| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 新型非抗生素类筛选标记系统的研究 | 第14-46页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| 1.1 质体基因工程 | 第14-18页 |
| 1.1.1 质体 | 第14-15页 |
| 1.1.2 质体基因工程原理 | 第15-16页 |
| 1.1.3 质体基因工程研究现状 | 第16-18页 |
| 1.2 筛选标记基因 | 第18-23页 |
| 1.2.1 传统筛选标记基因 | 第18-19页 |
| 1.2.2 生物安全标记基因的开发与应用 | 第19-20页 |
| 1.2.3 开发新型单子叶质体筛选标记基因的必要性 | 第20-21页 |
| 1.2.4 dsdA,dao1作为新型筛选标记基因的优势 | 第21-23页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 基因信息 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第23-24页 |
| 2.1.3 供试植物品种 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-31页 |
| 2.2.1 烟草质体转化体系的重建 | 第24-26页 |
| 2.2.2 筛选标记基因的选择 | 第26-27页 |
| 2.2.3 烟草质体转化dsdA/dao1 | 第27-28页 |
| 2.2.4 水稻核转化dsdA/dao1 | 第28-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-42页 |
| 3.1 烟草质体转化体系的重建 | 第31-34页 |
| 3.1.1 遗传转化与筛选 | 第31-32页 |
| 3.1.2 转化植株的Southern blotting检测以及同质化的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.1.3 转化株种子萌发测验 | 第33-34页 |
| 3.2 烟草质体转化dsdA/dao1 | 第34-36页 |
| 3.2.1 D-氨基酸对烟草叶片的致死浓度测试 | 第34-35页 |
| 3.2.2 转化载体的构建 | 第35页 |
| 3.2.3 遗传转化 | 第35-36页 |
| 3.3 农杆菌介导的水稻核转化dsdA/dao1 | 第36-42页 |
| 3.3.1 转化载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.2 T_0代转化株的阳性检测 | 第37页 |
| 3.3.3 T_0代植株的拷贝数检测 | 第37-39页 |
| 3.3.4 T_0代单拷贝植株表达量检测 | 第39页 |
| 3.3.5 种子萌发测验 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| 4.1 烟草叶绿体转化体系的优化 | 第42页 |
| 4.2 关于烟草质体转化dsdA/dao1 | 第42-43页 |
| 4.3 关于水稻核转化dsdA/dao1 | 第43-44页 |
| 4.4 dsdA/dao1的应用前景 | 第44-46页 |
| 第二章 水稻质体RNA编辑 | 第46-80页 |
| 1 前言 | 第46-55页 |
| 1.1 RNA编辑 | 第46-50页 |
| 1.1.1 RNA编辑位点的确定方法 | 第46-47页 |
| 1.1.2 RNA编辑的机制 | 第47-49页 |
| 1.1.3 RNA编辑的生物学意义 | 第49-50页 |
| 1.2 质体RNA编辑的研究现状 | 第50-54页 |
| 1.2.1 RNA编辑的机制 | 第50页 |
| 1.2.2 质体RNA编辑中顺式作用原件的研究 | 第50-51页 |
| 1.2.3 质体RNA编辑中反式作用因子的研究 | 第51-54页 |
| 1.3 质体RNA编辑研究的前景 | 第54页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第54-55页 |
| 2 材料与方法 | 第55-62页 |
| 2.1 实验材料 | 第55页 |
| 2.2 技术路线 | 第55页 |
| 2.3 实验方法 | 第55-62页 |
| 2.3.1 样品的收集、RNA的抽提以及反转录 | 第55-56页 |
| 2.3.2 RNA编辑位点的确定 | 第56-57页 |
| 2.3.3 引物的设计 | 第57页 |
| 2.3.4 RT-PCR以及RNA编辑位点的检测 | 第57-61页 |
| 2.3.5 RNA编辑效率的分析 | 第61-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-76页 |
| 3.1 样品的收集、RNA的抽提以及反转录 | 第62-63页 |
| 3.2 RT-PCR扩增 | 第63-65页 |
| 3.3 编辑位点的检测 | 第65-66页 |
| 3.4 不同植物叶绿体RNA编辑位点的比较 | 第66页 |
| 3.5 RNA编辑效率分析 | 第66-76页 |
| 3.5.1 所有组织RNA编辑效率总览 | 第66-69页 |
| 3.5.2 不同编辑位点在各个组织中的编辑效率分析 | 第69页 |
| 3.5.3 相同组织在不同RNA编辑位点效率分析 | 第69-71页 |
| 3.5.4 各组织在不同发育时期的编辑效率分析 | 第71-72页 |
| 3.5.5 激素处理对RNA编辑效率的影响 | 第72-73页 |
| 3.5.6 暗处理对RNA编辑效率的影响 | 第73-74页 |
| 3.5.7 光合作用相关基因在各组织中的RNA编辑效率分析 | 第74-76页 |
| 4 讨论 | 第76-80页 |
| 4.1 关于RT-PCR扩增的心得 | 第76页 |
| 4.2 RNA编辑与RNA剪接 | 第76-77页 |
| 4.3 水稻质体RNA编辑的特征 | 第77页 |
| 4.4 关于水稻质体RNA编辑效率 | 第77-78页 |
| 4.5 水稻质体RNA编辑的研究有待深入 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 附录 | 第92-98页 |
| 1 烟草质体转化 | 第92-94页 |
| 1.1 溶液配方 | 第92-93页 |
| 1.2 质体转化所需培养基配方 | 第93-94页 |
| 1.3 CTAB法抽提烟草基因组DNA | 第94页 |
| 2 水稻核转化 | 第94-98页 |
| 2.1 溶液配方 | 第94-96页 |
| 2.2 水稻核转化所需培养基配方 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
