| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 ACC 氧化酶的研究进展 | 第10页 |
| 1.2 植物转录因子的国内外研究现状 | 第10-15页 |
| 1.2.1 植物转录因子的结构 | 第10-11页 |
| 1.2.2 植物转录因子的分类及功能 | 第11-13页 |
| 1.2.2.1 HD-Zip 转录因子家族功能研究 | 第12-13页 |
| 1.2.3 研究转录因子的方法 | 第13-15页 |
| 1.2.3.1 植物转录因子基因分离的方法 | 第13页 |
| 1.2.3.2 植物转录因子功能表达的分析方法 | 第13-15页 |
| 1.3 植物启动子的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 启动子的结构 | 第16页 |
| 1.3.2 启动子的分类 | 第16-17页 |
| 1.3.2.1 组成型启动子 | 第16页 |
| 1.3.2.2 组织特异启动子 | 第16-17页 |
| 1.4 农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4.1 农杆菌介导的瞬时表达系统 | 第17-18页 |
| 1.4.2 转化外源基因的稳定表达 | 第18-19页 |
| 1.5 研究目的意义 | 第19-20页 |
| 1.6 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-29页 |
| 2.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 果实特异启动子 2A11 的克隆 | 第21-23页 |
| 2.2.1.1 番茄幼苗的培养和基因组 DNA 的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.1.2 引物设计 | 第22页 |
| 2.2.1.3 PCR 扩增及产物纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.1.4 目的片段与克隆载体的链接 | 第23页 |
| 2.2.1.5 连接产物转化至大肠杆菌 DH5α | 第23页 |
| 2.2.1.6 阳性克隆的筛选鉴定及测序 | 第23页 |
| 2.2.2 植物特异表达载体 pBI121-2A11 的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.3 番茄农杆菌瞬时表达系统建立及活性检测 | 第25页 |
| 2.2.4 番茄 LeHB-1 基因的克隆 | 第25-28页 |
| 2.2.4.1 番茄总 RNA 提取 | 第25-26页 |
| 2.2.4.2 引物设计 | 第26页 |
| 2.2.4.3 RT-PCR | 第26-27页 |
| 2.2.4.4 PCR 扩增及产物纯化 | 第27页 |
| 2.2.4.5 克隆载体连接、转化、鉴定 | 第27页 |
| 2.2.4.6 番茄特异正反义表达载体 pBI121-2A11-HB-1 的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第28-29页 |
| 2.2.5.1 无菌外植体的获得 | 第28页 |
| 2.2.5.2 农杆菌菌液的制备 | 第28页 |
| 2.2.5.3 愈伤组织的诱导和继代培养 | 第28页 |
| 2.2.5.4 抗性芽的生根 | 第28页 |
| 2.2.5.5 炼苗和移栽 | 第28页 |
| 2.2.5.6 转基因植株的初步检测 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-36页 |
| 3.1 番茄果实特异性启动子 2A11 的克隆 | 第29-30页 |
| 3.2 果实特异表达载体 PBI121-2A11 的构建和鉴定 | 第30-31页 |
| 3.3 LeHB-1 的克隆 | 第31-32页 |
| 3.4 pBI121-2A11-HB-1 特异表达载体的构建和双酶切鉴定 | 第32-33页 |
| 3.5 重组植物表达载体对农杆菌的转化及其鉴定 | 第33页 |
| 3.6 番茄的遗传转化 | 第33-34页 |
| 3.7 转基因番茄植株的 PCR 检测 | 第34-36页 |
| 第四章 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 pBI121-2A11-HB-1 果实特异表达载体的构建 | 第36页 |
| 4.2 农杆菌介导的遗传转化体系的建立 | 第36-38页 |
| 第五章 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 附录 | 第44-49页 |
| 缩略词 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简介 | 第51页 |
