| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 本研究所用仪器设备及试剂 | 第7-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-21页 |
| 1.1 性别决定与性别分化 | 第10-11页 |
| 1.2 雌雄同体与性逆转现象 | 第11-12页 |
| 1.3 性别调控相关基因的研究现状 | 第12-19页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 Hs-Dmrt1基因cDNA的克隆及分子特征分析 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-33页 |
| 2.3.1 RNA检测结果 | 第27页 |
| 2.3.2 Hs-Dmrt1基因cDNA全长克隆 | 第27-28页 |
| 2.3.3 Hs-Dmrt1基因全长核酸序列分析 | 第28-29页 |
| 2.3.4 Hs-Dmrt1基因ORF框氨基酸组成及亲疏水性分析 | 第29-30页 |
| 2.3.5 Hs-Dmrt1蛋白跨膜结构域分析 | 第30页 |
| 2.3.6 Hs-Dmrt1蛋白亚细胞定位预测 | 第30-31页 |
| 2.3.7 Hs-Dmrt1蛋白的高级结构预测 | 第31-32页 |
| 2.3.8 系统进化树的构建 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 Hs-Dmrt1在不同组织和不同年龄雌雄性性腺内的表达分析 | 第35-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.3 实验结果 | 第37-41页 |
| 3.3.1 Hs-Dmrt1基因在不同组织间的表达差异 | 第37-39页 |
| 3.3.2 Hs-Dmrt1基因在不同年龄雌雄性腺间的表达差异 | 第39-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 Hs-Dmrt1蛋白原核表达及免疫荧光定位分析 | 第43-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-50页 |
| 4.3 实验结果 | 第50-57页 |
| 4.3.1 目的片段PCR扩增 | 第50-51页 |
| 4.3.2 重组质粒的构建 | 第51-52页 |
| 4.3.3 融合蛋白的诱导表达 | 第52页 |
| 4.3.4 融合蛋白的纯化及浓度测定 | 第52-54页 |
| 4.3.5 ELISA间接法测定多克隆抗血清效价 | 第54-55页 |
| 4.3.6 抗体特异性分析 | 第55-56页 |
| 4.3.7 Hs-Dmrt1免疫荧光定位 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 Hs-Dmrt1基因侧翼序列的克隆及分析 | 第59-74页 |
| 5.1 实验材料 | 第59页 |
| 5.2 实验方法 | 第59-65页 |
| 5.3 实验结果 | 第65-71页 |
| 5.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测池蝶蚌基因组DNA的质量 | 第65页 |
| 5.3.2 DNA的纯度的检测及DNA文库建立 | 第65-67页 |
| 5.3.3 Genome Walker PCR法步移 | 第67-68页 |
| 5.3.4 Hs-Dmrt1基因组 5’侧翼序列的分析 | 第68-71页 |
| 5.4 讨论 | 第71-74页 |
| 第六章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第84页 |
