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球形孢子丝菌黑素对巨噬细胞抗原呈递及CD4+T细胞活化的影响及机制研究

前言第4-5页
中文摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第1章 绪论第17-29页
    1.1 孢子丝菌病和申克孢子丝菌复合体第17-19页
    1.2 中国的孢子丝菌病简况第19-22页
    1.3 孢子丝菌病的致病机制和机体免疫应答研究现状第22-26页
        1.3.1 机体的抗孢子丝菌免疫第23-26页
        1.3.2 孢子丝菌的毒力因素及其免疫逃逸机制第26页
    1.4 孢子丝菌的毒力因子黑素第26-29页
第2章 球形孢子丝菌白化突变株的诱导和致病性研究以及melanin ghost的提取和鉴定第29-53页
    2.1 引言第29-31页
    2.2 实验材料和试剂第31-34页
        2.2.1 主要仪器设备第31-32页
        2.2.2 主要试剂和配制方法第32-34页
        2.2.3 引物序列第34页
    2.3 实验方法第34-38页
        2.3.1 菌株第34-36页
        2.3.2 UV诱变和突变菌株的鉴定第36-37页
        2.3.3 野生株(MEL+)和突变株(MEL-)的致病力研究第37-38页
        2.3.4 Melanin ghost的制备和鉴定第38页
        2.3.5 统计分析第38页
    2.4 结果第38-48页
        2.4.1 菌株鉴定结果第38-40页
        2.4.2 最佳诱变条件的确定及突变白化菌株的鉴定第40-43页
        2.4.3 MEL-和MEL+菌株的致病性差异第43-46页
        2.4.4 Melanin ghost的制备和鉴定第46-48页
    2.5 讨论第48-51页
    2.6 总结第51-53页
第3章 球形孢子丝菌黑素对小鼠巨噬细胞抗原呈递功能相关因子的影响第53-69页
    3.1 引言第53-54页
    3.2 实验材料和试剂第54-57页
        3.2.1 主要仪器设备第54-55页
        3.2.2 主要试剂和配制方法第55-56页
        3.2.3 引物序列第56-57页
    3.3 实验方法第57-61页
        3.3.1 小鼠腹腔巨噬细胞的制备第57页
        3.3.2 MEL-、MEL+菌株和melanin ghost的准备第57-58页
        3.3.3 巨噬细胞和MEL-、MEL+菌株以及melanin ghost的共培养第58-59页
        3.3.4 q PCR检测各组巨噬细胞胞浆内CIITA及其启动子表达水平第59-60页
        3.3.5 流式细胞仪检测细胞表面MHC class II、CD80、CD86的水平第60-61页
        3.3.6 小鼠感染模型中,MEL-和MEL+组腹腔巨噬细胞细胞表面MHC class II、CD80、CD86水平的差异第61页
    3.4 结果第61-65页
        3.4.1 吞噬MEL-和MEL+菌丝相分生孢子的巨噬细胞抗原呈递相关因子的表达差异第61-63页
        3.4.2 吞噬了MEL-和MEL+酵母相的巨噬细胞CIITA和MHC class II的表达差异第63-65页
        3.4.3 吞噬了melannin ghost的巨噬细胞MHC class II、CD80和CD86的表达变化第65页
    3.5 讨论第65-68页
    3.6 总结第68-69页
第4章 球形孢子丝菌黑素对小鼠巨噬细胞NO和TNF-α 分泌的影响,以及对CD4+T细胞活化的影响第69-83页
    4.1 引言第69-70页
    4.2 实验材料和试剂第70-72页
        4.2.1 主要仪器设备第70-71页
        4.2.2 主要试剂和配制方法第71-72页
    4.3 实验方法第72-76页
        4.3.1 菌株、小鼠巨噬细胞和小鼠CD4+T淋巴细胞的制备第73页
        4.3.2 小鼠巨噬细胞和MEL-/MEL+菌株共培养第73页
        4.3.3 小鼠巨噬细胞与MEL-/MEL+菌株共培养 24h后巨噬细胞TNF-α 分泌的测定以及培养液中NO含量的测定第73-74页
        4.3.4 测定不同菌株(MEL+/MEL-)对小鼠巨噬细胞诱导CD4+T细胞活化的影响第74-76页
        4.3.5 统计分析第76页
    4.4 结果第76-79页
        4.4.1 与MEL-和MEL+菌株共培养后巨噬细胞分泌NO水平差异第76-77页
        4.4.2 与MEL-和MEL+菌株共培养后巨噬细胞TNF-α 表达情况第77页
        4.4.3 与MEL-和MEL+菌株共培养后的巨噬细胞诱导CD4+T细胞活化的差异第77-79页
    4.5 讨论第79-80页
    4.6 总结第80-83页
第5章 球形孢子丝菌MEL-和MEL+菌株的蛋白质组学比对研究以及对未来工作的展望第83-91页
    5.1 引言第83页
    5.2 实验材料和试剂第83-84页
        5.2.1 主要仪器设备和耗材第83页
        5.2.2 主要试剂和配制方法第83-84页
    5.3 实验方法第84-85页
        5.3.1 球形孢子丝菌的蛋白质提取、酶解和标记第84-85页
        5.3.2 色谱质谱检测第85页
        5.3.3 蛋白搜库及分析第85页
    5.4 结果第85-87页
    5.5 讨论与未来研究展望第87-89页
    5.6 总结第89-91页
第6章 结论第91-93页
    6.1 结论第91页
    6.2 本研究的创新点第91-93页
参考文献第93-105页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第105-107页
致谢第107页

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