致谢 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第15-17页 |
目录 | 第17-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-33页 |
1 内寄生蜂毒液的研究进展 | 第20-32页 |
2 本研究目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 基本材料和方法 | 第33-42页 |
1 昆虫饲养相关设备 | 第33-34页 |
1.1 全自动人工气候室 | 第33页 |
1.2 日光蔬菜大棚 | 第33页 |
1.3 智能人工气候箱 | 第33页 |
1.4 养虫笼 | 第33页 |
1.5 养蜂罐 | 第33-34页 |
1.6 吸虫管 | 第34页 |
1.7 养虫盒 | 第34页 |
2 供试昆虫的人工饲养 | 第34-35页 |
2.1 供试蔬菜 | 第34页 |
2.2 虫源 | 第34页 |
2.3 寄主昆虫的饲养 | 第34-35页 |
2.4 寄生蜂的饲养 | 第35页 |
3 常用试剂的配制 | 第35-38页 |
3.1 感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
3.2 Luria-Bertani(LB)培养基的制备 | 第36页 |
3.3 琼脂糖凝胶电泳相关试剂 | 第36页 |
3.4 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)相关试剂 | 第36-37页 |
3.5 酶联免疫吸附试验(ELISA)相关试剂 | 第37-38页 |
4 主要实验方法 | 第38-42页 |
4.1 Trizol法提取总RNA | 第38页 |
4.2 cDNA文库的构建 | 第38-39页 |
4.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
4.4 DNA凝胶回收 | 第39-40页 |
4.5 连接反应 | 第40页 |
4.6 质粒或连接产物的转化 | 第40页 |
4.7 表达载体构建 | 第40-41页 |
4.8 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第41-42页 |
第三章 两种寄生蜂毒腺转录组的测序与分析 | 第42-60页 |
1 材料与方法 | 第43-45页 |
1.1 昆虫的饲养和样品制备 | 第43页 |
1.2 RNA抽提和测序文库构建 | 第43-44页 |
1.3 Illumina测序结果的分析 | 第44页 |
1.4 分泌蛋白预测 | 第44-45页 |
1.5 预测编码可能毒液蛋白的unigenes | 第45页 |
2 结果和分析 | 第45-59页 |
2.1 Illumina测序和序列组装 | 第45-46页 |
2.2 序列的注释 | 第46-49页 |
2.3 基因的COG注释 | 第49-50页 |
2.4 GO和KEGG分析 | 第50-52页 |
2.5 可能编码毒液蛋白的unigenes预测 | 第52-56页 |
2.6 讨论 | 第56-59页 |
3 结论 | 第59-60页 |
第四章 部分毒液基因的克隆及原核表达 | 第60-88页 |
1 颈双缘姬蜂蜂毒类毒液抗原5基因的克隆及原核表达 | 第60-68页 |
1.1 材料与方法 | 第60-63页 |
1.2 结果与分析 | 第63-67页 |
1.3 结论 | 第67-68页 |
2 菜蛾盘绒茧蜂蜂毒类毒液过敏原5基因的克隆及原核表达 | 第68-72页 |
2.1 材料与方法 | 第68页 |
2.2 结果与分析 | 第68-71页 |
2.3 结论 | 第71-72页 |
3 颈双缘姬蜂蜂毒类透明质酸酶基因的克隆和序列分析 | 第72-76页 |
3.1 材料与方法 | 第72页 |
3.2 结果与分析 | 第72-75页 |
3.3 结论 | 第75-76页 |
4 菜蛾盘绒茧蜂蜂毒类透明质酸酶基因的克隆和序列分析 | 第76-80页 |
4.1 材料与方法 | 第76页 |
4.2 结果与分析 | 第76-78页 |
4.3 结论 | 第78-80页 |
5 颈双缘姬蜂蜂毒类ADAMTS基因的克隆及原核表达 | 第80-84页 |
5.1 材料与方法 | 第80页 |
5.2 结果与分析 | 第80-83页 |
5.3 结论 | 第83-84页 |
6 菜蛾盘绒茧蜂蜂毒类毒液Vn4.6基因的克隆及原核表达 | 第84-88页 |
6.1 材料与方法 | 第84-85页 |
6.2 结果与分析 | 第85-86页 |
6.3 结论 | 第86-88页 |
第五章 颈双缘姬蜂毒液的蛋白组分析 | 第88-94页 |
1 材料与方法 | 第89-90页 |
1.1 毒液样品的制备 | 第89页 |
1.2 毒液样品的消化 | 第89页 |
1.3 LC-MS/MS | 第89-90页 |
1.4 数据分析 | 第90页 |
1.5 GO注释 | 第90页 |
2 结果与讨论 | 第90-92页 |
2.1 质谱Base peak图谱 | 第90-91页 |
2.2 蛋白鉴定结果 | 第91页 |
2.3 蛋白的GO注释 | 第91-92页 |
3 结论 | 第92-94页 |
第六章 菜蛾盘绒茧蜂毒腺与畸形细胞转录组的比较分析 | 第94-97页 |
1 材料和方法 | 第94页 |
2 结果分析与讨论 | 第94-96页 |
2.1 菜蛾盘绒茧蜂毒腺与畸形细胞差异表达基因确定与分析 | 第94-96页 |
3 结论 | 第96-97页 |
全文小结 | 第97-100页 |
主要研究结果 | 第97-98页 |
创新之处 | 第98页 |
不足之处 | 第98-99页 |
今后的研究方向 | 第99-100页 |
附章 颈双缘姬蜂毒液作用机制的发育生物学基础 | 第100-112页 |
1 材料与方法 | 第100-101页 |
1.1 昆虫的采集和饲养 | 第100-101页 |
1.2 颈双缘姬蜂的发育过程记录 | 第101页 |
2 结果分析 | 第101-109页 |
2.1 卵和胚胎发育 | 第101-104页 |
2.2 幼虫期 | 第104-107页 |
2.3 预蛹和蛹 | 第107-109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
参考文献 | 第112-124页 |
作者简历 | 第124页 |