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棉铃虫Hα-Hdd23基因的克隆及功能分析

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
1. 前言第11-19页
    1.1 昆虫先天性免疫第11-15页
        1.1.1 体液免疫第11-13页
        1.1.2 细胞免疫第13-15页
    1.2 RNA干扰在基因功能研究中的应用第15-17页
        1.2.1 RNA干扰的发现第15页
        1.2.2 RNA干扰的作用机制第15-16页
        1.2.3 RNA干扰技术的应用及意义第16-17页
    1.3 本实验的研究背景及意义第17-19页
2. 材料与方法第19-32页
    2.1 实验材料及引物序列第19-20页
        2.1.1 供试棉铃虫来源第19页
        2.1.2 实验所用引物序列第19-20页
    2.2 实验主要试剂及试剂盒第20页
    2.3 实验中主要试剂及培养基的配制第20-21页
    2.4 主要仪器设备第21-22页
    2.5 实验方法第22-27页
        2.5.1 棉铃虫的饲养第22页
        2.5.2 纯种细菌的筛选、培养、保存和计数第22页
        2.5.3 质粒的提取第22-23页
        2.5.4 棉铃虫各组织的采集第23-24页
        2.5.5 棉铃虫Ha-Hdd23基因的克隆第24-27页
    2.6 组织特异表达第27页
    2.7 荧光定量PCR及数据分析处理第27-28页
    2.8 体外合成dsRNA第28-30页
    2.9 dsRNA的注射第30-31页
    2.10 细胞形成结节的测定第31页
    2.11 酚氧化酶活性测定第31-32页
3. 结果与分析第32-40页
    3.1 棉铃虫Ha-Hdd23基因序列的克隆验证第32页
    3.2 棉铃虫Ha-Hdd23基因的序列分析第32-33页
    3.3 Hdd23基因的同源分析及系统进化分析第33-34页
    3.4 Ha-Hdd23在棉铃虫不同组织中的表达情况分析第34页
    3.5 注射不同细菌对棉铃虫Ha-Hdd23基因表达水平的影响第34-36页
        3.5.1 注射金黄色葡萄球菌对棉铃虫Ha-Hdd23基因表达水平的影响第34-35页
        3.5.2 注射大肠杆菌对棉铃虫Ha-Hdd23基因表达水平的影响第35-36页
    3.6 注射不同细菌后棉铃虫体内结节形成的情况第36页
    3.7 Ha-Hdd23基因敲降后对先天性免疫的影响第36-40页
        3.7.1 RNAi敲降Ha-Hdd23基因的检测第36-37页
        3.7.2 Ha-Hdd23基因敲降对酚氧化酶活性的影响第37-38页
        3.7.3 Ha-Hdd23基因敲降对血细胞形成结节的影响第38-40页
4. 讨论第40-43页
    4.1 Ha-Hdd23的序列分析第40页
    4.2 组织特异表达分析第40页
    4.3 不同细菌刺激对Ha-Hdd23相对表达量的影响第40-41页
    4.4 Ha-Hdd23基因敲降对棉铃虫先天性免疫的影响第41-42页
    4.5 小结及展望第42-43页
参考文献第43-48页
已发表论文第48-49页
致谢第49页

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