| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第1章 前言 | 第8-22页 |
| ·结核病简介 | 第8-12页 |
| ·结核病历史及病原学 | 第8-9页 |
| ·结核病的现状 | 第9-10页 |
| ·结核分枝杆菌的传播及致病机理 | 第10-12页 |
| ·结核杆菌的疫苗研究 | 第12-17页 |
| ·卡介苗 | 第12-13页 |
| ·DNA 疫苗 | 第13-15页 |
| ·减毒活菌疫苗 | 第15-16页 |
| ·病毒载体疫苗 | 第16-17页 |
| ·重组蛋白疫苗 | 第17-20页 |
| ·作用机理及现状 | 第17-18页 |
| ·佐剂使用 | 第18-19页 |
| ·免疫方案 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的，设计思路和方案 | 第20-22页 |
| ·研究目的 | 第20-21页 |
| ·设计思路及方案 | 第21-22页 |
| 第二章 原核表达载体的构建 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第22页 |
| ·菌种及质粒 | 第22-23页 |
| ·溶液及培养基配置 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·BCG 的培养及基因组的提取 | 第24页 |
| ·引物的设计及合成 | 第24-25页 |
| ·目的基因的获得 | 第25-27页 |
| ·融合基因与pET‐20b 的构建 | 第27-29页 |
| ·实验结果 | 第29-34页 |
| ·pET‐20b‐ EAST6 的构建结果 | 第29-30页 |
| ·pET‐20b‐Ag85B 的构建结果 | 第30-31页 |
| ·pET‐20b‐ Ag85B‐ EAST6 的构建结果 | 第31-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 重组蛋白的表达、纯化及复性 | 第35-51页 |
| ·实验材料 | 第35-38页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第35页 |
| ·菌种及质粒 | 第35-36页 |
| ·溶液及培养基配制 | 第36-38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·重组质粒pET‐20b‐ Ag85B‐ EAST6 转化大肠杆菌BL21 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第39页 |
| ·重组蛋白的纯化、复性 | 第39-41页 |
| ·West Bloting | 第41页 |
| ·内毒素检测 | 第41-43页 |
| ·实验结果 | 第43-49页 |
| ·蛋白的表达纯化与West Bloting 鉴定结果 | 第43-48页 |
| ·蛋白的复性结果 | 第48-49页 |
| ·蛋白的Micro‐BCA 定量结果 | 第49页 |
| ·内毒素检测结果 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第4章 免疫效果的初步研究 | 第51-71页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·菌种及试剂 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-59页 |
| ·动物免疫及方案 | 第52-53页 |
| ·脾细胞的分离 | 第53页 |
| ·酶联免疫吸附实验测定抗体效价 | 第53-55页 |
| ·Th1/Th2 ELISA | 第55-56页 |
| ·T 细胞亚型分选实验 | 第56-57页 |
| ·IFN‐r 的ELISPOT 实验 | 第57-58页 |
| ·体外细胞杀伤实验 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-69页 |
| ·ELISA 测定小鼠血清抗体效价结果 | 第59-60页 |
| ·Th1/Th2 细胞因子检测结果 | 第60-63页 |
| ·T 细胞亚型分选实验结果 | 第63-65页 |
| ·ELISPOT 结果 | 第65-68页 |
| ·CTL 试验结果 | 第68-69页 |
| ·本章小结 | 第69-71页 |
| 第5章 总结与展望 | 第71-73页 |
| ·总结 | 第71-72页 |
| ·创新点 | 第72页 |
| ·展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 中文摘要 | 第77-80页 |
| Abstract | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
