| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 纳米抗体简介及大肠杆菌中外源蛋白可溶性表达的研究 | 第11-21页 |
| 1.1 纳米抗体简介 | 第11-15页 |
| 1.1.1 纳米抗体结构特点 | 第11-13页 |
| 1.1.2 纳米抗体的功能特性 | 第13页 |
| 1.1.3 纳米抗体的应用 | 第13-15页 |
| 1.2 大肠杆菌原核表达系统的研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2.1 大肠杆菌表达系统表达外源基因的优缺点 | 第15-16页 |
| 1.2.2 提高大肠杆菌表达系统表达外源蛋白可溶性的方法 | 第16-17页 |
| 1.3 融合标签技术 | 第17-21页 |
| 1.3.1 融合标签的种类 | 第17-20页 |
| 1.3.2 融合标签的作用 | 第20-21页 |
| 第二章 三种重组抗猪圆环病毒 II 型（PCV2）Cap 蛋白纳米抗体表达载体的构建及融合纳米抗体诱导表达的比较 | 第21-36页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 PCV2 Cap 蛋白、纳米抗体、菌株、载体 | 第21-22页 |
| 2.1.2 酶、纯化树脂、抗体 | 第22页 |
| 2.1.3 主要药品及试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 三种纳米抗体表达载体的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.2 重组纳米抗体的诱导表达 | 第24-25页 |
| 2.2.3 重组纳米抗体的大量诱导表达 | 第25-26页 |
| 2.2.4 三种融合标签纳米抗体的纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.5 三种融合标签纳米抗体蛋白量的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.6 间接 ELISA 检测三种融合标签纳米抗体抗原结合活性 | 第28-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-34页 |
| 2.3.1 三种重组纳米抗体表达载体诱导表达分析 | 第29-30页 |
| 2.3.2 三种表达载体表达的融合标签纳米抗体的蛋白表达量 | 第30-32页 |
| 2.3.3 间接 ELISA 检测融合纳米抗体抗原结合活性 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 SUMO 标签的移除对纳米抗体的影响 | 第36-43页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 Cap 蛋白、纳米抗体、SUMO 蛋白酶 1 | 第36页 |
| 3.1.2 血清及抗体 | 第36页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第36-37页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第37页 |
| 3.2 方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 天然纳米抗体的酶切获得 | 第37-38页 |
| 3.2.2 双抗体夹心 ELISA 进行活性检测 | 第38-39页 |
| 3.3 结果 | 第39-40页 |
| 3.3.1 天然纳米抗体的获得 | 第39页 |
| 3.3.2 双抗体夹心 ELISA 检测抗体活性 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 3.5 小结 | 第41-43页 |
| 第四章 抗猪圆环病毒 II 型 Cap 蛋白纳米抗体耐热性的研究 | 第43-50页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 纳米抗体、血清抗体、抗原 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 溶液配制 | 第43-44页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第44页 |
| 4.2 方法 | 第44-45页 |
| 4.2.1 pE-SUMO 表达载体表达筛选获得的全部纳米抗体 | 第44页 |
| 4.2.2 纳米抗体室温放置 | 第44-45页 |
| 4.2.3 不同温度孵育处理 | 第45页 |
| 4.3 结果 | 第45-48页 |
| 4.3.1 抗猪圆环病毒 II 型 Cap 蛋白纳米抗体耐热性 | 第45-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-49页 |
| 4.5 小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
