| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第14-21页 |
| 1.1 流感病毒的概述 | 第14页 |
| 1.2 流感病毒的病原学特点 | 第14-15页 |
| 1.3 流感病毒的基因组及其编码的蛋白 | 第15-17页 |
| 1.3.1 表面基因组及其编码的蛋白 | 第15-16页 |
| 1.3.2 内部基因组及其编码的蛋白 | 第16-17页 |
| 1.4 影响流感病毒致病性的因素 | 第17-18页 |
| 1.5 犬流感病毒的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.6 H3N2亚型犬流感病毒的危害 | 第19-20页 |
| 1.7 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 CIV复制的关键基因的筛选与鉴定 | 第21-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 毒株与实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 生物学软件 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 仪器 | 第22页 |
| 2.1.5 引物 | 第22-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 病毒的纯化与增殖 | 第25页 |
| 2.2.2 全基因测序 | 第25-30页 |
| 2.2.3 遗传进化分析 | 第30页 |
| 2.2.4 病毒的拯救及鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.5 病毒的扩增及EID50的测定 | 第31页 |
| 2.2.6 小鼠致病性实验 | 第31页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-38页 |
| 2.3.1 病毒全基因组PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| 2.3.2 全基因序列测序结果 | 第32-33页 |
| 2.3.3 遗传进化分析 | 第33-36页 |
| 2.3.4 重组病毒的拯救结果 | 第36页 |
| 2.3.5 病毒EID50的测定 | 第36页 |
| 2.3.6 小鼠致病性实验 | 第36-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 CIV复制的关键氨基酸位点的筛选与鉴定 | 第39-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.1.1 毒株与实验动物 | 第39页 |
| 3.1.2 生物学软件 | 第39页 |
| 3.1.3 试剂和仪器 | 第39-40页 |
| 3.1.4 引物 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.2.1 点突变pBD表达质粒的构建 | 第40-41页 |
| 3.2.2 病毒的拯救与鉴定 | 第41页 |
| 3.2.3 病毒的扩增和EID50的测定 | 第41页 |
| 3.2.4 小鼠的致病性实验 | 第41页 |
| 3.2.5 点突变重组病毒在MDCK细胞上的生长曲线 | 第41页 |
| 3.2.6 统计学分析 | 第41-42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-44页 |
| 3.3.1 上下片段PCR结果 | 第42页 |
| 3.3.2 点突变株重组病毒拯救结果 | 第42页 |
| 3.3.3 病毒EID50的测定 | 第42-43页 |
| 3.3.4 小鼠致病性实验 | 第43页 |
| 3.3.5 点突变重组病毒在MDCK细胞上的生长曲线 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 影响CIV复制的分子机制 | 第45-51页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 病毒与细胞 | 第45页 |
| 4.1.2 生物学软件 | 第45页 |
| 4.1.3 试剂 | 第45页 |
| 4.1.4 仪器 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.2.1 点突变重组病毒的NA酶活性测定 | 第45-46页 |
| 4.2.2 点突变重组病毒的红细病毒释放试验 | 第46页 |
| 4.2.3 C1-NA(K54E)和C1-NA(S154P)重组病毒在MDCK上释放子代病毒的能力 | 第46-47页 |
| 4.3 实验结果 | 第47-50页 |
| 4.3.1 点突变重组病毒的NA酶活性测定 | 第47-48页 |
| 4.3.2 点突变重组病毒的红细胞病毒释放试验 | 第48-49页 |
| 4.3.3 C1-NA(K54E)和C1-NA(S154P)重组病毒在MDCK上释放子代病毒的能力 | 第49-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
