| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 1.1 水稻白叶枯病菌概述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 水稻白叶枯病原菌及侵染情况 | 第11页 |
| 1.1.2 水稻白叶枯病菌致病因子 | 第11-12页 |
| 1.2 c-di-GMP信号调控机制 | 第12-15页 |
| 1.2.1 细菌第二信使c-di-GMP | 第12-13页 |
| 1.2.3 c-di-GMP受体蛋白 | 第13-15页 |
| 1.3 细菌趋化性 | 第15页 |
| 1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第15-17页 |
| 1.4.1 目的意义 | 第15-16页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 che基因启动子的表达及受调控情况 | 第17-26页 |
| 2.1 试验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂、仪器 | 第17页 |
| 2.1.3 培养基、菌株培养条件 | 第17-18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-19页 |
| 2.2.1 5’RACE确定che基因转录起始位点 | 第18-19页 |
| 2.2.1.1 5’RACE引物设计 | 第18页 |
| 2.2.1.2 Xoo 细菌总 RNA 提取 | 第18页 |
| 2.2.1.3 目的片段 5RACE-che 的获得和纯化 | 第18页 |
| 2.2.1.4 5’RACE-che 克隆载体构建与测序 | 第18页 |
| 2.2.1.5 测序结果序列比对以及生物信息学分析 | 第18-19页 |
| 2.2.2 基于报告基因 GFP 的启动子活性检测体系构建 | 第19页 |
| 2.2.3 野生型菌株PXO99A、Δclp、ΔhrpX、ΔhrpG感受态细胞制备 | 第19页 |
| 2.2.4 对che基因启动子活性的检测 | 第19页 |
| 2.3 结果与分析 | 第19-24页 |
| 2.3.1 5’RACE扩增目的片段及che基因转录起始位点确定 | 第19-20页 |
| 2.3.2 che基因启动子区域PCR扩增和pPche载体构建 | 第20-21页 |
| 2.3.3 FACS检测che基因在野生型PXO99A和 Δclp中启动子活性 | 第21-24页 |
| 2.4 本章小结 | 第24-26页 |
| 第三章 水稻白叶枯病菌c-di-GMP受体蛋白Clpxoo关键功能位点的确定 | 第26-32页 |
| 3.1 材料和方法 | 第26页 |
| 3.1.1 供试菌株、质粒及培养条件 | 第26页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第26页 |
| 3.2 试验方法 | 第26-28页 |
| 3.2.1 Clpxoo点突变蛋白构建 | 第26-27页 |
| 3.2.3 重组表达载体的构建和转化 | 第27页 |
| 3.2.4 蛋白表达、纯化和验证 | 第27-28页 |
| 3.2.5 ITC实验 | 第28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-30页 |
| 3.3.1 Clpxoo蛋白定点突变、原核表达和产物纯化 | 第28-29页 |
| 3.3.2 Clpxoo和点突变蛋白与c-di-GMP结合检测 | 第29-30页 |
| 3.4 本章小结 | 第30-32页 |
| 第四章 水稻白叶枯病菌趋化性基因che功能研究 | 第32-38页 |
| 4.1 试验材料 | 第32-33页 |
| 4.1.1 菌株、质粒和引物 | 第32页 |
| 4.1.2 主要试剂、仪器 | 第32页 |
| 4.1.3 培养基、菌株及植物培养条件 | 第32-33页 |
| 4.2 试验方法 | 第33-34页 |
| 4.2.1 趋化性基因che突变体及互补菌株构建 | 第33页 |
| 4.2.2 突变体表型分析 | 第33-34页 |
| 4.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 4.3.1 突变体 Δche和互补菌株构建 | 第34-35页 |
| 4.3.2 致病性分析 | 第35-36页 |
| 4.3.3 对H_2O_2敏感性分析 | 第36页 |
| 4.3.4 运动性分析 | 第36-37页 |
| 4.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第五章 全文结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 附录 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
