| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 脂肪酶简介 | 第10-11页 |
| 1.2 脂肪酶结构 | 第11-12页 |
| 1.3 催化机制 | 第12-14页 |
| 1.4 结构功能关系 | 第14页 |
| 1.5 脂肪酶应用 | 第14-17页 |
| 1.5.1 脂肪酶在油脂工业中的应用 | 第15页 |
| 1.5.2 可生物降解聚合物的生产 | 第15页 |
| 1.5.3 脂肪酶在纺织行业的应用 | 第15-16页 |
| 1.5.4 脂肪酶在清洁剂行业的应用 | 第16页 |
| 1.5.5 脂肪酶在食品加工、产生香味和提高质量方面的应用 | 第16页 |
| 1.5.6 拆分外消旋化合物 | 第16-17页 |
| 1.6 立题背景及研究意义 | 第17-20页 |
| 1.7 本论文研究内容 | 第20-22页 |
| 1.7.1 研究内容 | 第20-21页 |
| 1.7.2 研究流程及技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 SMG1 脂肪酶及其突变体的克隆表达与纯化 | 第22-39页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 试验材料和仪器 | 第22-25页 |
| 2.2.1 菌株与载体 | 第22页 |
| 2.2.2 试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2.4 培养基及溶液配置 | 第23-25页 |
| 2.3 试验方法 | 第25-34页 |
| 2.3.1 选取突变位点 | 第25-27页 |
| 2.3.2 设计引物序列 | 第27页 |
| 2.3.3 定点突变 | 第27-32页 |
| 2.3.4 SMG1 野生型及其突变体的表达与纯化 | 第32-34页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第34-37页 |
| 2.4.1 突变体引物设计 | 第34-35页 |
| 2.4.2 定点突变 | 第35-36页 |
| 2.4.3 SMG1 野生型及突变体发酵液测酶活 | 第36页 |
| 2.4.4 SMG1 野生型及其突变体的表达纯化 | 第36-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 SMG1 野生型及其突变体酶学性质测定及其分析 | 第39-59页 |
| 3.1 引言 | 第39-40页 |
| 3.2 试验材料 | 第40页 |
| 3.3 试剂溶液 | 第40页 |
| 3.4 试验方法 | 第40-43页 |
| 3.4.1 对硝基苯酚法测定酶活 | 第40-41页 |
| 3.4.2 对硝基苯酚标准曲线测定 | 第41-42页 |
| 3.4.3 最适温度 | 第42页 |
| 3.4.4 最适 pH | 第42页 |
| 3.4.5 温度耐受性 | 第42-43页 |
| 3.4.6 PH 耐受性 | 第43页 |
| 3.4.7 底物选择性 | 第43页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第43-58页 |
| 3.5.1 对硝基苯酚标准曲线测定 | 第43-47页 |
| 3.5.2 SMG1 脂肪酶及其突变体温度曲线 | 第47-49页 |
| 3.5.3 SMG1 脂肪酶及其突变体 pH 曲线 | 第49-51页 |
| 3.5.4 温度耐受性 | 第51-53页 |
| 3.5.5 SMG1 及其突变体 pH 耐受性 | 第53-54页 |
| 3.5.6 SMG1 脂肪酶及其突变体底物选择性 | 第54-57页 |
| 3.5.7 SMG1 及其突变体比酶活力及其基本性质总结如下： | 第57-58页 |
| 3.6 本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 SMG1 及其突变体酶学性质的生物信息学分析 | 第59-73页 |
| 4.1 引言 | 第59页 |
| 4.2 实验硬件级软件 | 第59页 |
| 4.3 SMG1 底物特异性 | 第59-62页 |
| 4.4 SMG1 及其突变体的温度耐受性和比酶活的生物信息学分析 | 第62-68页 |
| 4.4.1 W116 位点突变比酶活及热稳定性分析 | 第63-65页 |
| 4.4.2 W229 位点突变比酶活及热稳定性分析 | 第65-67页 |
| 4.4.3 N277 位点突变比酶活及热稳定性分析 | 第67-68页 |
| 4.5 SMG1 及其突变体底物选择性的生物信息学分析 | 第68-71页 |
| 4.6 本章小结 | 第71-73页 |
| 结论与展望 | 第73-76页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 创新点 | 第74-75页 |
| 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-85页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附件 | 第87页 |
