摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 细胞分裂素氧化酶 | 第11-12页 |
1.2 细胞分裂素氧化酶基因(CKX基因) | 第12-17页 |
1.2.1 CKX基因在不同植物中的研究进展 | 第12-13页 |
1.2.2 CKX基因在不同植物中的生理功能研究 | 第13-15页 |
1.2.3 CKX基因在不同植物中的亚细胞定位研究 | 第15页 |
1.2.4 CKX基因的表达特异性研究 | 第15-16页 |
1.2.5 CKX基因的表达调控研究 | 第16-17页 |
1.3 研究目的及意义 | 第17页 |
1.4 研究内容 | 第17-18页 |
1.5 研究技术路线 | 第18-19页 |
第二章 紫花苜蓿MsCKX基因的克隆及序列分析 | 第19-38页 |
2.1 试验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 菌株和试剂 | 第19页 |
2.1.3 培养基及相关抗生素的配制 | 第19-20页 |
2.2 MsCKX基因中间片段的克隆 | 第20-24页 |
2.2.1 引与合成物设计 | 第20页 |
2.2.2 紫花苜蓿RNA的提取 | 第20-21页 |
2.2.3 cDNA的合成 | 第21-22页 |
2.2.4 MsCKX基因中间片段的扩增 | 第22页 |
2.2.5 PCR产物的回收 | 第22-23页 |
2.2.6 目的片段的连接 | 第23页 |
2.2.7 重组质粒的转化及阳性克隆的筛选 | 第23-24页 |
2.3 RACE技术克隆MsCKX基因的全长 | 第24-28页 |
2.3.1 RACE引物设计 | 第24页 |
2.3.2 cDNA的第一链合成 | 第24-25页 |
2.3.3 RACEPCR | 第25-26页 |
2.3.4 In-Fusion克隆 | 第26-27页 |
2.3.5 MsCKX基因全长的获得及检测 | 第27-28页 |
2.3.6 MsCKX基因的生物信息学分析 | 第28页 |
2.4 结果与分析 | 第28-37页 |
2.4.1 紫花苜蓿RNA提取质量检测 | 第28页 |
2.4.2 MsCKX基因的全长克隆 | 第28-29页 |
2.4.3 MsCKX基因的生物信息学分析 | 第29-37页 |
2.5 小结 | 第37-38页 |
第三章 紫花苜蓿MsCKX基因的表达分析 | 第38-43页 |
3.1 试验材料 | 第38页 |
3.1.1 植物材料 | 第38页 |
3.1.2 试剂及仪器 | 第38页 |
3.2 试验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 胁迫处理及采样 | 第38-39页 |
3.2.2 qRT-PCR引物设计 | 第39页 |
3.2.3 实时荧光定量检测MsCKX基因 | 第39-40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-42页 |
3.4 小结 | 第42-43页 |
第四章 紫花苜蓿MsCKX基因过表达载体的构建 | 第43-48页 |
4.1 试验材料 | 第43页 |
4.2 试验方法 | 第43-46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-47页 |
4.4 小结 | 第47-48页 |
第五章 紫花苜蓿MsCKX基因的拟南芥转化及初步功能验证 | 第48-60页 |
5.1 试验材料 | 第48页 |
5.2 试验方法 | 第48-51页 |
5.3 结果与分析 | 第51-59页 |
5.4 小结 | 第59-60页 |
第六章 讨论及结论 | 第60-63页 |
6.1 讨论 | 第60-61页 |
6.2 结论 | 第61-62页 |
6.3 本研究创新点 | 第62页 |
6.4 展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
附录 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |