| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 锌指蛋白简述 | 第9页 |
| 1.2 锌指蛋白的分类 | 第9-11页 |
| 1.2.1 C_2H_2型锌指 | 第10页 |
| 1.2.2 C_4型锌指 | 第10页 |
| 1.2.3 C_6型锌指 | 第10页 |
| 1.2.4 LIM型锌指 | 第10-11页 |
| 1.2.5 C_3HC_4锌指 | 第11页 |
| 1.3 锌指蛋白与核酸和蛋白质的相互作用 | 第11-12页 |
| 1.3.1 与DNA的相互作用 | 第11页 |
| 1.3.2 与RNA的相互作用 | 第11-12页 |
| 1.3.3 与DNA:RNA杂交双链的特异性作用 | 第12页 |
| 1.3.4 与蛋白质的作用 | 第12页 |
| 1.4 锌指蛋白的生物学功能 | 第12页 |
| 1.5 家蚕丝腺组织及其生理功能 | 第12-14页 |
| 1.5.1 家蚕丝素蛋白基因的结构 | 第12-13页 |
| 1.5.2 家蚕丝素蛋白基因的转录调控研究进展 | 第13-14页 |
| 2 引言 | 第14-17页 |
| 2.1 研究的目的及意义 | 第14页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第14-16页 |
| 2.2.1 BmZFP16-like基因cDNA序列的克隆及生物信息学分析 | 第14-15页 |
| 2.2.2 BmZFP16-like基因的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第15页 |
| 2.2.3 家蚕BmZFP16-like组织表达分布 | 第15页 |
| 2.2.4 不同发育时期家蚕丝腺组织的BmZFP16-like的表达分析 | 第15页 |
| 2.2.5 P50和H9丝腺组织的BmZFP16-like的表达分析 | 第15-16页 |
| 2.3 技术路线 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-31页 |
| 3.1 实验材料 | 第17页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第17-21页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第17页 |
| 3.2.2 主要生化试剂 | 第17-18页 |
| 3.2.3 常用溶液的配制 | 第18-21页 |
| 3.3 实验方法 | 第21-31页 |
| 3.3.1 家蚕的饲养 | 第21页 |
| 3.3.2 家蚕组织的收集 | 第21页 |
| 3.3.3 家蚕总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 3.3.4 提取的总RNA的质量检测 | 第22页 |
| 3.3.5 家蚕BmZFP16-like基因cDNA的克隆 | 第22-25页 |
| 3.3.6 家蚕BmZFP16-like基因的原核表达 | 第25-27页 |
| 3.3.7 重组蛋白的检测 | 第27页 |
| 3.3.8 重组蛋白的纯化及多克隆抗体制备 | 第27-29页 |
| 3.3.9 半定量RT-PCR | 第29页 |
| 3.3.10 实时定量PCR | 第29-30页 |
| 3.3.11 组织中总蛋白的提取 | 第30页 |
| 3.3.12 组织表达分布 | 第30页 |
| 3.3.13 不同发育时期家蚕丝腺组织的BmZFP16-like的表达分析 | 第30页 |
| 3.3.14 P50和H9品种丝腺中的BmZFP16-like的表达分析 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-43页 |
| 4.1 家蚕脂肪体总RNA的提取 | 第31页 |
| 4.2 家蚕BmZFP16-like基因的cDNA序列扩增 | 第31-32页 |
| 4.3 家蚕BmZFP16-like基因的生物信息学分析 | 第32-36页 |
| 4.3.1 家蚕Bm ZFP16-like基因ORF序列分析 | 第32页 |
| 4.3.2 家蚕Bm ZFP16-like基因分子特征分析 | 第32-34页 |
| 4.3.3 家蚕BmZFP16-like氨基酸同源性与系统进化树的分析 | 第34-36页 |
| 4.4 家蚕BmZFP16-like原核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 4.5 BmZFP16-like的原核表达 | 第37-38页 |
| 4.5.1 不同浓度IPTG诱导的原核表达 | 第37页 |
| 4.5.2 Western blot检测 | 第37-38页 |
| 4.6 BL21-PET28a-BmZFP16-like表达形式的确定 | 第38页 |
| 4.7 家蚕BmZFP16-like蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| 4.8 ELISA效价检测 | 第39页 |
| 4.9 不同组织RT-PCR分析 | 第39-40页 |
| 4.10 家蚕BmZFP16-like组织表达分布 | 第40-41页 |
| 4.11 不同发育时期家蚕丝腺组织的BmZFP16-like的表达 | 第41-42页 |
| 4.12 P50和H9品种丝腺中的BmZFP16-like的表达 | 第42-43页 |
| 5 讨论 | 第43-45页 |
| 5.1 家蚕BmZFP16-like的分子进化 | 第43页 |
| 5.2 家蚕BmZFP16-like时空特异性表达 | 第43-44页 |
| 5.3 家蚕BmZFP16-like对丝腺基因的转录调控 | 第44页 |
| 5.4 家蚕BmZFP16-like其它功能 | 第44-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简介 | 第51页 |
| 在研期间发表论文 | 第51页 |
