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小菜蛾对Bt Cry1Ac毒素抗性的分子机制研究

摘要第6-9页
Abstract第9-12页
英文缩略表第19-21页
第一章 引言第21-37页
    1.1 小菜蛾概况第21-23页
        1.1.1 小菜蛾的分类学特征第21页
        1.1.2 小菜蛾的全球分布状况第21-22页
        1.1.3 小菜蛾的生活史与习性第22-23页
        1.1.4 小菜蛾的为害状况第23页
    1.2 小菜蛾抗药性的研究进展第23-28页
        1.2.1 国际小菜蛾抗药性研究现状第23-27页
        1.2.2 国内小菜蛾抗药性的研究现状第27-28页
    1.3 苏云金芽孢杆菌Bt及其杀虫晶体蛋白概况第28-31页
        1.3.1 Bt概况第28-29页
        1.3.2 Bt杀虫晶体蛋白的分类和结构特点第29页
        1.3.3 Bt杀虫晶体蛋白的作用机制第29-31页
    1.4 昆虫对Bt抗性的研究进展第31-34页
        1.4.1 昆虫对Bt抗性的研究现状第31-32页
        1.4.2 昆虫对Bt抗性的分子机制第32-34页
    1.5 小菜蛾对Bt抗性的研究进展第34-35页
        1.5.1 国内外小菜蛾对Bt抗性的研究现状第34-35页
        1.5.2 本实验室小菜蛾对Bt抗性的前期研究基础第35页
    1.6 本研究基本内容、目的和意义第35-37页
        1.6.1 本研究的基本内容第35-36页
        1.6.2 本研究的目的与意义第36-37页
第二章 小菜蛾的室内饲养、抗性汰选与毒力生物测定第37-45页
    2.1 材料与方法第37-42页
        2.1.1 小菜蛾的室内饲养第37-40页
        2.1.2 小菜蛾的抗性汰选第40-41页
        2.1.3 小菜蛾的毒力生物测定第41-42页
    2.2 结果与分析第42页
        2.2.1 小菜蛾不同种群的毒力生物测定第42页
    2.3 讨论第42-45页
第三章 Bt Cry1Ac毒素与小菜蛾中肠BBMV蛋白结合分析第45-51页
    3.1 材料与方法第45-49页
        3.1.1 供试小菜蛾种群第45页
        3.1.2 供试Cry1Ac毒素蛋白第45页
        3.1.3 小菜蛾中肠的解剖和BBMV蛋白的提取第45-46页
        3.1.4 Cry1Ac毒素结合测定第46-49页
    3.2 结果与分析第49页
        3.2.1 Bt Cry1Ac毒素与小菜蛾中肠BBMV蛋白的结合分析第49页
    3.3 讨论第49-51页
第四章 小菜蛾中肠CAD基因与Bt抗性的关系研究第51-71页
    4.1 材料与方法第52-57页
        4.1.1 供试小菜蛾种群第52页
        4.1.2 供试Cry1Ac毒素蛋白第52页
        4.1.3 cDNA合成和gDNA提取第52页
        4.1.4 基因克隆和测序第52-53页
        4.1.5 基因序列的生物信息学分析第53页
        4.1.6 系统进化树的构建第53-56页
        4.1.7 实时荧光定量PCR分析第56页
        4.1.8 dsRNA合成和RNAi功能性分析第56-57页
        4.1.9 遗传连锁功能分析第57页
    4.2 结果与分析第57-68页
        4.2.1 小菜蛾Bt敏抗CAD基因序列克隆与分析第57-61页
        4.2.2 小菜蛾Bt敏抗CAD基因表达量分析第61-64页
        4.2.3 RNAi功能性分析第64-65页
        4.2.4 遗传连锁功能性分析第65-68页
    4.3 讨论第68-71页
第五章 小菜蛾中肠ALP基因与Bt抗性关系的研究第71-93页
    5.1 材料与方法第71-80页
        5.1.1 供试小菜蛾种群第71页
        5.1.2 供试Cry1Ac毒素蛋白第71-72页
        5.1.3 中肠解剖和样品准备第72页
        5.1.4 ALP和APN酶活性测定第72页
        5.1.5 RNA提取和cDNA合成第72-73页
        5.1.6 基因克隆和测序第73-76页
        5.1.7 基因序列分析和进化树构建第76页
        5.1.8 实时荧光定量PCR分析第76页
        5.1.9 基因异源表达研究第76-77页
        5.1.10 重组蛋白与Cry1Ac毒素结合分析第77-78页
        5.1.11 Sf9细胞毒性测定第78页
        5.1.12 dsRNA合成和RNAi功能分析第78-80页
        5.1.13遗传连锁功能分析第80页
    5.2 结果与分析第80-92页
        5.2.1 基因克隆和表达分析第80-87页
        5.2.2 受体功能分析第87-90页
        5.2.3 遗传连锁功能分析第90-92页
    5.3 讨论第92-93页
第六章 小菜蛾中肠ABCC1-5 基因与Bt抗性关系的研究第93-131页
    6.1 材料与方法第93-114页
        6.1.1 供试小菜蛾种群第93页
        6.1.2 供试Cry1Ac毒素蛋白第93页
        6.1.3 BtR-1 抗性基因座组装和组成分析第93-102页
        6.1.4 RNA提取和cDNA合成第102页
        6.1.5 基因克隆和测序第102-112页
        6.1.6 基因序列分析和进化树构建第112页
        6.1.7 实时荧光定量PCR分析第112页
        6.1.8 dsRNA合成和RNAi功能分析第112-113页
        6.1.9 遗传连锁功能分析第113-114页
    6.2 结果与分析第114-129页
        6.2.1 BtR-1 抗性基因座组装第114-115页
        6.2.2 BtR-1 抗性基因座内PxABCC1-5 基因研究第115-126页
        6.2.3 遗传连锁功能分析第126-129页
    6.3 讨论第129-131页
第七章 小菜蛾中肠MAP4K4基因与Bt抗性关系的研究第131-146页
    7.1 材料与方法第131-138页
        7.1.1 供试小菜蛾种群第131-132页
        7.1.2 供试Cry1Ac毒素蛋白第132页
        7.1.3 RNA提取和cDNA合成第132页
        7.1.4 基因克隆和测序第132-135页
        7.1.5 基因序列分析第135页
        7.1.6 实时荧光定量PCR分析第135页
        7.1.7 Cry1Ac毒素诱导分析第135页
        7.1.8 dsRNA合成和RNAi功能分析第135-138页
    7.2 结果与分析第138-143页
        7.2.1 基因克隆与序列分析第138-139页
        7.2.2 基因表达量分析第139-142页
        7.2.3 dsRNA的合成和RNAi功能分析第142-143页
    7.3 讨论第143-146页
第八章 小菜蛾中肠ABCG1基因与Bt抗性关系的研究第146-171页
    8.1 材料与方法第146-156页
        8.1.1 供试小菜蛾种群第146-147页
        8.1.2 供试Cry1Ac毒素蛋白第147页
        8.1.3 RNA提取和cDNA合成第147页
        8.1.4 基因克隆与序列差异检测第147-151页
        8.1.5 基因序列生物信息学分析第151页
        8.1.6 系统发生关系分析第151-155页
        8.1.7 实验样品准备第155页
        8.1.8 实时荧光定量PCR分析第155页
        8.1.9 dsRNA合成和RNAi功能分析第155-156页
        8.1.10 遗传连锁功能分析第156页
    8.2 结果与分析第156-168页
        8.2.1 基因的克隆与序列分析第156-161页
        8.2.2 系统发生关系分析第161页
        8.2.3 基因时空表达方式分析第161-162页
        8.2.4 基因序列差异分析第162-164页
        8.2.5 基因表达量差异分析第164页
        8.2.6 基因表达水平与抗性关系分析第164-165页
        8.2.7 RNAi功能分析第165-166页
        8.2.8 遗传连锁功能分析第166-168页
    8.3 讨论第168-171页
第九章 小菜蛾中肠ABCH1基因与Bt抗性关系的研究第171-197页
    9.1 材料与方法第172-178页
        9.1.1 供试小菜蛾种群第172页
        9.1.2 供试Cry1Ac毒素蛋白第172页
        9.1.3 RNA提取和cDNA合成第172页
        9.1.4 基因克隆与序列差异检测第172-176页
        9.1.5 基因序列生物信息学分析第176页
        9.1.6 系统发生关系分析第176页
        9.1.7 实验样品准备第176-177页
        9.1.8 实时荧光定量PCR分析第177页
        9.1.9 dsRNA合成和RNAi功能分析第177-178页
    9.2 结果与分析第178-193页
        9.2.1 基因克隆与序列分析第178-182页
        9.2.2 系统发生关系分析第182-185页
        9.2.3 基因时空表达方式分析第185-186页
        9.2.4 基因与抗性关系分析第186-189页
        9.2.5 RNAi对小菜蛾死亡率的影响第189-193页
    9.3 讨论第193-197页
第十章 全文结论第197-200页
参考文献第200-225页
附录第225-226页
致谢第226-228页
作者简历第228-230页

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