| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 烟草普通花叶病毒概述 | 第12页 |
| 1.2 自噬分子机制 | 第12-14页 |
| 1.3 自噬检测方法 | 第14-15页 |
| 1.3.1 透射电镜技术 | 第14页 |
| 1.3.2 荧光染料染色技术 | 第14-15页 |
| 1.3.3 特异性蛋白标记自噬体膜 | 第15页 |
| 1.3.4 自噬相关基因转录水平检测 | 第15页 |
| 1.4 自噬的生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.4.1 自噬在生物胁迫中的功能 | 第15-16页 |
| 1.4.2 自噬在非生物胁迫中的功能 | 第16页 |
| 1.5 细胞自噬与病毒侵染 | 第16-17页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第17页 |
| 1.7 技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 TMV侵染烟草与细胞自噬 | 第18-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 供试烟草及TMV毒源 | 第18页 |
| 2.1.2 质粒和菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 工具酶和主要试剂盒 | 第19页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 TMV的提纯 | 第20页 |
| 2.2.2 电镜观察提纯的TMV和紫外分光光度计计算病毒浓度 | 第20页 |
| 2.2.3 透射电子显微镜观察TMV侵染烟草后的烟草叶片 | 第20-21页 |
| 2.2.4 MDC染色 | 第21页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR检测自噬基因表达 | 第21-24页 |
| 2.2.6 ATG8f- ECFP表达载体的构建 | 第24-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-37页 |
| 2.3.1 透射电镜观察提纯的TMV形态和紫外分光光度计计算病毒浓度 | 第29-30页 |
| 2.3.2 透射电镜观察TMV侵染后的烟草叶片 | 第30-31页 |
| 2.3.3 MDC染色观察TMV侵染后的烟草叶片 | 第31-33页 |
| 2.3.4 荧光定量PCR检测基因表达量 | 第33-37页 |
| 2.3.5 激光共聚焦显微镜观察ATG8f- ECFP | 第37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 细胞自噬对TMV复制的调控研究 | 第39-49页 |
| 3.1 试验材料 | 第39页 |
| 3.1.1 供试寄主 | 第39页 |
| 3.1.2 菌株与质粒 | 第39页 |
| 3.1.3 工具酶和主要试剂盒 | 第39页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 构建TMV-GFP侵染烟草模型 | 第39-41页 |
| 3.2.2 构建VIGS载体 | 第41-43页 |
| 3.3 试验结果 | 第43-48页 |
| 3.3.1 TMV-GFP侵染体系的建立 | 第43-44页 |
| 3.3.2 沉默植株的TMV含量升高 | 第44-45页 |
| 3.3.3 沉默效率检测 | 第45-46页 |
| 3.3.4 沉默植株的TMV-GFP含量升高 | 第46-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
