| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第16-29页 |
| 1.1 查尔酮合成酶(CHS)研究进展 | 第16-18页 |
| 1.1.1 查尔酮合成酶基因的结构 | 第16页 |
| 1.1.2 查尔酮合成酶蛋白结构及作用底物 | 第16-17页 |
| 1.1.3 查尔酮合成酶基因家族 | 第17页 |
| 1.1.4 查尔酮合成酶基因差异表达及调控 | 第17-18页 |
| 1.1.5 查尔酮合成酶基因的转基因应用 | 第18页 |
| 1.1.6 黄酮类化合物与查尔酮合成酶的关系 | 第18页 |
| 1.2 蕨类植物中查尔酮合成酶的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 香鳞毛蕨研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3.1 香鳞毛蕨植物学特征 | 第19页 |
| 1.3.2 香鳞毛蕨的化学成分分析 | 第19-20页 |
| 1.3.3 香鳞毛蕨药用价值 | 第20-21页 |
| 1.3.4 香鳞毛蕨生境特点 | 第21-22页 |
| 1.3.5 香鳞毛蕨分子生物学研究进展 | 第22页 |
| 1.4 植物基因工程研究的方法 | 第22-27页 |
| 1.4.1 基因的克隆与分离 | 第22-24页 |
| 1.4.2 荧光定量技术的研究概况 | 第24-27页 |
| 1.5 本研究目的、意义及技术路线 | 第27-29页 |
| 1.5.1 研究目的、意义 | 第27-28页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-48页 |
| 2.1 试验材料 | 第29页 |
| 2.2 香鳞毛蕨CHS基因家族的克隆 | 第29-41页 |
| 2.2.1 植物材料、菌种及质粒 | 第29页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第29页 |
| 2.2.3 主要药品及试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.4 缓冲液、主要试剂及培养基的配置 | 第30页 |
| 2.2.5 香鳞毛蕨总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.6 RNA纯度及浓度检测 | 第31页 |
| 2.2.7 香鳞毛蕨CHS基因家族中间片段的克隆 | 第31-35页 |
| 2.2.8 香鳞毛蕨CHS基因家族cDNA 3’端片段的分离(3'-RACE) | 第35-37页 |
| 2.2.9 香鳞毛蕨CHS基因家族cDNA 5’端片段的分离(5'-RACE) | 第37-39页 |
| 2.2.10 香鳞毛蕨CHS基因家族全长cDNA序列的分离 | 第39-41页 |
| 2.3 香鳞毛蕨CHS基因家族的生物信息学分析 | 第41-42页 |
| 2.4 香鳞毛蕨CHS基因家族的特异性表达 | 第42-44页 |
| 2.4.1 不同处理条件的香鳞毛蕨孢子体幼苗 | 第42页 |
| 2.4.2 不同处理条件的香鳞毛蕨孢子体幼苗RNA的提取 | 第42页 |
| 2.4.3 cDNA第一链的合成 | 第42页 |
| 2.4.4 香鳞毛蕨CHS基因家族实时荧光定量PCR分析 | 第42-44页 |
| 2.5 香鳞毛蕨总黄酮含量的测定 | 第44-48页 |
| 2.5.1 实验材料 | 第44页 |
| 2.5.2 主要仪器 | 第44-45页 |
| 2.5.3 试验试剂 | 第45页 |
| 2.5.4 香鳞毛蕨黄酮类化合物的测定 | 第45-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-83页 |
| 3.1 香鳞毛蕨查尔酮合成酶CHS基因家族的克隆 | 第48-61页 |
| 3.1.1 香鳞毛蕨总RNA的提取 | 第48页 |
| 3.1.2 查尔酮合成酶基因中间片段的扩增 | 第48-51页 |
| 3.1.3 香鳞毛蕨DfCHS1基因全长克隆 | 第51-55页 |
| 3.1.4 香鳞毛蕨DfCHS2基因全长克隆 | 第55-58页 |
| 3.1.5 香鳞毛蕨DfCHS3基因全长克隆 | 第58-61页 |
| 3.2 香鳞毛蕨查尔酮合成酶CHS基因家族的生物信息学分析 | 第61-77页 |
| 3.2.1 香鳞毛蕨CHS基因家族cDNA序列同源性分析 | 第61-64页 |
| 3.2.2 香鳞毛蕨CHS基因家族蛋白质性质与结构分析 | 第64-77页 |
| 3.3 香鳞毛蕨查尔酮合成酶CHS基因家族的特异性表达 | 第77-80页 |
| 3.3.1 香鳞毛蕨基因家族的组织特异性表达 | 第77-78页 |
| 3.3.2 香鳞毛蕨基因家族在温光诱导条件下的特异性表达 | 第78-80页 |
| 3.3.3 香鳞毛蕨基因家族在紫外条件处理下的特异性表达 | 第80页 |
| 3.4 香鳞毛蕨总黄酮含量的测定 | 第80-83页 |
| 3.4.1 香鳞毛蕨不同部位的总黄酮含量 | 第80-81页 |
| 3.4.2 香鳞毛蕨温光诱导条件下的总黄酮含量 | 第81-82页 |
| 3.4.3 香鳞毛蕨紫外条件处理下的总黄酮含量 | 第82-83页 |
| 4 讨论 | 第83-88页 |
| 4.1 香鳞毛蕨CHS基因家族成员的分析 | 第83-84页 |
| 4.2 香鳞毛蕨CHS基因家族进化关系的分析 | 第84页 |
| 4.3 香鳞毛蕨CHS基因家族在不同条件下的特异性表达分析 | 第84-86页 |
| 4.3.1 香鳞毛蕨CHS基因家族在不同部位的特异性表达分析 | 第84-85页 |
| 4.3.2 香鳞毛蕨CHS基因家族在低温4℃处理条件下的特异性表达分析 | 第85页 |
| 4.3.3 香鳞毛蕨CHS基因家族在高温35℃处理条件下特异性表达分析 | 第85-86页 |
| 4.3.4 香鳞毛蕨CHS基因家族在紫外UV处理条件下的特异性表达分析 | 第86页 |
| 4.4 香鳞毛蕨CHS基因家族与黄酮合成的相关分析 | 第86-88页 |
| 5 结论 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-99页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第99页 |
