11-14页 |
| 1.2.1 棉酚代谢途径 | 第11-12页 |
| 1.2.2 棉酚合成关键酶基因杜松烯合酶的研究 | 第12-13页 |
| 1.2.3 基因克隆的策略 | 第13-14页 |
| 1.3 低酚棉育种研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.1 低酚棉育种新目标 | 第14-15页 |
| 1.3.2 棉花色素腺体延缓形成性状 | 第15页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 1.5 技术路线 | 第16-17页 |
| 第二部分 色素腺体表型及棉酚含量的测定 | 第17-26页 |
| 2.1 供试材料及试剂 | 第17页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第17页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-19页 |
| 2.2.1 色素腺体密度测定 | 第17-18页 |
| 2.2.2 棉酚含量测定 | 第18-19页 |
| 2.3 结果与分析 | 第19-24页 |
| 2.3.1 三种近等基因系色素腺体分布 | 第19-22页 |
| 2.3.2 GI1、GI3品系三个不同时期各组织棉酚含量的测定 | 第22-23页 |
| 2.3.3 GI1、GI3品系各组织在不同时期棉酚含量的变化 | 第23-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 2.4.1 色素腺体分布的多样性 | 第24页 |
| 2.4.2 色素腺体与棉酚相关性 | 第24-25页 |
| 2.4.3 色素腺体延缓形成 | 第25页 |
| 2.5 结论 | 第25-26页 |
| 第三部分 棉花杜松烯合酶基因的克隆与序列分析 | 第26-56页 |
| 3.1 供试材料及试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第26页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第26页 |
| 3.1.3 引物及测序 | 第26页 |
| 3.1.4 试验仪器 | 第26-27页 |
| 3.2 试验方法 | 第27-42页 |
| 3.2.1 DNA的提取 | 第27-28页 |
| 3.2.2 总RNA的提取 | 第28页 |
| 3.2.3 mRNA的分离 | 第28-29页 |
| 3.2.4 mRNA反转录 | 第29-31页 |
| 3.2.5 引物设计 | 第31-32页 |
| 3.2.6 杜松烯合酶基因cDNA中间部分的克隆 | 第32-33页 |
| 3.2.7 杜松烯合酶基因cDNA5'端的克隆 | 第33页 |
| 3.2.8 杜松烯合酶基因的3'RACE | 第33-37页 |
| 3.2.9 3'cDNA末端的扩增 | 第37-38页 |
| 3.2.10 杜松烯合酶基因的基因组序列克隆 | 第38-39页 |
| 3.2.11 扩增产物的检测及回收 | 第39-40页 |
| 3.2.12 LB培养基的配方 | 第40页 |
| 3.2.13 载体的连接及转化 | 第40-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-54页 |
| 3.3.1 总RNA质量的检测 | 第42页 |
| 3.3.2 基因组DNA的质量检测 | 第42-43页 |
| 3.3.3 杜松烯合酶基因中间片段的合成 | 第43-44页 |
| 3.3.4 杜松烯合酶基因5'端片段的合成 | 第44页 |
| 3.3.5 杜松烯合酶基因3'端片段的合成 | 第44-46页 |
| 3.3.6 完整杜松烯合酶基因的拼接 | 第46-47页 |
| 3.3.7 ABHcad基因cDNA的生物信息学分析 | 第47-50页 |
| 3.3.8 杜松烯合酶基因的基因组序列克隆及分析 | 第50页 |
| 3.3.9 杜松烯合酶基因的基因组序列生物信息学分析 | 第50-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54页 |
| 3.5 结论 | 第54-56页 |
| 第四部分 GI1、GI2、GI3品系杜松烯合酶基因的时空表达 | 第56-66页 |
| 4.1 供试材料及试剂 | 第56页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第56页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第56页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第56页 |
| 4.2 试验方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 总RNA的小量提取 | 第56-57页 |
| 4.2.2 RNA的浓度测定 | 第57页 |
| 4.2.3 RNA纯度的检测 | 第57页 |
| 4.2.4 cDNA第一链的合成 | 第57-58页 |
| 4.2.5 实时定量荧光PCR | 第58页 |
| 4.2.6 内参基因的选择及荧光定量引物 | 第58-59页 |
| 4.2.7 数据统计分析 | 第59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-64页 |
| 4.3.1 不同时期GI1、GI2、GI3近等位基因系各组织中ABHcad基因表达量比较 | 第59-61页 |
| 4.3.2 不同组织中GI1、GI2和GI3近等位基因系ABHcad基因表达量的变化动态 | 第61-62页 |
| 4.3.3 根组织中ABHcad基因表达量和棉酚含量的关系 | 第62-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-65页 |
| 4.5 结论 | 第65-66页 |
| 第五部分 全文结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| Abstract | 第71-72页 |
| 致谢 | 第73页 |
