摘要 | 第3-6页 |
abstract | 第6-8页 |
英文缩写一览表 | 第11-12页 |
第1章 引言 | 第12-26页 |
1.1 概述 | 第12页 |
1.2 哺乳动物精子的发生、成熟与受精 | 第12-17页 |
1.2.1 精子的发生 | 第12-14页 |
1.2.2 精子的成熟、获能和超活化运动 | 第14-15页 |
1.2.3 顶体反应与受精过程 | 第15-17页 |
1.3 精子胞内外pH对精子细胞机制的调控作用 | 第17-18页 |
1.4 离子通道在调控成熟精子功能中的作用 | 第18-22页 |
1.4.1 KSper通道 | 第20-21页 |
1.4.2 CatSper通道 | 第21-22页 |
1.5 调节精子胞内pH的主要转运体 | 第22-24页 |
1.5.1 几种重要的H~+转运体 | 第22-23页 |
1.5.2 精子特异性的转运体(sNHE) | 第23-24页 |
1.6 sNHE对精子特异性钾离子通道的作用研究进展 | 第24页 |
1.7 本课题的目的与意义 | 第24-26页 |
第2章 材料和方法 | 第26-42页 |
2.1 材料 | 第26-30页 |
2.1.1 实验材料 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂及药品 | 第26-29页 |
2.1.3 主要仪器及设备 | 第29-30页 |
2.2 方法 | 第30-42页 |
2.2.1 实验相关溶液配方 | 第30-33页 |
2.2.2 小鼠精子的提取 | 第33页 |
2.2.3 人精子样本的收集 | 第33-34页 |
2.2.4 膜片钳的记录 | 第34页 |
2.2.5 精子胞内pH的测定 | 第34-35页 |
2.2.6 精子胞内Ca~(2+)的测定 | 第35-36页 |
2.2.7 精子单细胞Ca~(2+)的测定 | 第36页 |
2.2.8 精子蛋白的提取和检测 | 第36-38页 |
2.2.9 精子运动活力的测定(CASA) | 第38-39页 |
2.2.10 精子爬高实验的测定 | 第39页 |
2.2.11 精子顶体反应的测定 | 第39-40页 |
2.2.12 免疫荧光 | 第40-41页 |
2.2.13 数据分析 | 第41-42页 |
第3章 结果 | 第42-61页 |
第一部分 sNHE对小鼠精子特异性离子通道的调控作用研究 | 第42-47页 |
3.1 抑制sNHE可导致小鼠精子膜电位发生去极化 | 第42-44页 |
3.2 抑制sNHE可降低小鼠精子胞内Ca~(2+) | 第44-46页 |
3.3 抑制sNHE可降低小鼠的顶体反应发生率 | 第46-47页 |
第二部分 sNHE对人精子特异性离子通道的调控作用研究 | 第47-61页 |
3.4 sNHE与SLO3在人精子中存在相似定位 | 第47-49页 |
3.5 抑制sNHE可降低人精子胞内pH | 第49-50页 |
3.6 sNHE抑制剂对人精子KSper通道没有抑制作用 | 第50-53页 |
3.7 抑制sNHE可降低人精子胞内Ca~(2+) | 第53-56页 |
3.8 抑制sNHE对人精子运动、爬高和顶体反应的影响 | 第56-59页 |
3.9 抑制sNHE可降低人精子CatSper通道电流 | 第59-61页 |
第4章 讨论 | 第61-64页 |
4.1 探讨sNHE调控小鼠精子KSper通道的机制 | 第61-62页 |
4.2 探讨sNHE调控人精子KSper通道、CatSper通道的机制 | 第62-64页 |
第5章 结论与展望 | 第64-65页 |
5.1 结论 | 第64页 |
5.2 进一步工作的方向 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第71页 |