| 中文摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 缩略语词汇表 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-35页 |
| 1.1 肿瘤及其常规治疗方法 | 第18-19页 |
| 1.2 细胞程序性死亡 | 第19-26页 |
| 1.2.1 细胞凋亡 | 第20-22页 |
| 1.2.2 细胞自噬 | 第22-24页 |
| 1.2.3 细胞坏死 | 第24-25页 |
| 1.2.4 细胞凋亡与细胞自噬的关系 | 第25页 |
| 1.2.5 细胞凋亡与细胞坏死的区别 | 第25-26页 |
| 1.3 活性氧(reactive oxygen species,ROS) | 第26-27页 |
| 1.4 自噬的分子调控 | 第27-30页 |
| 1.4.1 微管结合蛋白-1轻链-3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3) | 第28-29页 |
| 1.4.2 Beclin1 | 第29-30页 |
| 1.5 凋亡的分子调控 | 第30-32页 |
| 1.5.1 Bcl-2与Bax | 第30-31页 |
| 1.5.2 NF-κB与IκB | 第31-32页 |
| 1.6 p53与细胞凋亡 | 第32-33页 |
| 1.7 BMA-155(Bisindolylmaleimide alkaloid-155) | 第33-35页 |
| 第二章 BMA-155诱导人肝癌细胞自噬及凋亡的形态学研究 | 第35-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第35-36页 |
| 2.1.2 化合物 | 第36页 |
| 2.1.3 试剂 | 第36页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第36-37页 |
| 2.1.5 仪器 | 第37页 |
| 2.2 试验方法 | 第37-40页 |
| 2.2.1 细胞复苏及培养 | 第37-38页 |
| 2.2.2 MTT法检测BMA-155的细胞毒性 | 第38页 |
| 2.2.3 细胞自噬的形态学观察 | 第38-39页 |
| 2.2.4 MDC染色 | 第39页 |
| 2.2.5 DAPI染色 | 第39页 |
| 2.2.6 FITC-Annexin V/PI双染定量检测细胞凋亡 | 第39-40页 |
| 2.2.7 DCFH-DA染色检测ROS水平 | 第40页 |
| 2.2.8 数据分析 | 第40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-51页 |
| 2.3.1 MTT检测结果 | 第40-43页 |
| 2.3.2 显微镜下观察细胞的形态学变化 | 第43-45页 |
| 2.3.3 MDC染色 | 第45-47页 |
| 2.3.4 DAPI染色 | 第47-48页 |
| 2.3.5 BMA-155诱导细胞凋亡,抑制自噬会增强细胞凋亡 | 第48-49页 |
| 2.3.6 BMA-155诱导HepG-2细胞内ROS水平升高 | 第49-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 BMA-155诱导人肝癌细胞HepG-2自噬及凋亡的分子生物学研究 | 第53-72页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第53页 |
| 3.1.2 化合物 | 第53-54页 |
| 3.1.3 试剂 | 第54页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第54-55页 |
| 3.1.5 仪器 | 第55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-61页 |
| 3.2.1 细胞复苏及培养 | 第55-56页 |
| 3.2.2 免疫荧光染色 | 第56页 |
| 3.2.3 RNA提取及实时定量PCR检测 | 第56-57页 |
| 3.2.4 Western blot蛋白印迹 | 第57-60页 |
| 3.2.5 BMA-155在体内对肝癌细胞的抑制作用 | 第60页 |
| 3.2.6 HE染色 | 第60页 |
| 3.2.7 免疫组化染色 | 第60-61页 |
| 3.2.8 数据分析 | 第61页 |
| 3.3 实验结果 | 第61-69页 |
| 3.3.1 BMA-155诱导的HepG-2细胞内LC3累积 | 第61-62页 |
| 3.3.2 BMA-155在体外促进NF-κB,p53,Beclin-1和Bax等基因的表达 | 第62-63页 |
| 3.3.3 BMA-155体外调控自噬及凋亡相关蛋白的表达 | 第63-65页 |
| 3.3.4 BMA-155体外增强NF-κB/p65、p53、p-p53等信号蛋白的表达 | 第65-66页 |
| 3.3.5 BMA-155在体内的细胞毒作用 | 第66-68页 |
| 3.3.6 BMA-155能够引起体内肿瘤组织坏死 | 第68页 |
| 3.3.7 BMA-155诱导体内自噬及凋亡相关蛋白的变化 | 第68-69页 |
| 3.4 讨论 | 第69-72页 |
| 创新与展望 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第85-86页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第86页 |
