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bLf受体的分离纯化及其结合特性的研究

中文摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
第一章 前言第9-23页
    1.1 引言第9页
    1.2 乳铁蛋白概述第9-13页
        1.2.1 乳铁蛋白的特点第9-11页
        1.2.2 乳铁蛋白的生理功能第11-13页
    1.3 乳铁蛋白受体第13-19页
        1.3.1 小肠乳铁蛋白受体的特点第14-15页
            1.3.1.1 小鼠肠粘膜乳铁蛋白受体(mouse SI-LfR, mSI-LfR)第14页
            1.3.1.2 人小肠乳铁蛋白受体(human SI-LfR, hSI-LfR)的特点第14-15页
            1.3.1.3 其他哺乳动物小肠乳铁蛋白受体的特点第15页
        1.3.2 小肠乳铁蛋白细胞受体的生理功能第15-17页
            1.3.2.1 促进铁吸收第15-16页
            1.3.2.2 调节机体免疫应答第16-17页
        1.3.3 其他乳铁蛋白受体第17-19页
            1.3.3.1 淋巴细胞乳铁蛋白受体(LC-LfR)第17页
            1.3.3.2 单核巨嗜细胞乳铁蛋白受体 (MC-Lf R)第17-19页
    1.4 肠粘膜免疫系统第19-20页
    1.5 课题依据与意义第20-23页
        1.5.1 课题依据第20-22页
            1.5.1.1 乳铁蛋白特性第20-21页
            1.5.1.2 小鼠具有与bLf和hLf结合的受体第21页
            1.5.1.3 肠黏膜免疫的重要性第21-22页
        1.5.2 课题意义第22-23页
第二章 小鼠小肠上皮细胞膜蛋白的分离纯化及其与牛乳铁蛋白的相互作用第23-44页
    2.1 材料和仪器第23-24页
        2.1.1 材料第23-24页
        2.1.2 仪器第24页
    2.2 实验方法第24-33页
        2.2.1 小鼠小肠上皮细胞分离第24-26页
        2.2.2 小鼠小肠上皮细胞质膜的分离和膜蛋的白纯化第26-27页
            2.2.2.1 小鼠小肠上皮细胞质膜的分离第26页
            2.2.2.2 小鼠小肠上皮细胞膜蛋白的纯化第26-27页
        2.2.3 牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白的相互作用第27-33页
            2.2.3.1 不同组分膜蛋白与牛乳铁蛋白的相互作用第28-31页
            2.2.3.2 pH对牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白相互作用的影响第31-32页
            2.2.3.3 Ca~(2+)对牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白相互作用的影响第32-33页
    2.3 结果与讨论第33-44页
        2.3.1 小鼠肠上皮细胞的分离第33-34页
            2.3.1.1 胰蛋白酶消化分离肠上皮细胞第33页
            2.3.1.2 嗜热菌蛋白酶消化分离细胞第33-34页
        2.3.2 小鼠肠上皮细胞膜蛋白的分离和纯化第34-36页
        2.3.3 牛乳铁蛋白与小鼠肠上皮细胞膜蛋白相互作用的分析第36-44页
            2.3.3.1 不同组分膜蛋白与牛乳铁蛋白相互作用的分子动力学分析第36-39页
            2.3.3.2 pH的作用影响第39-41页
            2.3.3.3 Ca~(2+)的作用影响第41-44页
第三章 小鼠肠上皮细胞牛乳铁蛋白受体的提取及其与牛乳铁蛋白相互作用的研究第44-62页
    3.1 材料与仪器第44-45页
        3.1.1 试剂第44页
        3.1.2 仪器第44-45页
    3.2 实验方法第45-52页
        3.2.1 牛乳铁蛋白受体分离纯化第45-48页
            3.2.1.1 实验准备第46页
            3.2.1.2 试验操作第46-48页
        3.2.2 毛细管电泳第48-50页
            3.2.2.1 样品及其缓冲液的预处理第49页
            3.2.2.2 毛细管区带电泳条件第49页
            3.2.2.3 毛细管区带电泳程序的设定第49-50页
        3.2.3 牛乳铁蛋白与其受体蛋白的相互作用第50-51页
        3.2.4 Q-TOF LC/MS分析第51-52页
            3.2.4.1 样品预处理第51页
            3.2.4.2 液相色谱条件第51-52页
            3.2.4.3 质谱条件第52页
            3.2.4.4 操作程序第52页
    3.3 结果与讨论第52-62页
        3.3.1 亲和层析分离纯化牛乳铁蛋白受体第52-54页
            3.3.1.1 亲和介质与蛋白结合效率第52-53页
            3.3.1.2 牛乳铁蛋白受体的洗脱第53-54页
        3.3.2 毛细管电泳第54-57页
            3.3.2.1 不同洗脱次数所制备的乳铁蛋白受体的毛细管电泳结果第54-56页
            3.3.2.2 亲和层析柱提取分离乳铁蛋白受体效果的毛细管电泳结果第56-57页
        3.3.3 牛乳铁蛋白与其受体蛋白的相互作用第57-59页
        3.3.4 Q-TOF LC/MS分析第59-62页
第四章 创新点及进一步设想第62-63页
    4.1 创新点第62页
    4.2 尚存在的问题及进一步设想第62-63页
参考文献第63-69页
论文、参加科研情况说明第69-70页
致谢第70-71页

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