| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩写词对照表 | 第15-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一部分 抗乙肝药物的体外筛选 | 第19-38页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第19-22页 |
| 1.1 实验药物 | 第19页 |
| 1.2 实验细胞 | 第19-20页 |
| 1.3 实验试剂和仪器 | 第20-21页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 1.4.1 DMEM培养基 | 第21页 |
| 1.4.2 PBS缓冲液 | 第21页 |
| 1.4.3 细胞消化液 | 第21-22页 |
| 1.4.4 MTT染色液 | 第22页 |
| 2 试验方法 | 第22-29页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.1.1 细胞复苏、培养及传代 | 第22页 |
| 2.1.2 HepG2.2.15细胞和HepGRL细胞的冻存 | 第22页 |
| 2.1.3 细胞的计数 | 第22-23页 |
| 2.2 MTT法测定十种化合物对HepG2.2.15细胞和HepGRL1的毒性 | 第23-24页 |
| 2.3 ELISA法检测细胞上清中的HBsAg和HBeAg抗原分泌 | 第24-26页 |
| 2.3.1 实验前的准备 | 第24页 |
| 2.3.2 HBsAg检测 | 第24-25页 |
| 2.3.3 HBeAg检测 | 第25-26页 |
| 2.4 化合物对于HepG2.2.15细胞和HepGRL1细胞上清HBVDNA分泌的影响 | 第26-29页 |
| 2.4.1 试剂的配制 | 第26-27页 |
| 2.4.1.1 样本处理 | 第26-27页 |
| 2.4.2 细胞胞内DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.4.3 加样及PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.5 数据分析 | 第29页 |
| 3 实验结果 | 第29-35页 |
| 3.1 10 种化合物对HepG2.2.15细胞和HepGRL1细胞的细胞毒性 | 第29-30页 |
| 3.2 几种化合物抑制细胞HBsAg和HBeAg表达及分泌的实验研究 | 第30-34页 |
| 3.3 几种化合物对HepG2.2.15细胞和HepGRL1细胞上清液和细胞内HBVDNA水平的抑制作用 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 5 小结 | 第37-38页 |
| 第二部分 几种化合物对HepG2.2.15和HepGRL1细胞X基因表达的影响 | 第38-49页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| 1.1 细胞株 | 第39页 |
| 1.2 实验试剂 | 第39页 |
| 1.3 实验仪器 | 第39页 |
| 1.4 RT-PCR中溶液的配置 | 第39-40页 |
| 1.4.1 75 %乙醇的配制 | 第39页 |
| 1.4.2 0.1 %DEPC溶液 | 第39-40页 |
| 1.4.3 5 ×TBE电泳缓冲液(1ml) | 第40页 |
| 1.4.4 1.5 %的琼脂糖 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-45页 |
| 2.1 试验材料的准备 | 第40页 |
| 2.2 细胞收集 | 第40-41页 |
| 2.3 细胞中总RNA的提取 | 第41页 |
| 2.4 RNA沉淀的清洗 | 第41-42页 |
| 2.5 RNA的溶解 | 第42页 |
| 2.6 RNA纯度检测 | 第42页 |
| 2.7 cDNA的合成 | 第42-44页 |
| 2.8 PCR反应体系 | 第44页 |
| 2.9 RT-PCR反应 | 第44-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-47页 |
| 3.1 化合物对HepG2.2.15细胞和HepGR1细胞HBV-X基因的表达的影响 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 5 小结 | 第48-49页 |
| 全文总结 | 第49-50页 |
| 创新点 | 第50-51页 |
| 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 综述 乙型肝炎的治疗的现状和进展 | 第54-72页 |
| 引言 | 第54-55页 |
| 1 乙型肝炎与乙型肝病毒的简介 | 第55-58页 |
| 1.1 HBV的形态 | 第55-56页 |
| 1.2 HBV的基因组及复制 | 第56-58页 |
| 1.3 HBX与肝细胞癌的发生发展 | 第58页 |
| 2 实验及其细胞模型 | 第58-60页 |
| 2.1 HepG2.2.15细胞 | 第58-59页 |
| 2.2 HepGRL1细胞 | 第59-60页 |
| 3 乙型肝炎的治疗现状及相关应用的药物 | 第60-63页 |
| 3.1 抗炎保肝治疗 | 第60-61页 |
| 3.2 干扰素 | 第61页 |
| 3.3 核苷类药物 | 第61-63页 |
| 3.4 免疫治疗 | 第63页 |
| 3.5 乙型肝炎的联合治疗 | 第63页 |
| 4 中医药抗HBV的研究进展 | 第63-64页 |
| 5 问题与展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 个人简历 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
