前言 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第1章 绪论 | 第17-29页 |
1.1 孢子丝菌病和申克孢子丝菌复合体 | 第17-19页 |
1.2 中国的孢子丝菌病简况 | 第19-22页 |
1.3 孢子丝菌病的致病机制和机体免疫应答研究现状 | 第22-26页 |
1.3.1 机体的抗孢子丝菌免疫 | 第23-26页 |
1.3.2 孢子丝菌的毒力因素及其免疫逃逸机制 | 第26页 |
1.4 孢子丝菌的毒力因子黑素 | 第26-29页 |
第2章 球形孢子丝菌白化突变株的诱导和致病性研究以及melanin ghost的提取和鉴定 | 第29-53页 |
2.1 引言 | 第29-31页 |
2.2 实验材料和试剂 | 第31-34页 |
2.2.1 主要仪器设备 | 第31-32页 |
2.2.2 主要试剂和配制方法 | 第32-34页 |
2.2.3 引物序列 | 第34页 |
2.3 实验方法 | 第34-38页 |
2.3.1 菌株 | 第34-36页 |
2.3.2 UV诱变和突变菌株的鉴定 | 第36-37页 |
2.3.3 野生株(MEL+)和突变株(MEL-)的致病力研究 | 第37-38页 |
2.3.4 Melanin ghost的制备和鉴定 | 第38页 |
2.3.5 统计分析 | 第38页 |
2.4 结果 | 第38-48页 |
2.4.1 菌株鉴定结果 | 第38-40页 |
2.4.2 最佳诱变条件的确定及突变白化菌株的鉴定 | 第40-43页 |
2.4.3 MEL-和MEL+菌株的致病性差异 | 第43-46页 |
2.4.4 Melanin ghost的制备和鉴定 | 第46-48页 |
2.5 讨论 | 第48-51页 |
2.6 总结 | 第51-53页 |
第3章 球形孢子丝菌黑素对小鼠巨噬细胞抗原呈递功能相关因子的影响 | 第53-69页 |
3.1 引言 | 第53-54页 |
3.2 实验材料和试剂 | 第54-57页 |
3.2.1 主要仪器设备 | 第54-55页 |
3.2.2 主要试剂和配制方法 | 第55-56页 |
3.2.3 引物序列 | 第56-57页 |
3.3 实验方法 | 第57-61页 |
3.3.1 小鼠腹腔巨噬细胞的制备 | 第57页 |
3.3.2 MEL-、MEL+菌株和melanin ghost的准备 | 第57-58页 |
3.3.3 巨噬细胞和MEL-、MEL+菌株以及melanin ghost的共培养 | 第58-59页 |
3.3.4 q PCR检测各组巨噬细胞胞浆内CIITA及其启动子表达水平 | 第59-60页 |
3.3.5 流式细胞仪检测细胞表面MHC class II、CD80、CD86的水平 | 第60-61页 |
3.3.6 小鼠感染模型中,MEL-和MEL+组腹腔巨噬细胞细胞表面MHC class II、CD80、CD86水平的差异 | 第61页 |
3.4 结果 | 第61-65页 |
3.4.1 吞噬MEL-和MEL+菌丝相分生孢子的巨噬细胞抗原呈递相关因子的表达差异 | 第61-63页 |
3.4.2 吞噬了MEL-和MEL+酵母相的巨噬细胞CIITA和MHC class II的表达差异 | 第63-65页 |
3.4.3 吞噬了melannin ghost的巨噬细胞MHC class II、CD80和CD86的表达变化 | 第65页 |
3.5 讨论 | 第65-68页 |
3.6 总结 | 第68-69页 |
第4章 球形孢子丝菌黑素对小鼠巨噬细胞NO和TNF-α 分泌的影响,以及对CD4+T细胞活化的影响 | 第69-83页 |
4.1 引言 | 第69-70页 |
4.2 实验材料和试剂 | 第70-72页 |
4.2.1 主要仪器设备 | 第70-71页 |
4.2.2 主要试剂和配制方法 | 第71-72页 |
4.3 实验方法 | 第72-76页 |
4.3.1 菌株、小鼠巨噬细胞和小鼠CD4+T淋巴细胞的制备 | 第73页 |
4.3.2 小鼠巨噬细胞和MEL-/MEL+菌株共培养 | 第73页 |
4.3.3 小鼠巨噬细胞与MEL-/MEL+菌株共培养 24h后巨噬细胞TNF-α 分泌的测定以及培养液中NO含量的测定 | 第73-74页 |
4.3.4 测定不同菌株(MEL+/MEL-)对小鼠巨噬细胞诱导CD4+T细胞活化的影响 | 第74-76页 |
4.3.5 统计分析 | 第76页 |
4.4 结果 | 第76-79页 |
4.4.1 与MEL-和MEL+菌株共培养后巨噬细胞分泌NO水平差异 | 第76-77页 |
4.4.2 与MEL-和MEL+菌株共培养后巨噬细胞TNF-α 表达情况 | 第77页 |
4.4.3 与MEL-和MEL+菌株共培养后的巨噬细胞诱导CD4+T细胞活化的差异 | 第77-79页 |
4.5 讨论 | 第79-80页 |
4.6 总结 | 第80-83页 |
第5章 球形孢子丝菌MEL-和MEL+菌株的蛋白质组学比对研究以及对未来工作的展望 | 第83-91页 |
5.1 引言 | 第83页 |
5.2 实验材料和试剂 | 第83-84页 |
5.2.1 主要仪器设备和耗材 | 第83页 |
5.2.2 主要试剂和配制方法 | 第83-84页 |
5.3 实验方法 | 第84-85页 |
5.3.1 球形孢子丝菌的蛋白质提取、酶解和标记 | 第84-85页 |
5.3.2 色谱质谱检测 | 第85页 |
5.3.3 蛋白搜库及分析 | 第85页 |
5.4 结果 | 第85-87页 |
5.5 讨论与未来研究展望 | 第87-89页 |
5.6 总结 | 第89-91页 |
第6章 结论 | 第91-93页 |
6.1 结论 | 第91页 |
6.2 本研究的创新点 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-105页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第105-107页 |
致谢 | 第107页 |