摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略词表 | 第9-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章:文献综述 单核细胞增生李斯特菌研究进展 | 第13-26页 |
1 单核细胞增多症李斯特菌概况 | 第13-15页 |
2 李斯特菌病 | 第15-16页 |
2.1 脑炎 | 第15-16页 |
2.2 流产 | 第16页 |
2.3 败血症 | 第16页 |
3 单核细胞增多症李斯特菌毒力岛和毒力因子 | 第16-20页 |
3.1 毒力岛 1( LIPI-1) | 第17页 |
3.2 毒力岛 2(LIPI-2) | 第17页 |
3.3 李斯特菌溶血素O | 第17-18页 |
3.4 肌动蛋白聚集因子(Act A) | 第18-19页 |
3.5 转录活化因子(PrfA) | 第19-20页 |
3.6 磷脂酶C(PLC) | 第20页 |
4 内化素 | 第20-23页 |
4.1 内化素A(InlA) | 第21页 |
4.2 内化素B(InlB) | 第21-22页 |
4.3 内化素C(InlC) | 第22-23页 |
4.4 其他内化素 | 第23页 |
5 单核细胞增多症李斯特菌致病机理 | 第23-26页 |
5.1 细胞感染过程 | 第24-25页 |
5.2 体内感染过程 | 第25-26页 |
第二章:实验内容 | 第26-55页 |
试验一LM InlC基因缺失株的构建及分子鉴定 | 第26-40页 |
摘要 | 第26-27页 |
1 材料 | 第27-29页 |
1.1 菌株和质粒 | 第27页 |
1.2 引物 | 第27页 |
1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
1.4 仪器 | 第28页 |
1.5 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-34页 |
2.1 LM90SB2基因组的提取 | 第29-30页 |
2.2 基因重叠PCR(SOE-PCR) | 第30-31页 |
2.3 Inl C基因缺失片段的克隆和测序 | 第31页 |
2.4 重组穿梭质粒pKSV7-△InlC的构建 | 第31-33页 |
2.5 电转用感受态细胞的制备(青霉素G法) | 第33页 |
2.6 电转化和同源重组 | 第33-34页 |
2.7 同源重组株遗传稳定性检测 | 第34页 |
3.结果 | 第34-38页 |
3.1 上游同源臂和下游同源臂的扩增结果 | 第34-36页 |
3.2 基因重叠PCR扩增结果和测序鉴定结果 | 第36页 |
3.3 重组穿梭质粒p KSV7-△RsbV鉴定结果 | 第36-37页 |
3.4 不同时期菌的PCR鉴定 | 第37页 |
3.5 重组InlC基因缺失株稳定遗传性的鉴定 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
试验二LM90SB2-△InlC对单核细胞增多症李斯特菌毒力的影响 | 第40-50页 |
摘要 | 第40-41页 |
1 材料 | 第41-42页 |
1.1 菌株以及实验动物 | 第41页 |
1.2 主要试剂 | 第41页 |
1.3 主要仪器 | 第41页 |
1.4 主要试剂的配置 | 第41-42页 |
2 方法 | 第42-45页 |
2.1 LD50的测定 | 第42-43页 |
2.2 小鼠肝、脾、脑载菌量的测定 | 第43页 |
2.3 溶血实验 | 第43页 |
2.4 鼠脑微血管内皮细胞(MBMEC)侵染实验 | 第43-45页 |
3 结果 | 第45-48页 |
3.1 小鼠LD50的测定结果 | 第45页 |
3.2 肝、脾、脑载菌量试验结果 | 第45-46页 |
3.3 溶血试验 | 第46页 |
3.4 MBMEC的侵染试验 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
试验三LM90SB2-△InlC对单核细胞增多症李斯特菌环境耐受性的影响 | 第50-55页 |
摘要 | 第50-51页 |
1 材料 | 第51页 |
1.1 菌株以及实验动物 | 第51页 |
1.2 主要试剂 | 第51页 |
1.3 主要仪器 | 第51页 |
2 方法 | 第51-52页 |
2.1 不同酸碱环境条件下的生长试验 | 第51页 |
2.2 不同温度条件下生长实验 | 第51-52页 |
3 结果 | 第52-54页 |
3.1 不同酸碱环境条件下的生长实验 | 第52-53页 |
3.2 不同温度条件下生长试验 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-55页 |
全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
附件 | 第65-67页 |
1.测序结果 | 第65-66页 |
2.作者简介 | 第66页 |
3.发表论文 | 第66-67页 |
导师评阅表 | 第67页 |