中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
本文部分缩写的中英文对照 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1. 前言 | 第12-21页 |
·奶牛乳腺炎的危害 | 第12-13页 |
·奶牛乳腺的防御系统 | 第13-15页 |
·细菌性乳腺炎的病理过程及持续存在的机制 | 第15-16页 |
·细菌性乳腺炎的疫苗预防研究进展 | 第16-19页 |
·金葡菌的生物学特性 | 第19-21页 |
2. 金葡菌β-溶血素研究进展 | 第21-25页 |
·金葡菌β-溶血素的制备和纯化 | 第21-22页 |
·金葡菌β-溶血素的性质 | 第22-25页 |
·影响金葡菌β-溶血素活性的各种因素 | 第25页 |
3. 小鼠模型在研究奶牛金葡菌乳腺炎中的应用 | 第25-26页 |
4. 本试验的研究目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 实验内容 | 第28-54页 |
实验一、牛源性金葡菌攻击下小鼠泌乳期感染模型的建立 | 第28-38页 |
1. 试验材料 | 第28-29页 |
·菌株 | 第28页 |
·主要药品与试剂 | 第28页 |
·主要溶液的配置 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28-29页 |
2. 试验方法 | 第29-32页 |
·细菌毒力活化 | 第29页 |
·试验动物 | 第29页 |
·小鼠试验性乳腺炎模型的建立 | 第29页 |
·取材 | 第29-30页 |
·乳腺病理组织形态学观察 | 第30页 |
·乳腺匀浆液中细胞因子的变化 | 第30-31页 |
·数据统计与分析 | 第31-32页 |
3. 结果 | 第32-36页 |
·菌株毒力变化 | 第32页 |
·各造模剂量下乳腺组织中分离到的金葡菌数量的变化 | 第32-33页 |
·乳腺病理形态学观察 | 第33页 |
·乳腺内TNF-α、IL-2和IL-6标准曲线的绘制及含量的变化 | 第33-36页 |
4. 讨论 | 第36-38页 |
实验二、重组金葡菌β-溶血素亚单位疫苗对小鼠金葡菌性乳腺炎的保护效果研究 | 第38-54页 |
1. 试验材料 | 第38-41页 |
·试验动物 | 第38页 |
·攻毒细菌准备 | 第38页 |
·菌种和质粒 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要试剂的配置 | 第38-40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
2. 实验方法 | 第41-46页 |
·β-HL目的蛋白和pET-32a (+)空载体的诱导表达和纯化 | 第41-42页 |
·目的蛋白的定量检测 | 第42-43页 |
·亚单位疫苗的制作 | 第43页 |
·疫苗的无菌检验及安全检验 | 第43页 |
·免疫程序 | 第43-44页 |
·测定指标与方法 | 第44-46页 |
·数据统计与分析 | 第46页 |
3. 结果与分析 | 第46-51页 |
·β-HL融合蛋白和pET-32a (+)空载体的诱导表达和纯化 | 第46-47页 |
·蛋白标准曲线的制作与目的蛋白含量测定 | 第47-48页 |
·疫苗无菌和安全检验 | 第48页 |
·间接ELISA检测抗体效价 | 第48-49页 |
·乳腺组织细胞因子的变化 | 第49页 |
·乳腺病理组织形态学观察 | 第49-50页 |
·β-HL融合蛋白和pET-32a(+)空载体蛋白两种抗原性检测 | 第50-51页 |
4. 讨论 | 第51-54页 |
·对乳腺组织的保护作用 | 第51页 |
·对乳腺组织中TNF-α、IL-2和IL-6水平的影响 | 第51-53页 |
·血清中特异性抗体水平的变化及pET-32a-载体对金葡菌重组β-溶血素的影响 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第63页 |