论文的创新性工作 | 第1-4页 |
中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略词表 | 第9-16页 |
第一部分 文献综述及选题目的和意义 | 第16-24页 |
第一章 疱疹病毒gC基因工程疫苗的研究进展 | 第16-24页 |
1. gC的功能 | 第16-18页 |
·gC在病毒防御方面的功能 | 第17页 |
·gC在病毒攻击方面的功能 | 第17-18页 |
2. gC潜在的疱疹病毒疫苗策略 | 第18-20页 |
·基于gC的防御作用 | 第18-19页 |
·基于gC的攻击作用 | 第19-20页 |
3. gC基因工程疫苗的研究与应用 | 第20-21页 |
·基因缺失减毒活疫苗 | 第20页 |
·重组亚单位疫苗 | 第20页 |
·重组病毒活载体疫苗 | 第20-21页 |
·DNA疫苗 | 第21页 |
4. 展望 | 第21页 |
5. 选题目的和意义 | 第21-24页 |
第二部分 实验研究 | 第24-116页 |
第二章 鸭肠炎病毒gC基因免疫原性理论预测 | 第24-37页 |
1. 实验材料 | 第24页 |
2. 实验方法 | 第24-25页 |
·DEV gC同源性分析 | 第24-25页 |
·DEV gC二级结构预测 | 第25页 |
·DEV gC功能区的预测 | 第25页 |
·DEV gC T细胞表位的预测 | 第25页 |
·DEV gC B细胞表位的预测 | 第25页 |
3. 结果 | 第25-32页 |
·DEV gC同源性分析 | 第25-26页 |
·DEV gC二级结构预测 | 第26页 |
·DEV gC功能区的预测 | 第26-28页 |
·DEV gC T细胞表位的预测 | 第28-29页 |
·DEV gC B细胞表位预测 | 第29-32页 |
4. 讨论 | 第32-36页 |
5. 小结 | 第36-37页 |
第三章 壳聚糖作为pcDNA-DEV-gC疫苗递送载体:制备和生物学特性研究 | 第37-49页 |
1. 实验材料 | 第37-38页 |
·载体和细胞 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
2. 试验方法 | 第38-40页 |
·壳聚糖/pcDNA-DEV-gC复合物制备 | 第38页 |
·壳聚糖/pcDNA-DEV-gC复合物对质粒包封率的测定 | 第38页 |
·壳聚糖/pcDNA-DEV-gC复合物形态和粒径的测定 | 第38-39页 |
·酶降解保护试验 | 第39页 |
·体外细胞毒性试验 | 第39页 |
·体外转染实验 | 第39-40页 |
3. 结果 | 第40-46页 |
·0.8%琼脂糖凝胶电泳初步检测复合物制备效果 | 第40-41页 |
·壳聚糖/pcDNA-DEV-gC复合物对质粒的包封率 | 第41页 |
·壳聚糖/pcDNA-DEV-gC复合物的形态和粒径 | 第41页 |
·酶降解保护试验 | 第41-42页 |
·体外转染实验 | 第42-43页 |
·体外细胞毒性实验 | 第43-46页 |
4. 讨论 | 第46-48页 |
5. 小结 | 第48-49页 |
第四章 阳性脂质体作为pcDNA-DEV-gC疫苗递送载体制备和生物学特性研究 | 第49-63页 |
1. 实验材料 | 第49-50页 |
·载体和细胞 | 第49-50页 |
·主要试剂 | 第50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
2. 试验方法 | 第50-52页 |
·阳性脂质体/pcDNA-DEV-gC复合物制备 | 第50页 |
·阳性脂质体/pcDNA-DEV-gC复合物对质粒包封率的测定 | 第50-51页 |
·阳性脂质体/pcDNA-DEV-gC复合物形态和粒径的测定 | 第51页 |
·酶降解保护试验 | 第51页 |
·体外细胞毒性试验 | 第51-52页 |
·体外转染实验 | 第52页 |
3. 结果 | 第52-58页 |
·0.8%琼脂糖凝胶电泳初步检测复合物制备效果 | 第52-53页 |
·阳性脂质体/pcDNA-DEV-gC复合物对质粒的包封率 | 第53-54页 |
·阳性脂质体/pcDNA-DEV-gC复合物的形态和粒径 | 第54页 |
·酶降解保护试验 | 第54-55页 |
·体外转染实验 | 第55页 |
·体外细胞毒性实验 | 第55-58页 |
4. 讨论 | 第58-62页 |
5. 小结 | 第62-63页 |
第五章 间接ELISA检测鼠抗DEV特异性血清IgG和肠道IgA方法的建立 | 第63-72页 |
1. 实验材料 | 第63-64页 |
·毒株和细胞 | 第63页 |
·实验动物 | 第63页 |
·主要试剂 | 第63-64页 |
·主要仪器 | 第64页 |
2. 试验方法 | 第64-67页 |
·鼠抗DEV多克隆抗体制备 | 第64-66页 |
·建立检测鼠抗DEV特异性IgG和IgA的间接ELISA方法 | 第66-67页 |
3. 实验结果 | 第67-70页 |
·鼠抗DEV多克隆抗体效价测定 | 第67页 |
·建立检测鼠抗DEV特异性IgG和IgA的间接ELISA方法 | 第67-70页 |
4. 讨论 | 第70-71页 |
5. 小结 | 第71-72页 |
第六章 鸭肠炎病毒gC基因疫苗诱导BALB/c小鼠免疫发生的研究 | 第72-116页 |
1. 实验材料 | 第73-74页 |
·毒株、质粒、疫苗和基因枪"子弹" | 第73页 |
·实验动物 | 第73页 |
·主要试剂 | 第73页 |
·主要仪器和软件 | 第73-74页 |
2. 试验方法 | 第74-76页 |
·阳性脂质体和壳聚糖/pcDNA-DEV-gC基因疫苗纳米粒的制备 | 第74页 |
·实验分组及免疫 | 第74-75页 |
·样品采集及处理 | 第75页 |
·外周血T淋巴细胞转化实验 | 第75页 |
·T淋巴细胞亚群数量变化的检测 | 第75页 |
·间接ELISA方法检测抗体水平 | 第75-76页 |
·微量中和试验检测血清抗体 | 第76页 |
3. 结果 | 第76-107页 |
·疫苗免疫小鼠后的实验结果 | 第76-82页 |
·基因疫苗不同免疫途径免疫小鼠后的效果比较 | 第82-94页 |
·基因疫苗不同免疫剂量免疫小鼠后的效果比较 | 第94-100页 |
·不同递送载体的比较 | 第100-102页 |
·基因疫苗与弱毒疫苗免疫小鼠后的效果比较 | 第102-106页 |
·微量中和试验结果 | 第106-107页 |
4. 讨论 | 第107-114页 |
·机体免疫应答与病毒感染的关系 | 第107页 |
·小鼠免疫基因疫苗后外周血T淋巴细胞转化效果 | 第107-108页 |
·小鼠免疫基因疫苗后CD4+和CD8+T淋巴细胞动态变化 | 第108页 |
·小鼠免疫基因疫苗后血清抗体IgG的动态变化 | 第108-109页 |
·小鼠免疫基因疫苗后肠道抗体IgA的动态变化 | 第109页 |
·小鼠免疫基因疫苗后中和抗体的变化 | 第109页 |
·免疫剂量对基因疫苗免疫效果的影响 | 第109-110页 |
·免疫途径对基因疫苗免疫效果的影响 | 第110-111页 |
·递送载体对基因疫苗免疫效果的影响 | 第111-112页 |
·小鼠免疫基因疫苗和弱毒疫苗后免疫效果的比较 | 第112页 |
·影响基因疫苗免疫效果的因素 | 第112-114页 |
·鸭肠炎病毒gC基因疫苗的研究意义及展望 | 第114页 |
5. 小结 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-132页 |
致谢 | 第132-133页 |
作者简介 | 第133页 |