| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-24页 |
| 2.1 材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.2 试剂 | 第14-16页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.3 方法 | 第17-23页 |
| 2.3.1 技术路线 | 第17页 |
| 2.3.2 DNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.3.3 DNA浓度与纯度测定-分光光度法 | 第18页 |
| 2.3.4 DNA浓度与纯度测定-琼脂糖凝胶电泳法 | 第18页 |
| 2.3.5 PCR扩增的引物设计 | 第18-19页 |
| 2.3.6 多重普通PCR | 第19-20页 |
| 2.3.7 P.v扩增片段的T-A克隆 | 第20-21页 |
| 2.3.8 质粒DNA的提取 | 第21页 |
| 2.3.9 多重巢式PCR | 第21-22页 |
| 2.3.10 SYBR Green实时PCR反应体系与反应条件的优化 | 第22页 |
| 2.3.11 标准品的制备与标准曲线的建立以及重复性评价 | 第22页 |
| 2.3.12 SYBR Green荧光定量PCR方法的特异性 | 第22-23页 |
| 2.3.13 临床标本的检测 | 第23页 |
| 2.4 结果分析 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-33页 |
| 3.1 DNA浓度与纯度 | 第24页 |
| 3.2 普通多重PCR体系的建立与检测结果 | 第24-26页 |
| 3.3 多重巢式PCR体系的建立与检测结果 | 第26-27页 |
| 3.4 SYBR GREEN实时PCR的检测结果 | 第27-30页 |
| 3.4.1 反应条件与反应体系的优化 | 第27-28页 |
| 3.4.2 标准曲线的建立 | 第28-30页 |
| 3.4.3 重复性评价 | 第30页 |
| 3.4.4 特异性检验 | 第30页 |
| 3.5 临床标本检测结果 | 第30-33页 |
| 4 讨论 | 第33-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 综述 | 第43-49页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
