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鸭源cathelicidin的分子克隆及体外生物学功能研究

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第11-21页
    1.1 抗菌肽的研究进展第11-14页
        1.1.1 抗菌肽的概述第11-12页
        1.1.2 抗菌肽的分类第12页
        1.1.3 抗菌肽的生物学功能第12-13页
        1.1.4 抑菌机制第13页
        1.1.5 抗菌肽的应用前景第13-14页
    1.2 Cathelicdin类抗菌肽的研究进展第14-19页
        1.2.1Cathelicidins的结构特点第14-15页
        1.2.2 Cathelicidins的表达与合成调控第15-16页
        1.2.3 Cathelicidins的生物学功能第16-17页
        1.2.4 Cathelicidins在医疗保健中的应用前景第17页
        1.2.5 禽cathelicidins的研究进展第17-19页
    1.3 研究目的意义与研究内容第19-21页
        1.3.1 研究目的与意义第19页
        1.3.2 研究内容第19-21页
2 材料与方法第21-34页
    2.1 鸭源肽的基因克隆第21-26页
        2.1.1 材料第21-22页
        2.1.2 组织总RNA的提取第22-23页
        2.1.3 cDNA文库的构建第23页
        2.1.4 聚合酶链式反应(PCR)第23-24页
        2.1.5 PCR产物的回收第24页
        2.1.6 PCR产物与T载体连接第24页
        2.1.7 连着产物的转化第24-25页
        2.1.8 PCR鉴定阳性重组子第25页
        2.1.9 3'RACE巢氏PCR反应体系第25-26页
    2.2 鸭子抗菌肽的鉴定及结构分析第26-27页
        2.2.1 鸭源cathelicidin成熟肽(dCATH)的预测第26页
        2.2.2 鸭cathelicidin进化树分析第26-27页
    2.3 dCATH 的生物学活性与二级结构第27-30页
        2.3.1 材料第27-28页
        2.3.2 肽的合成与溶解第28页
        2.3.3 抑菌活性测定第28页
        2.3.4 溶血活性测定第28-29页
        2.3.5 细胞毒性测定第29页
        2.3.6 稳定性第29-30页
        2.3.7 圆二色光谱(CD)第30页
    2.4 抗菌肽的抑菌机理第30-33页
        2.4.1 材料第30-31页
        2.4.2 细胞膜的完整性与通透性第31-32页
        2.4.3 扫描电子显微镜的观察第32页
        2.4.4 透射电子显微镜观察第32-33页
    2.5 数据分析第33-34页
3 结果与分析第34-45页
    3.1 鸭源肽的克隆第34-38页
        3.1.1 RNA与PCR产物质量检测第34-35页
        3.1.2 测序结果分析及功能序列的确立第35-36页
        3.1.3 dCTAH的同源性与进化树分析第36-38页
    3.2 肽的活性与二级结构第38-41页
        3.2.1 抑菌活性第38页
        3.2.2 肽的溶血与细胞毒性第38-39页
        3.2.3 稳定性第39-41页
        3.2.4 dCATH的二级结构分析第41页
    3.3 作用机理第41-45页
        3.3.1 外膜通透性测定第41-42页
        3.3.2 内膜通透性与内膜去极化第42-43页
        3.3.3 扫描与透射第43-45页
4 讨论第45-50页
    4.1 dCATH序列的确立及进化分析第45-46页
    4.2 dCATH的生物学活性与结构第46-48页
        4.2.1 抑菌活性第46页
        4.2.2 肽结构第46页
        4.2.3 肽的毒性第46-47页
        4.2.4 稳定性第47-48页
    4.3 作用机理第48-50页
        4.3.1 膜的通透性与去极化第48页
        4.3.2 电镜观察第48-50页
5 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-60页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第60页

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