摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1 低温菌简介 | 第12-15页 |
1.1 低温菌的分布 | 第12页 |
1.2 低温菌的嗜冷机制 | 第12-15页 |
2 海藻糖 | 第15-21页 |
2.1 海藻糖简介 | 第15页 |
2.2 海藻糖的分布 | 第15-17页 |
2.3 海藻糖的生物学功能 | 第17-18页 |
2.4 真菌海藻糖的生物合成途径 | 第18-19页 |
2.5 海藻糖的代谢调控 | 第19-21页 |
2.6 海藻糖的应用 | 第21页 |
3 本论文的研究内容及意义 | 第21-23页 |
3.1 本论文的研究目的及意义 | 第21-22页 |
3.2 本论文的研究内容 | 第22-23页 |
第二章 南极低温酵母 G. pullulans 17-1 菌株 6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆和生物学分析 | 第23-50页 |
1 前言 | 第23页 |
2 实验材料和方法 | 第23-35页 |
2.1 实验菌株 | 第23-24页 |
2.2 培养基和溶液 | 第24-25页 |
2.3 方法 | 第25-35页 |
3 结果和讨论 | 第35-49页 |
3.1 简并 PCR 克隆获得 G. pullulans 17-1 菌株 TPS1 基因的部分序列 | 第35-38页 |
3.2 反向 PCR 获得 TPS1 基因的部分序列 | 第38-39页 |
3.3 基因组步移获得 TPS1 基因的全部序列 | 第39-40页 |
3.4 TPS1 基因序列在 NCBI 的比对结果及对其 ORF 框预测 | 第40-41页 |
3.5 反转录 PCR | 第41-42页 |
3.6 GPTPS1 基因序列的信息学分析 | 第42页 |
3.7 GPTPS1 基因的启动子 | 第42-44页 |
3.8 从 GPTPS1 基因推导的 Tps1 蛋白序列的保守性分析 | 第44页 |
3.9 Tps1 蛋白氨基酸序列糖基化位点分析 | 第44-45页 |
3.10 Tps1 蛋白氨基酸序列信号肽预测 | 第45-48页 |
3.11 Tps1 蛋白氨基酸序列系统进化树 | 第48-49页 |
4 本章小结 | 第49-50页 |
第三章 不同温度条件下 G. pullulans 17-1 菌株中海藻糖的积累、Tps1 酶活和 TPS1 基因表达的研究 | 第50-63页 |
1 前言 | 第50页 |
2 材料和方法 | 第50-55页 |
2.1 实验菌株 | 第50页 |
2.2 培养基和试剂 | 第50-51页 |
2.3 实验方法 | 第51-55页 |
3 结果和讨论 | 第55-61页 |
3.1 不同温度对菌体生长的影响 | 第55-56页 |
3.2 不同温度下海藻糖含量的变化 | 第56-57页 |
3.3 不同温度下 6-磷酸海藻糖合成酶活力的变化 | 第57-58页 |
3.4 荧光定量 PCR | 第58-60页 |
3.5 逆境胁迫实验 | 第60-61页 |
4 本章小结 | 第61-63页 |
第四章 G. pullulans 17-1 菌株 6-磷酸海藻糖磷酸酯酶基因的部分克隆和生物学分析 | 第63-78页 |
1 前言 | 第63页 |
2 材料和方法 | 第63-68页 |
2.1 实验菌株 | 第63页 |
2.2 培养基和溶液 | 第63-64页 |
2.3 方法 | 第64-68页 |
3 结果和讨论 | 第68-77页 |
3.1 简并 PCR 克隆获得 G. pullulans 17-1 菌株 TPS2 基因部分序列 | 第68-71页 |
3.2 基因组步移获得 TPS2 基因的部分序列 | 第71-72页 |
3.3 序列在 NCBI 的比对结果及 TPS2 基因的 ORF 框预测 | 第72-73页 |
3.4 反转录 PCR | 第73-74页 |
3.5 GPTPS2 基因序列的信息学分析 | 第74页 |
3.6 Tps2 蛋白氨基酸序列糖基化位点分析 | 第74-76页 |
3.7 Tps2 蛋白氨基酸序列系统进化树 | 第76-77页 |
4 本章小结 | 第77-78页 |
论文总结与创新点 | 第78-79页 |
1 论文总结 | 第78页 |
2. 创新点 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
附录:英文缩写符号及中英文对照表 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第85-86页 |