| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 实验材料 | 第14-20页 |
| 实验方法 | 第20-52页 |
| 1. 结核分枝杆菌TyrRS基因的获得 | 第20-21页 |
| 2. 重组克隆质粒的构建以及验证 | 第21-24页 |
| 3. 重组表达质粒的构建及验证 | 第24-26页 |
| 4. TyrRS蛋白的诱导表达 | 第26页 |
| 5. 蛋白的诱导表达条件的优化 | 第26-27页 |
| 6. 目的蛋白纯化 | 第27-31页 |
| 7. TyrRS酶活性测定 | 第31-33页 |
| 8. 耻垢分枝杆菌筛选模型建立 | 第33-34页 |
| 9. 酶筛选模型建立 | 第34-36页 |
| 10. 化合物的体外抗结核活性测定 | 第36-37页 |
| 11. 表面等离子共振实验 | 第37-38页 |
| 12. 过表达菌株敏感性变化验证化合物作用靶标 | 第38-42页 |
| 13. 利用Discovery Studio 4.0~(TM)软件进行分子对接 | 第42页 |
| 14. MTT方法检测阳性化合物对真核细胞毒性的影响 | 第42-43页 |
| 15. 化合物IMB-T130对一系列细菌抑制作用的测定 | 第43-44页 |
| 16. IMB-T130的急性毒性实验 | 第44页 |
| 17. IMB-T130的药代动力学实验 | 第44-45页 |
| 18. IMB-T130反向找靶 | 第45-46页 |
| 19. 结核分枝杆菌DHQS蛋白表达 | 第46-47页 |
| 20. DHQS蛋白测活体系的建立 | 第47-48页 |
| 21. IMB-T130对DHQS的抑制作用的测定 | 第48-49页 |
| 22. 高效液相色谱检测酶反应底物变化 | 第49-50页 |
| 23. 表面等离子共振实验证明IMB-T130与DHQS的结合 | 第50-52页 |
| 实验结果 | 第52-78页 |
| 1. 结核分枝杆菌TyrRS基因PCR结果 | 第52页 |
| 2. 重组克隆质粒构建与验证 | 第52页 |
| 3. 重组表达质粒的构建及验证 | 第52-53页 |
| 4. TyrRS蛋白表达条件的优化 | 第53-54页 |
| 5. TyrRS蛋白纯化 | 第54-56页 |
| 6. 酶活测定方法 | 第56页 |
| 7. 耻垢分枝杆菌筛选 | 第56-57页 |
| 8. 酶水平筛选模型条件优化 | 第57-59页 |
| 9. IMB-T130的抗结核活性测定 | 第59-60页 |
| 10. 表面等离子共振实验 | 第60-61页 |
| 11. 过表达菌株敏感性变化结果 | 第61-64页 |
| 12. Discovery Studio 4.0~(TM)软件系统进行分子对接结果 | 第64-65页 |
| 13. 化合物IMB-T130对人细胞毒性测定结果 | 第65页 |
| 14. 化合物IMB-T130对一系列细菌MIC的测定 | 第65-66页 |
| 15. 化合物IMB-T130的急性毒性和药代动力学实验结果 | 第66-67页 |
| 16. 化合物IMB-T130的反向找靶 | 第67-70页 |
| 17. 结核分枝杆菌DHQS蛋白表达 | 第70-73页 |
| 18. DHQS蛋白活性测定体系建立 | 第73-76页 |
| 19. 化合物IMB-T130对DHQS蛋白活性的抑制作用 | 第76页 |
| 20. 高效液相检测底物DAHP量的变化 | 第76-77页 |
| 21. SPR实验检测化合物IMB-T130与DHQS蛋白的相互作用 | 第77-78页 |
| 讨论 | 第78-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 创新点 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-90页 |
| 文献综述 | 第90-100页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 发表文章及参加会议 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 附录 | 第102-110页 |
