摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-33页 |
1.1 蜡质的合成代谢 | 第15-24页 |
1.1.1 蜡质的化学组成成分 | 第16-17页 |
1.1.2 脂肪酸前体的合成 | 第17-19页 |
1.1.3 脂肪酸的延伸 | 第19-22页 |
1.1.4 脂肪酸产物的衍生 | 第22-24页 |
1.2 蜡质的转运和分泌 | 第24-26页 |
1.2.1 蜡质组分从内质网到质膜的转运 | 第25-26页 |
1.2.2 蜡质组分穿过质膜的转运 | 第26页 |
1.2.3 蜡质组分由质膜向细胞壁外的分泌 | 第26页 |
1.3 蜡质代谢的调控 | 第26-29页 |
1.3.1 环境激素因子的调控 | 第27页 |
1.3.2 转录水平的调控 | 第27-28页 |
1.3.3 非转录水平的调控 | 第28-29页 |
1.4 拟南芥及主要作物中已克隆的蜡质相关基因 | 第29-32页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第32-33页 |
第二章 水稻蜡质缺陷突变体wsl3的表型鉴定及精细定位 | 第33-44页 |
2.1 材料与方法 | 第33-36页 |
2.1.1 实验材料及种植 | 第33页 |
2.1.2 wsl3表型鉴定 | 第33页 |
2.1.3 扫描电镜 (SEM) 分析 | 第33页 |
2.1.4 透射电镜 (TEM) 分析 | 第33-34页 |
2.1.5 叶片表面蜡质组分的测定分析 | 第34页 |
2.1.6 叶片表面角质组分的测定分析 | 第34页 |
2.1.7 叶片离体失水率的测定 | 第34-35页 |
2.1.8 叶片叶绿素浸出率的测定 | 第35页 |
2.1.9 野生型和突变体的耐旱检测 | 第35页 |
2.1.10 WSL3的图位克隆 | 第35-36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-43页 |
2.2.1 wsl3突变体的表型特征 | 第36-37页 |
2.2.2 wsl3突变体细胞壁及表面蜡质的细胞学观察 | 第37-38页 |
2.2.3 wsl3突变体叶片表面蜡质及角质组分的测定 | 第38-40页 |
2.2.4 wsl3突变体的生理特征 | 第40-41页 |
2.2.5 WSL3基因的精细定位 | 第41-42页 |
2.2.6 83 kb定位区间内的基因预测 | 第42-43页 |
2.3 讨论 | 第43-44页 |
第三章 水稻蜡质基因WSL3的克隆和功能分析 | 第44-57页 |
3.1 材料与方法 | 第44-48页 |
3.1.1 WSL3转基因载体的构建和遗传转化 | 第44-46页 |
3.1.2 WSL3及其同源蛋白的生物信息学分析 | 第46页 |
3.1.3 WSL3基因的表达模式分析 | 第46-47页 |
3.1.4 WSL3的亚细胞定位分析 | 第47页 |
3.1.5 WSL3对酵母突变体ybr159wΔ 的互补分析 | 第47-48页 |
3.1.6 WSL3的微粒体脂肪酸延伸活性分析 | 第48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-55页 |
3.2.1 WSL3基因的互补验证 | 第48-49页 |
3.2.2 WSL3基因的生物信息学分析 | 第49-51页 |
3.2.3 WSL3基因的表达模式和GUS分析 | 第51-52页 |
3.2.4 WSL3的亚细胞定位 | 第52页 |
3.2.5 WSL3基因RNAi干扰实验 | 第52-53页 |
3.2.6 WSL3基因对酵母突变体ybr159wΔ 的互补分析 | 第53-54页 |
3.2.7 WSL3在酵母中的微粒体脂肪酸延伸活性分析 | 第54-55页 |
3.3 讨论 | 第55-57页 |
第四章 水稻蜡质缺陷突变体wsl4的表型鉴定及精细定位 | 第57-65页 |
4.1 材料与方法 | 第57-58页 |
4.1.1 实验材料及种植 | 第57页 |
4.1.2 wsl4突变体的表型鉴定 | 第57页 |
4.1.3 扫描电镜 ((SEM)) 分析 | 第57页 |
4.1.4 透射电镜 ((TEM)) 分析 | 第57页 |
4.1.5 叶片表面蜡质组分的测定分析 | 第57-58页 |
4.1.6 叶片表面角质组分的测定分析 | 第58页 |
4.1.7 叶片离体失水率和叶绿素浸出率的测定 | 第58页 |
4.1.8 WSL4的图位克隆 | 第58页 |
4.1.9 候选基因的扩增和测序分析 | 第58页 |
4.2 结果与分析 | 第58-64页 |
4.2.1 wsl4突变体的表型特征 | 第58-59页 |
4.2.2 wsl4突变体的细胞壁及表面蜡质的细胞学观察 | 第59-60页 |
4.2.3 wsl4突变体叶片表面蜡质及角质组分的测定 | 第60-61页 |
4.2.4 wsl4突变体的表皮渗透性调查 | 第61-62页 |
4.2.5 WSL4基因的精细定位 | 第62-63页 |
4.2.6 58 kb定位区间内的基因预测 | 第63-64页 |
4.3 讨论 | 第64-65页 |
第五章 水稻蜡质基因WSL4的克隆和功能分析 | 第65-74页 |
5.1 材料和方法 | 第65-67页 |
5.1.1 WSL4转基因载体的构建和遗传转化 | 第65-66页 |
5.1.2 WSL4及其同源蛋白的序列比对及聚类进化树构建 | 第66页 |
5.1.3 WSL4基因的表达模式分析 | 第66页 |
5.1.4 WSL4的亚细胞定位分析 | 第66-67页 |
5.1.5 WSL4的Crispr/Cas9突变体构建及拟南芥同源基因的异源表达分析 | 第67页 |
5.2 结果与分析 | 第67-72页 |
5.2.1 WSL4基因的互补验证 | 第67-68页 |
5.2.2 WSL4基因的生物信息学分析 | 第68-69页 |
5.2.3 WSL4基因的表达模式和GUS分析 | 第69页 |
5.2.4 WSL4的亚细胞定位 | 第69-70页 |
5.2.5 WSL4基因的RNAi干扰 | 第70-71页 |
5.2.6 WSL4的Crispr/Cas9突变体及拟南芥同源基因的异源表达分析 | 第71-72页 |
5.3 讨论 | 第72-74页 |
第六章 全文总结 | 第74-76页 |
6.1 wsl3和wsl4突变体的蜡质积累异常 | 第74页 |
6.2 WSL3和WSL4基因编码FAE复合体蛋白,参与了超长链脂肪酸的延伸 | 第74页 |
6.3 WSL3和WSL4组成型表达且定位于内质网中 | 第74页 |
6.4 WSL3具有脂肪酸延伸酶活性 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
附录 | 第88-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
作者简介 | 第95-96页 |