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水稻蜡质合成代谢基因WSL3及WSL4的克隆和功能分析

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第13-14页
第一章 文献综述第14-33页
    1.1 蜡质的合成代谢第15-24页
        1.1.1 蜡质的化学组成成分第16-17页
        1.1.2 脂肪酸前体的合成第17-19页
        1.1.3 脂肪酸的延伸第19-22页
        1.1.4 脂肪酸产物的衍生第22-24页
    1.2 蜡质的转运和分泌第24-26页
        1.2.1 蜡质组分从内质网到质膜的转运第25-26页
        1.2.2 蜡质组分穿过质膜的转运第26页
        1.2.3 蜡质组分由质膜向细胞壁外的分泌第26页
    1.3 蜡质代谢的调控第26-29页
        1.3.1 环境激素因子的调控第27页
        1.3.2 转录水平的调控第27-28页
        1.3.3 非转录水平的调控第28-29页
    1.4 拟南芥及主要作物中已克隆的蜡质相关基因第29-32页
    1.5 本研究的目的意义第32-33页
第二章 水稻蜡质缺陷突变体wsl3的表型鉴定及精细定位第33-44页
    2.1 材料与方法第33-36页
        2.1.1 实验材料及种植第33页
        2.1.2 wsl3表型鉴定第33页
        2.1.3 扫描电镜 (SEM) 分析第33页
        2.1.4 透射电镜 (TEM) 分析第33-34页
        2.1.5 叶片表面蜡质组分的测定分析第34页
        2.1.6 叶片表面角质组分的测定分析第34页
        2.1.7 叶片离体失水率的测定第34-35页
        2.1.8 叶片叶绿素浸出率的测定第35页
        2.1.9 野生型和突变体的耐旱检测第35页
        2.1.10 WSL3的图位克隆第35-36页
    2.2 结果与分析第36-43页
        2.2.1 wsl3突变体的表型特征第36-37页
        2.2.2 wsl3突变体细胞壁及表面蜡质的细胞学观察第37-38页
        2.2.3 wsl3突变体叶片表面蜡质及角质组分的测定第38-40页
        2.2.4 wsl3突变体的生理特征第40-41页
        2.2.5 WSL3基因的精细定位第41-42页
        2.2.6 83 kb定位区间内的基因预测第42-43页
    2.3 讨论第43-44页
第三章 水稻蜡质基因WSL3的克隆和功能分析第44-57页
    3.1 材料与方法第44-48页
        3.1.1 WSL3转基因载体的构建和遗传转化第44-46页
        3.1.2 WSL3及其同源蛋白的生物信息学分析第46页
        3.1.3 WSL3基因的表达模式分析第46-47页
        3.1.4 WSL3的亚细胞定位分析第47页
        3.1.5 WSL3对酵母突变体ybr159wΔ 的互补分析第47-48页
        3.1.6 WSL3的微粒体脂肪酸延伸活性分析第48页
    3.2 结果与分析第48-55页
        3.2.1 WSL3基因的互补验证第48-49页
        3.2.2 WSL3基因的生物信息学分析第49-51页
        3.2.3 WSL3基因的表达模式和GUS分析第51-52页
        3.2.4 WSL3的亚细胞定位第52页
        3.2.5 WSL3基因RNAi干扰实验第52-53页
        3.2.6 WSL3基因对酵母突变体ybr159wΔ 的互补分析第53-54页
        3.2.7 WSL3在酵母中的微粒体脂肪酸延伸活性分析第54-55页
    3.3 讨论第55-57页
第四章 水稻蜡质缺陷突变体wsl4的表型鉴定及精细定位第57-65页
    4.1 材料与方法第57-58页
        4.1.1 实验材料及种植第57页
        4.1.2 wsl4突变体的表型鉴定第57页
        4.1.3 扫描电镜 ((SEM)) 分析第57页
        4.1.4 透射电镜 ((TEM)) 分析第57页
        4.1.5 叶片表面蜡质组分的测定分析第57-58页
        4.1.6 叶片表面角质组分的测定分析第58页
        4.1.7 叶片离体失水率和叶绿素浸出率的测定第58页
        4.1.8 WSL4的图位克隆第58页
        4.1.9 候选基因的扩增和测序分析第58页
    4.2 结果与分析第58-64页
        4.2.1 wsl4突变体的表型特征第58-59页
        4.2.2 wsl4突变体的细胞壁及表面蜡质的细胞学观察第59-60页
        4.2.3 wsl4突变体叶片表面蜡质及角质组分的测定第60-61页
        4.2.4 wsl4突变体的表皮渗透性调查第61-62页
        4.2.5 WSL4基因的精细定位第62-63页
        4.2.6 58 kb定位区间内的基因预测第63-64页
    4.3 讨论第64-65页
第五章 水稻蜡质基因WSL4的克隆和功能分析第65-74页
    5.1 材料和方法第65-67页
        5.1.1 WSL4转基因载体的构建和遗传转化第65-66页
        5.1.2 WSL4及其同源蛋白的序列比对及聚类进化树构建第66页
        5.1.3 WSL4基因的表达模式分析第66页
        5.1.4 WSL4的亚细胞定位分析第66-67页
        5.1.5 WSL4的Crispr/Cas9突变体构建及拟南芥同源基因的异源表达分析第67页
    5.2 结果与分析第67-72页
        5.2.1 WSL4基因的互补验证第67-68页
        5.2.2 WSL4基因的生物信息学分析第68-69页
        5.2.3 WSL4基因的表达模式和GUS分析第69页
        5.2.4 WSL4的亚细胞定位第69-70页
        5.2.5 WSL4基因的RNAi干扰第70-71页
        5.2.6 WSL4的Crispr/Cas9突变体及拟南芥同源基因的异源表达分析第71-72页
    5.3 讨论第72-74页
第六章 全文总结第74-76页
    6.1 wsl3和wsl4突变体的蜡质积累异常第74页
    6.2 WSL3和WSL4基因编码FAE复合体蛋白,参与了超长链脂肪酸的延伸第74页
    6.3 WSL3和WSL4组成型表达且定位于内质网中第74页
    6.4 WSL3具有脂肪酸延伸酶活性第74-76页
参考文献第76-88页
附录第88-94页
致谢第94-95页
作者简介第95-96页

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