中文摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第一章 前言 | 第9-23页 |
1.1 引言 | 第9页 |
1.2 乳铁蛋白概述 | 第9-13页 |
1.2.1 乳铁蛋白的特点 | 第9-11页 |
1.2.2 乳铁蛋白的生理功能 | 第11-13页 |
1.3 乳铁蛋白受体 | 第13-19页 |
1.3.1 小肠乳铁蛋白受体的特点 | 第14-15页 |
1.3.1.1 小鼠肠粘膜乳铁蛋白受体(mouse SI-LfR, mSI-LfR) | 第14页 |
1.3.1.2 人小肠乳铁蛋白受体(human SI-LfR, hSI-LfR)的特点 | 第14-15页 |
1.3.1.3 其他哺乳动物小肠乳铁蛋白受体的特点 | 第15页 |
1.3.2 小肠乳铁蛋白细胞受体的生理功能 | 第15-17页 |
1.3.2.1 促进铁吸收 | 第15-16页 |
1.3.2.2 调节机体免疫应答 | 第16-17页 |
1.3.3 其他乳铁蛋白受体 | 第17-19页 |
1.3.3.1 淋巴细胞乳铁蛋白受体(LC-LfR) | 第17页 |
1.3.3.2 单核巨嗜细胞乳铁蛋白受体 (MC-Lf R) | 第17-19页 |
1.4 肠粘膜免疫系统 | 第19-20页 |
1.5 课题依据与意义 | 第20-23页 |
1.5.1 课题依据 | 第20-22页 |
1.5.1.1 乳铁蛋白特性 | 第20-21页 |
1.5.1.2 小鼠具有与bLf和hLf结合的受体 | 第21页 |
1.5.1.3 肠黏膜免疫的重要性 | 第21-22页 |
1.5.2 课题意义 | 第22-23页 |
第二章 小鼠小肠上皮细胞膜蛋白的分离纯化及其与牛乳铁蛋白的相互作用 | 第23-44页 |
2.1 材料和仪器 | 第23-24页 |
2.1.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.2 仪器 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 小鼠小肠上皮细胞分离 | 第24-26页 |
2.2.2 小鼠小肠上皮细胞质膜的分离和膜蛋的白纯化 | 第26-27页 |
2.2.2.1 小鼠小肠上皮细胞质膜的分离 | 第26页 |
2.2.2.2 小鼠小肠上皮细胞膜蛋白的纯化 | 第26-27页 |
2.2.3 牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白的相互作用 | 第27-33页 |
2.2.3.1 不同组分膜蛋白与牛乳铁蛋白的相互作用 | 第28-31页 |
2.2.3.2 pH对牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白相互作用的影响 | 第31-32页 |
2.2.3.3 Ca~(2+)对牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白相互作用的影响 | 第32-33页 |
2.3 结果与讨论 | 第33-44页 |
2.3.1 小鼠肠上皮细胞的分离 | 第33-34页 |
2.3.1.1 胰蛋白酶消化分离肠上皮细胞 | 第33页 |
2.3.1.2 嗜热菌蛋白酶消化分离细胞 | 第33-34页 |
2.3.2 小鼠肠上皮细胞膜蛋白的分离和纯化 | 第34-36页 |
2.3.3 牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白相互作用的分析 | 第36-44页 |
2.3.3.1 不同组分膜蛋白与牛乳铁蛋白相互作用的分子动力学分析 | 第36-39页 |
2.3.3.2 pH的作用影响 | 第39-41页 |
2.3.3.3 Ca~(2+)的作用影响 | 第41-44页 |
第三章 小鼠肠上皮细胞牛乳铁蛋白受体的提取及其与牛乳铁蛋白相互作用的研究 | 第44-62页 |
3.1 材料与仪器 | 第44-45页 |
3.1.1 试剂 | 第44页 |
3.1.2 仪器 | 第44-45页 |
3.2 实验方法 | 第45-52页 |
3.2.1 牛乳铁蛋白受体分离纯化 | 第45-48页 |
3.2.1.1 实验准备 | 第46页 |
3.2.1.2 试验操作 | 第46-48页 |
3.2.2 毛细管电泳 | 第48-50页 |
3.2.2.1 样品及其缓冲液的预处理 | 第49页 |
3.2.2.2 毛细管区带电泳条件 | 第49页 |
3.2.2.3 毛细管区带电泳程序的设定 | 第49-50页 |
3.2.3 牛乳铁蛋白与其受体蛋白的相互作用 | 第50-51页 |
3.2.4 Q-TOF LC/MS分析 | 第51-52页 |
3.2.4.1 样品预处理 | 第51页 |
3.2.4.2 液相色谱条件 | 第51-52页 |
3.2.4.3 质谱条件 | 第52页 |
3.2.4.4 操作程序 | 第52页 |
3.3 结果与讨论 | 第52-62页 |
3.3.1 亲和层析分离纯化牛乳铁蛋白受体 | 第52-54页 |
3.3.1.1 亲和介质与蛋白结合效率 | 第52-53页 |
3.3.1.2 牛乳铁蛋白受体的洗脱 | 第53-54页 |
3.3.2 毛细管电泳 | 第54-57页 |
3.3.2.1 不同洗脱次数所制备的乳铁蛋白受体的毛细管电泳结果 | 第54-56页 |
3.3.2.2 亲和层析柱提取分离乳铁蛋白受体效果的毛细管电泳结果 | 第56-57页 |
3.3.3 牛乳铁蛋白与其受体蛋白的相互作用 | 第57-59页 |
3.3.4 Q-TOF LC/MS分析 | 第59-62页 |
第四章 创新点及进一步设想 | 第62-63页 |
4.1 创新点 | 第62页 |
4.2 尚存在的问题及进一步设想 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
论文、参加科研情况说明 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |