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水稻粉质突变体ws和d92的基因克隆及突变机理研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语第12-13页
第一章 文献综述第13-27页
    1.1 水稻胚乳的发育及组成第13-14页
    1.2 淀粉的结构与形态第14-16页
    1.3 淀粉合成过程中的关键酶第16-19页
        1.3.1 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶第16-17页
        1.3.2 淀粉合酶第17-18页
        1.3.3 淀粉分支酶第18-19页
        1.3.4 淀粉脱分支酶第19页
    1.4 淀粉合成的调控第19-21页
    1.5 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶的研究进展第21页
    1.6 与淀粉合成相关的其他基因第21-22页
    1.7 淀粉合成与稻米品质的关联第22-24页
        1.7.1 稻米的外观品质第22-23页
        1.7.2 稻米的蒸煮和食味品质第23-24页
        1.7.3 稻米的加工品质、营养品质、安全品质第24页
    1.8 本研究的目的与意义第24-27页
第二章 材料与方法第27-39页
    2.1 材料来源及种植第27页
    2.2 千粒重测定及灌浆速率第27页
    2.3 成熟籽粒的的理化性质测定第27-28页
        2.3.1 总淀粉含量的测定第27页
        2.3.2 直链淀粉含量的测定第27-28页
        2.3.3 总脂肪含量的测定第28页
        2.3.4 总蛋白含量的测定第28页
        2.3.5 尿素膨胀分析第28页
    2.4 成熟种子横断面的扫描电镜观察第28-29页
    2.5 胚乳半薄切片观察第29页
    2.6 极端个体的DNA提取及基因的图位克隆第29-31页
        2.6.1 极端个体的挑选第29页
        2.6.2 PCR扩增体系第29-30页
        2.6.3 PCR反应程序第30页
        2.6.4 聚丙烯酰氨凝胶电泳第30-31页
        2.6.5 标记的筛选及基因定位第31页
    2.7 RNA的提取及Real-time RT-PCR第31-33页
        2.7.1 RNA的提取第31-32页
        2.7.2 RT-PCR步骤第32页
        2.7.3 Real-time PCR步骤第32-33页
    2.8 蛋白western-blot分析第33-34页
    2.9 酶活测定第34页
    2.10 转基因互补实验第34-35页
    2.11 亚细胞定位实验第35-36页
    2.12 酶谱分析第36-39页
第三章 ws突变体的基因克隆及突变机理研究第39-49页
    3.1 ws突变体表型及农艺性状分析第39-40页
    3.2 ws突变体成熟籽粒的理化性质分析第40-41页
    3.3 ws突变体成熟种子的扫描电镜观察第41-42页
    3.4 ws突变体胚乳发育过程中淀粉结构的半薄切片观察第42-44页
    3.5 WS基因的图位克隆第44-45页
    3.6 ws突变体及野生型中的相关基因表达及酶活分析第45-46页
    3.7 讨论第46-49页
        3.7.1 ws突变体的胚乳中淀粉合成出现异常第46-47页
        3.7.2 ws突变体具有新的突变位点第47页
        3.7.3 胚乳的淀粉合成中AGPase大小亚基的功能与关系第47-48页
        3.7.4 AGPase对植株生长可能有其它影响第48-49页
第四章 d92突变体的基因克隆及突变机理研究第49-61页
    4.1 d92突变体的表型及农艺性状分析第49-50页
    4.2 d92突变体成熟籽粒的理化性质分析第50-51页
    4.3 d92突变体成熟种子扫描电镜观察第51-52页
    4.4 d92突变体胚乳发育过程中淀粉结构的半薄切片观察第52-53页
    4.5 d92突变基因的图位克隆第53-55页
    4.6 d92突变体及野生型中相关基因表达分析第55-57页
    4.7 d92突变体及野生型中蛋白表达分析及酶活性分析第57-58页
    4.8 讨论第58-61页
        4.8.1 d92突变体的胚乳中淀粉合成出现异常,且具有新的突变位点第58-59页
        4.8.2 UGPase对植物生长具有多方面影响第59-61页
第五章 本研究创新及不足之处第61-63页
参考文献第63-73页
附录第73-81页
致谢第81页

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