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猪SIgA直接ELISA检测方法的建立及对猪肺炎支原体灭活疫苗免疫效果的评估

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 前言第10-20页
   ·黏膜免疫概述第10-12页
     ·黏膜免疫系统第10-11页
     ·黏膜免疫的基本特点第11-12页
   ·SIgA与黏膜免疫第12-15页
     ·IgA的结构及其分类第12-13页
     ·SIgA的合成调节与代谢第13-14页
     ·SIgA免疫体系的生物学功能第14-15页
   ·SIgA的分离纯化第15-16页
   ·猪肺炎支原体及其危害性概述第16-18页
   ·黏膜免疫疫苗第18-19页
   ·本研究的目的意义第19-20页
2 试验材料第20-23页
   ·试验动物、菌株第20页
   ·SDS-PAGE相关溶液第20页
   ·ELISA相关溶液第20-21页
   ·离子交换层析相关溶液第21页
   ·猪肺炎支原体培养基第21页
   ·主要仪器设备第21-22页
   ·主要试剂第22-23页
3. 试验方法第23-28页
   ·猪SIgA的提取第23页
     ·猪肠黏液收集第23页
     ·SIgA的粗提第23页
     ·SIgA的纯化第23页
   ·兔抗猪SIgA免疫血清的制备第23页
   ·兔抗猪(SIgA)IgG的提纯第23-24页
   ·SDS-PAGE鉴定第24页
   ·兔抗猪(SIgA)IgG-HRP酶标抗体的制备第24-25页
   ·直接ELISA方法的建立第25-26页
     ·直接ELISA操作程序第25页
     ·直接ELISA反应条件的建立与优化第25-26页
     ·直接ELISA阴阳界限的确定第26页
     ·直接ELISA精密度试验第26页
     ·SIgA浓度标准曲线的建立与回收率观察第26页
     ·临床试验第26-27页
     ·攻毒菌液的制备第26页
     ·试验分组、免疫与攻毒第26-27页
     ·取样第27页
     ·ELISA检测抗体效价第27页
     ·数据分析第27-28页
4 试验结果第28-38页
   ·猪SIgA的提取第28-29页
     ·猪肠黏液SIgA得率第28页
     ·SIgA的纯化及鉴定第28-29页
   ·兔抗猪(SIgA)IgG的纯化与鉴定第29页
   ·兔抗猪(SIgA)IgG-HRP酶标抗体的制备第29-30页
   ·直接ELISA方法的建立第30-35页
     ·样品最佳包被浓度和酶标抗体工作浓度的确定第30页
     ·封闭处理对检测的影响第30-32页
     ·酶标抗体作用时间的确定第32-33页
     ·直接ELISA阴阳界限的确定第33页
     ·直接ELISA精密度试验第33-34页
     ·SIgA浓度标准曲线的建立与回收率观察第34-35页
   ·临床试验第35-38页
5.讨论第38-43页
   ·关于SIgA的提取第38-39页
   ·关于兔抗猪(SIgA)IgG的纯化第39页
   ·关于兔抗猪(SIgA)IgG-HRP酶标抗体的制备第39-40页
   ·直接ELISA试验方法研究第40-41页
   ·临床试验第41-43页
6.结论第43-44页
参考文献第44-56页
致谢第56页

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