| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 合子基因激活研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 合子基因激活 | 第12-13页 |
| 1.1.2 牛合子基因激活的时间 | 第13页 |
| 1.1.3 雌原核和雄原核中转录的差异 | 第13-14页 |
| 1.2 体细胞核移植研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.1 克隆胚胎和克隆动物的异常 | 第14-15页 |
| 1.2.2 早期克隆胚胎与 DNA 甲基化 | 第15-16页 |
| 1.2.3 早期克隆胚胎与组蛋白修饰 | 第16-17页 |
| 1.2.4 克隆动物与基因印记 | 第17页 |
| 1.2.5 克隆动物与 X 染色体失活 | 第17-18页 |
| 1.2.6 克隆动物与染色体异常 | 第18页 |
| 1.2.7 克隆动物与端粒 | 第18-19页 |
| 1.3 Zscan4 基因研究进展 | 第19-25页 |
| 1.3.1 Zscan4 基因的分子结构 | 第19-20页 |
| 1.3.2 Zscan4 基因的表达 | 第20页 |
| 1.3.3 Zscan4 基因维护 ES 细胞基因组稳定性 | 第20-21页 |
| 1.3.4 Zscan4 基因与诱导干细胞 | 第21-22页 |
| 1.3.5 Zscan4 基因维护 ES 细胞多能性 | 第22-23页 |
| 1.3.6 Zscan4 基因与 2C-like ES 细胞状态 | 第23页 |
| 1.3.7 Zscan4 基因的调节网络 | 第23-25页 |
| 实验研究 | 第25-54页 |
| 第二章 Zscan4 同源基因在牛组织中的表达 | 第25-31页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 RNA 提取 | 第26页 |
| 2.2.2 RNA 的 DNase I 处理及反转录 | 第26-27页 |
| 2.2.3 Zscan4 同源基因 PCR 检测 | 第27页 |
| 2.3 结果 | 第27-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 Zscan4-like 基因在 IVF 和 SCNT 早期胚胎中的动态表达 | 第31-43页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 牛胎儿成纤维细胞原代培养 | 第32页 |
| 3.2.2 细胞的传代培养，纯化，冻存与解冻 | 第32-33页 |
| 3.2.3 卵母细胞的采集和体外成熟 | 第33页 |
| 3.2.4 体细胞核移植 | 第33-34页 |
| 3.2.5 体外受精 | 第34页 |
| 3.2.6 卵母细胞和早期胚胎 cDNA 合成 | 第34-35页 |
| 3.2.7 成熟卵母细胞和早期胚胎收集 | 第35页 |
| 3.2.8 Zscan4-like 基因 PCR 检测 | 第35页 |
| 3.2.9 Zscan4-like 基因实时荧光定量 PCR 检测 | 第35-36页 |
| 3.3 结果 | 第36-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 Zscan4-like 基因表达载体构建和 siRNA 的筛选 | 第43-54页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-49页 |
| 4.2.1 Zscan4-like 基因 CDS 的克隆 | 第44-45页 |
| 4.2.2 Zscan4-like 表达载体构建 | 第45-46页 |
| 4.2.3 Zscan4-like 表达载体转染细胞 | 第46-47页 |
| 4.2.4 Western blot 检测 | 第47-48页 |
| 4.2.5 Zscan4-like 基因 siRNA 设计 | 第48页 |
| 4.2.6 Zscan4-like 基因 siRNA 筛选 | 第48-49页 |
| 4.3 结果 | 第49-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4.5 小结 | 第53-54页 |
| 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
