中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1. 前言 | 第11-19页 |
1.1 昆虫先天性免疫 | 第11-15页 |
1.1.1 体液免疫 | 第11-13页 |
1.1.2 细胞免疫 | 第13-15页 |
1.2 RNA干扰在基因功能研究中的应用 | 第15-17页 |
1.2.1 RNA干扰的发现 | 第15页 |
1.2.2 RNA干扰的作用机制 | 第15-16页 |
1.2.3 RNA干扰技术的应用及意义 | 第16-17页 |
1.3 本实验的研究背景及意义 | 第17-19页 |
2. 材料与方法 | 第19-32页 |
2.1 实验材料及引物序列 | 第19-20页 |
2.1.1 供试棉铃虫来源 | 第19页 |
2.1.2 实验所用引物序列 | 第19-20页 |
2.2 实验主要试剂及试剂盒 | 第20页 |
2.3 实验中主要试剂及培养基的配制 | 第20-21页 |
2.4 主要仪器设备 | 第21-22页 |
2.5 实验方法 | 第22-27页 |
2.5.1 棉铃虫的饲养 | 第22页 |
2.5.2 纯种细菌的筛选、培养、保存和计数 | 第22页 |
2.5.3 质粒的提取 | 第22-23页 |
2.5.4 棉铃虫各组织的采集 | 第23-24页 |
2.5.5 棉铃虫Ha-Hdd23基因的克隆 | 第24-27页 |
2.6 组织特异表达 | 第27页 |
2.7 荧光定量PCR及数据分析处理 | 第27-28页 |
2.8 体外合成dsRNA | 第28-30页 |
2.9 dsRNA的注射 | 第30-31页 |
2.10 细胞形成结节的测定 | 第31页 |
2.11 酚氧化酶活性测定 | 第31-32页 |
3. 结果与分析 | 第32-40页 |
3.1 棉铃虫Ha-Hdd23基因序列的克隆验证 | 第32页 |
3.2 棉铃虫Ha-Hdd23基因的序列分析 | 第32-33页 |
3.3 Hdd23基因的同源分析及系统进化分析 | 第33-34页 |
3.4 Ha-Hdd23在棉铃虫不同组织中的表达情况分析 | 第34页 |
3.5 注射不同细菌对棉铃虫Ha-Hdd23基因表达水平的影响 | 第34-36页 |
3.5.1 注射金黄色葡萄球菌对棉铃虫Ha-Hdd23基因表达水平的影响 | 第34-35页 |
3.5.2 注射大肠杆菌对棉铃虫Ha-Hdd23基因表达水平的影响 | 第35-36页 |
3.6 注射不同细菌后棉铃虫体内结节形成的情况 | 第36页 |
3.7 Ha-Hdd23基因敲降后对先天性免疫的影响 | 第36-40页 |
3.7.1 RNAi敲降Ha-Hdd23基因的检测 | 第36-37页 |
3.7.2 Ha-Hdd23基因敲降对酚氧化酶活性的影响 | 第37-38页 |
3.7.3 Ha-Hdd23基因敲降对血细胞形成结节的影响 | 第38-40页 |
4. 讨论 | 第40-43页 |
4.1 Ha-Hdd23的序列分析 | 第40页 |
4.2 组织特异表达分析 | 第40页 |
4.3 不同细菌刺激对Ha-Hdd23相对表达量的影响 | 第40-41页 |
4.4 Ha-Hdd23基因敲降对棉铃虫先天性免疫的影响 | 第41-42页 |
4.5 小结及展望 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
已发表论文 | 第48-49页 |
致谢 | 第49页 |