| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1.文献综述 | 第9-16页 |
| 1.1 植物防御系统 | 第9页 |
| 1.2 家蚕对桑叶生物碱的抵抗作用 | 第9-10页 |
| 1.3 β-呋喃果糖苷酶 | 第10-13页 |
| 1.3.1 β-呋喃果糖苷酶的功能 | 第10-11页 |
| 1.3.2 β-呋喃果糖苷酶的结构 | 第11-12页 |
| 1.3.3 昆虫 β-呋喃果糖苷酶 | 第12-13页 |
| 1.4 Bac-to-Bac杆状病毒昆虫表达系统 | 第13-15页 |
| 1.5 重叠延伸PCR介导的定点突变 | 第15-16页 |
| 2.引言 | 第16-18页 |
| 2.1 研究意义与目的 | 第16页 |
| 2.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 2.3 技术路线 | 第17-18页 |
| 3.材料与方法 | 第18-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第18页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第18-23页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第18-19页 |
| 3.2.2 主要生化试剂 | 第19页 |
| 3.2.3 常用试剂配制 | 第19-23页 |
| 3.3 实验所用引物 | 第23-24页 |
| 3.4 实验方法 | 第24-33页 |
| 3.4.1 BmSUC1活性位点的预测 | 第24页 |
| 3.4.2 GFP-pFastBac Dual重组载体的构建 | 第24-25页 |
| 3.4.3 BmSuc1突变型的克隆 | 第25-27页 |
| 3.4.4 BmNPV重组杆粒（Bacmid）的获得 | 第27-28页 |
| 3.4.5 重组蛋白的体外表达与纯化 | 第28-30页 |
| 3.4.6 重组蛋白的活性测定 | 第30-31页 |
| 3.4.7 BmSUC1和D181A酶活动力学分析 | 第31页 |
| 3.4.8 BmSUC1和D181A反应产物的HPLC分析 | 第31-33页 |
| 4.结果与分析 | 第33-44页 |
| 4.1 BmSUC1同源性分析及活性位点的预测 | 第33-34页 |
| 4.2 GFP pFastBac Dual重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| 4.3 野生型和突变型BmSUC1- pFastBac Dual重组表达质粒的构建 | 第35页 |
| 4.4 BmNPV重组杆粒的制备 | 第35-36页 |
| 4.5 重组蛋白的表达与鉴定 | 第36-37页 |
| 4.6 重组蛋白的纯化和纯度检测 | 第37-38页 |
| 4.7 重组蛋白的活性检测 | 第38-40页 |
| 4.8 BmSUC1和D181A酶活动力学分析 | 第40-42页 |
| 4.9 BmSUC1和D181A酶促反应产物的HPLC分析 | 第42-44页 |
| 5.讨论 | 第44-47页 |
| 5.1 BmSUC1可能是分泌蛋白 | 第44页 |
| 5.2 β-FFase的果糖基转移酶活性 | 第44-45页 |
| 5.3 BmSUC1的结构预测及突变型的活性变化 | 第45-47页 |
| 6.结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
