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草莓果实成熟软化相关基因的研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
第一章 文献综述第16-31页
    1.1 果实细胞壁结构、组分变化与果实成熟软化第16-21页
        1.1.1 细胞壁的化学组成第16-17页
        1.1.2 细胞壁结构变化与果实成熟软化第17-19页
        1.1.3 细胞壁组分变化与果实成熟软化第19-21页
    1.2 细胞壁降解酶与果实成熟软化第21-27页
        1.2.1 多聚半乳糖醛酸酶(PG)第22-24页
        1.2.2 果胶甲酯酶(PME)第24页
        1.2.3 果胶裂解酶(PEL)第24-25页
        1.2.4 β-半乳糖苷酶(β-Gal)第25-26页
        1.2.5 α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Arabinoftiranosidase,α-L-Af)第26页
        1.2.6 木葡聚糖内糖基转移酶(XET)第26页
        1.2.7 鼠李糖半乳糖醛酸酶(RG)第26-27页
    1.3 草莓果实成熟软化相关基因研究进展第27-29页
        1.3.1 多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因第27页
        1.3.2 果胶甲酯酶(PME)基因第27页
        1.3.3 果胶裂解酶(PL)基因第27-28页
        1.3.4 内切葡聚糖酶(endo-1,4-β-D-glucanase,EG)基因第28页
        1.3.5 β-半乳糖苷酶(β-Gal)基因第28页
        1.3.6 β-木糖苷酶(β-xylosidase)基因第28-29页
    1.4 目的意义和研究内容第29-31页
        1.4.1 目的意义第29页
        1.4.2 主要研究内容第29-31页
第二章 草莓果实不同发育阶段抑制差减文库的构建及差异基因的表达分析第31-45页
    2.1 材料与方法第31-33页
        2.1.1 材料第31页
        2.1.2 果实总 RNA 的提取第31-32页
        2.1.3 抑制差减杂交及 cDNA 文库的构建第32页
        2.1.4 PCR 鉴定及序列分析第32页
        2.1.5 荧光定量 PCR 分析差异基因的表达第32-33页
    2.2 结果与分析第33-43页
        2.2.1 总 RNA 提取和 mRNA 分离纯化第33-34页
        2.2.2 酶切连接及抑制性 PCR第34页
        2.2.3 SSH 文库的 PCR 鉴定第34-35页
        2.2.4 EST 序列分析第35-39页
        2.2.5 功能分类第39-41页
        2.2.6 差异基因的表达分析第41-43页
    2.3 讨论第43-45页
第三章 草莓果实多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性变化、基因克隆及基因表达和进化分析第45-62页
    3.1 材料与方法第46-49页
        3.1.1 材料第46-47页
        3.1.2 果实硬度测定第47页
        3.1.3 酶活性测定第47-48页
        3.1.4 基因克隆第48页
        3.1.5 荧光定量 PCR 分析 PG 基因表达第48页
        3.1.6 PG 基因系统进化树构建第48-49页
    3.2 结果与分析第49-60页
        3.2.1 草莓果实发育成熟过程中果实硬度的变化第49页
        3.2.2 草莓果实发育成熟软化过程中 PG 酶活性变化第49-50页
        3.2.3 草莓果实发育成熟过程中 PG 酶基因表达第50-51页
        3.2.4 PG 基因克隆及序列分析第51-57页
        3.2.5 果实 PG 基因的分子进化第57-60页
    3.3 讨论第60-62页
第四章 草莓果实果胶裂解酶(PL)活性测定、基因克隆及基因表达和基因进化分析第62-75页
    4.1 材料与方法第63-65页
        4.1.1 材料第63页
        4.1.2 PL 酶活性测定第63-64页
        4.1.3 草莓果实发育成熟软化过程 PL 酶活性变化第64页
        4.1.4 基因克隆第64页
        4.1.5 荧光定量 PCR 分析 PL 基因表达第64-65页
        4.1.6 草莓果实 PL 基因的进化分析第65页
    4.2 结果与分析第65-73页
        4.2.1 不同研磨提取液对果实 PL 酶活性测定的影响第65-66页
        4.2.2 Ca~(2+)对 PL 活性测定的影响第66-67页
        4.2.3 草莓果实成熟软化过程中 PL 酶活性变化第67页
        4.2.4 草莓果实发育成熟过程 PL 基因表达变化第67-68页
        4.2.5 草莓果实 PL 基因的克隆与序列分析第68-69页
        4.2.6 PL 基因定位第69-72页
        4.2.7 草莓果实 PL 基因的进化分析第72-73页
    4.3 讨论第73-75页
第五章 草莓果实果胶甲酯酶(PME)活性变化与基因表达第75-79页
    5.1 材料与方法第75-76页
        5.1.1 材料第75页
        5.1.2 PME 酶活性测定第75-76页
        5.1.3 荧光定量 PCR 分析 PME 基因表达第76页
    5.2 结果与分析第76-77页
        5.2.1 草莓果实成熟软化过程中 PME 酶活性变化第76-77页
        5.2.2 草莓果实发育成熟过程 PME 基因表达变化第77页
    5.3 讨论第77-79页
第六章 草莓果实β-半乳糖苷酶基因克隆与表达分析第79-88页
    6.1 材料与方法第80-81页
        6.1.1 材料第80页
        6.1.2 基因克隆第80-81页
        6.1.5 荧光定量 PCR 分析β-gal 基因表达第81页
    6.2 结果与分析第81-86页
        6.2.1 β-gal 基因全长 cDNA 克隆及序列分析第81-85页
        6.2.2 β-gal 基因定位第85页
        6.2.3 β-gal 基因表达第85-86页
    6.3 讨论第86-88页
第七章 草莓果实纤维素酶活性变化、EG 基因克隆及基因表达分析第88-96页
    7.1 材料与方法第89-90页
        7.1.1 材料第89页
        7.1.2 纤维素酶提取及活性测定第89页
        7.1.3 EG 基因克隆第89-90页
        7.1.4 荧光定量 PCR 分析 EG 基因表达第90页
    7.2 结果与分析第90-93页
        7.2.1 草莓果实成熟软化过程中纤维素酶活性变化第90-91页
        7.2.2 草莓果实发育成熟过程 EG 基因表达变化第91-92页
        7.2.3 EG 基因 cDNA 5'、3'端序列获得第92-93页
    7.3 讨论第93-96页
第八章 森林草莓全基因组 MADS-box 转录因子基因的鉴定及果实 FaMADS1 基因siRNA 表达载体构建第96-108页
    8.1 材料与方法第97-98页
        8.1.1 基因数据第97页
        8.1.2 方法第97-98页
    8.2 结果与分析第98-106页
        8.2.1 森林草莓 MADS-box 基因的序列特征、基因结构与染色体定位第98-102页
        8.2.2 森林草莓 MADS-box 蛋白的基序分布及序列特征分析第102-104页
        8.2.3 FaMADS1 基因序列分析第104页
        8.2.4 FaMADS1 基因 siRNA 载体构建第104-106页
    8.3 讨论第106-108页
        8.3.1 森林草莓全基因组 FvMADSs 基因分析第106-107页
        8.3.2 草莓果实 FaMADS1 基因分析第107-108页
第九章 草莓遗传转化体系的建立及桃、李砧木离体叶片再生技术研究第108-130页
    9.1 草莓遗传转化体系的建立第109-114页
        9.1.1 材料与方法第109-110页
        9.1.2 结果与分析第110-113页
        9.1.3 讨论第113-114页
    9.2 桃砧木品种‘Nemaguard’离体叶片再生技术研究第114-123页
        9.2.1 材料与方法第115-116页
        9.2.2 结果与分析第116-122页
        9.2.3 讨论第122-123页
    9.3 李砧木品种‘Marianna’离体叶片再生技术研究第123-130页
        9.3.1 材料和方法第123-124页
        9.3.2 结果与分析第124-128页
        9.3.3 讨论第128-130页
第十章 结论第130-131页
参考文献第131-146页
致谢第146-147页
作者简介第147页

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