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基于多组学的凝结芽胞杆菌优良工业发酵特性的分子机制研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
目录第10-13页
第一章 绪论第13-44页
    1.1 凝结芽胞杆菌第13-16页
    1.2 细菌的耐热机制第16-21页
        1.2.1 DNA 稳定性第17-18页
        1.2.2 热激蛋白第18-20页
        1.2.3 细胞膜结构第20-21页
    1.3 下一代测序技术第21-30页
        1.3.1 合成测序法第21-25页
        1.3.2 第二代测序技术的应用第25-30页
    1.4 进化动力学分析研究第30-34页
        1.4.1 最大近似法第31页
        1.4.2 最大似然法第31-32页
        1.4.3 检测物种特异性达尔文选择第32-33页
        1.4.4 检测达尔文选择作用的氨基酸位点第33-34页
    1.5 质谱与蛋白质组技术第34-42页
        1.5.1 离子化技术第35-36页
        1.5.2 质谱设备第36-38页
        1.5.3 分离技术第38-39页
        1.5.4 蛋白质组分析方法第39-41页
        1.5.5 微生物蛋白质组技术的应用第41-42页
    1.6 本课题研究的目的和意义第42-44页
第二章 凝结芽孢杆菌基因组测序及拼装第44-60页
    2.1 引言第44-47页
    2.2 材料与方法第47-53页
        2.2.1 主要药品与试剂第47-48页
        2.2.2 主要仪器设备第48页
        2.2.3 培养基与菌株第48-49页
        2.2.4 细菌培养及 DNA 提取第49-50页
        2.2.5 Illumina 建库与测序第50页
        2.2.6 数据整合第50-51页
        2.2.7 测序数据拼接第51-52页
        2.2.8 基因组完成图第52-53页
    2.3 结果与讨论第53-58页
        2.3.1 16S rDNA 预检测第53-54页
        2.3.2 高通量测序结果概述第54-56页
        2.3.3 不同拼接拼接方法的整合第56-57页
        2.3.4 构建基因组完整图第57-58页
    2.4 本章小结第58-59页
    发表相关文章第59-60页
第三章 凝结芽孢杆菌比较基因组分析第60-76页
    3.1 引言第60页
    3.2 结果与讨论第60-75页
        3.2.1 基因组结构概述第60-62页
        3.2.2 进化地位第62-64页
        3.2.3 最小基因组第64-66页
        3.2.4 碳代谢第66-68页
        3.2.5 木糖代谢途径第68-71页
        3.2.6 物质运输和调控第71-72页
        3.2.7 抗逆性第72-74页
        3.2.8 凝结芽孢杆菌的免疫系统第74-75页
    3.3 本章小结第75页
    发表相关文章第75-76页
第四章 凝结芽胞杆菌正向选择压力分析第76-88页
    4.1 引言第76-77页
    4.2 材料与方法第77-82页
        4.2.1 建立直系同源基因簇第77-78页
        4.2.2 多序列比对第78页
        4.2.3 去除基因重组的影响第78-79页
        4.2.4 建立系统进化树并确定正选择压力蛋白第79-80页
        4.2.5 确认正选择蛋白富集的代谢途径第80-81页
        4.2.6 结果展示第81-82页
    4.3 结果与讨论第82-87页
        4.3.1 蜡状芽孢杆菌中正向选择压力分析第82-84页
        4.3.2 基于 Branch-Site 模式的芽孢杆菌压力分析第84-87页
    4.4 本章小结第87页
    发表相关文章第87-88页
第五章 凝结芽孢杆菌 2-6 转录组分析第88-130页
    5.1 引言第88-89页
    5.2 材料与方法第89-102页
        5.2.1 主要药品与试剂第89页
        5.2.2 主要仪器设备第89-90页
        5.2.3 培养基第90页
        5.2.4 测定生长曲线第90页
        5.2.5 提取 RNA第90-92页
        5.5.6 建库第92-93页
        5.2.7 数据处理第93-102页
        5.2.8 RT-qPCR 验证表达差异第102页
    5.3 结果与讨论第102-128页
        5.3.1 凝结芽胞杆菌生长实验第102-103页
        5.3.2 rRNA 富集实验第103-104页
        5.3.3 转录测序数据统计第104-108页
        5.3.4 转录结构分析第108-116页
        5.3.5 表达差异分析第116-124页
        5.3.6 差异基因富集分析第124-127页
        5.3.7 共表达分析第127-128页
    5.4 本章小结第128-130页
第六章 凝结芽孢杆菌 2-6 蛋白质组分析第130-139页
    6.1 引言第130页
    6.2 材料与方法第130-133页
        6.2.1 凝结芽胞杆菌 2-6 培养第130页
        6.2.2 LC-MS/MS 原理第130-131页
        6.2.3 仪器和试剂第131-132页
        6.2.4 试验流程第132-133页
    6.3 结果与讨论第133-138页
        6.3.1 蛋白质浓度测定第133-134页
        6.3.2 SDS-PAGE 分析第134页
        6.3.3 肽段 OD280测定第134-135页
        6.3.4 蛋白质鉴定及定量结果第135页
        6.3.5 蛋白质组学统计分析第135-136页
        6.3.6 转录组与蛋白质组数据比较分析第136-137页
        6.3.7 特异性蛋白分析第137-138页
    6.4 本章小结第138-139页
总结与展望第139-142页
创新点第142-143页
参考文献第143-154页
附录 I 符号中英文注释第154-156页
附录 II 正向选择压力分析的芽孢杆菌菌株第156-158页
附录 III 凝结芽胞杆菌转录组中表达上调基因第158-163页
附录 IV 凝结芽胞杆菌转录组中表达下调基因第163-166页
附录 V 转录组和蛋白质组数据中共有的差异基因第166-168页
致谢第168-169页
攻读博士学位期间(待)发表的学术论文及奖励第169-170页

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