摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-21页 |
1.1 抗菌肽的研究进展 | 第11-14页 |
1.1.1 抗菌肽的概述 | 第11-12页 |
1.1.2 抗菌肽的分类 | 第12页 |
1.1.3 抗菌肽的生物学功能 | 第12-13页 |
1.1.4 抑菌机制 | 第13页 |
1.1.5 抗菌肽的应用前景 | 第13-14页 |
1.2 Cathelicdin类抗菌肽的研究进展 | 第14-19页 |
1.2.1Cathelicidins的结构特点 | 第14-15页 |
1.2.2 Cathelicidins的表达与合成调控 | 第15-16页 |
1.2.3 Cathelicidins的生物学功能 | 第16-17页 |
1.2.4 Cathelicidins在医疗保健中的应用前景 | 第17页 |
1.2.5 禽cathelicidins的研究进展 | 第17-19页 |
1.3 研究目的意义与研究内容 | 第19-21页 |
1.3.1 研究目的与意义 | 第19页 |
1.3.2 研究内容 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-34页 |
2.1 鸭源肽的基因克隆 | 第21-26页 |
2.1.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.2 组织总RNA的提取 | 第22-23页 |
2.1.3 cDNA文库的构建 | 第23页 |
2.1.4 聚合酶链式反应(PCR) | 第23-24页 |
2.1.5 PCR产物的回收 | 第24页 |
2.1.6 PCR产物与T载体连接 | 第24页 |
2.1.7 连着产物的转化 | 第24-25页 |
2.1.8 PCR鉴定阳性重组子 | 第25页 |
2.1.9 3'RACE巢氏PCR反应体系 | 第25-26页 |
2.2 鸭子抗菌肽的鉴定及结构分析 | 第26-27页 |
2.2.1 鸭源cathelicidin成熟肽(dCATH)的预测 | 第26页 |
2.2.2 鸭cathelicidin进化树分析 | 第26-27页 |
2.3 dCATH 的生物学活性与二级结构 | 第27-30页 |
2.3.1 材料 | 第27-28页 |
2.3.2 肽的合成与溶解 | 第28页 |
2.3.3 抑菌活性测定 | 第28页 |
2.3.4 溶血活性测定 | 第28-29页 |
2.3.5 细胞毒性测定 | 第29页 |
2.3.6 稳定性 | 第29-30页 |
2.3.7 圆二色光谱(CD) | 第30页 |
2.4 抗菌肽的抑菌机理 | 第30-33页 |
2.4.1 材料 | 第30-31页 |
2.4.2 细胞膜的完整性与通透性 | 第31-32页 |
2.4.3 扫描电子显微镜的观察 | 第32页 |
2.4.4 透射电子显微镜观察 | 第32-33页 |
2.5 数据分析 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-45页 |
3.1 鸭源肽的克隆 | 第34-38页 |
3.1.1 RNA与PCR产物质量检测 | 第34-35页 |
3.1.2 测序结果分析及功能序列的确立 | 第35-36页 |
3.1.3 dCTAH的同源性与进化树分析 | 第36-38页 |
3.2 肽的活性与二级结构 | 第38-41页 |
3.2.1 抑菌活性 | 第38页 |
3.2.2 肽的溶血与细胞毒性 | 第38-39页 |
3.2.3 稳定性 | 第39-41页 |
3.2.4 dCATH的二级结构分析 | 第41页 |
3.3 作用机理 | 第41-45页 |
3.3.1 外膜通透性测定 | 第41-42页 |
3.3.2 内膜通透性与内膜去极化 | 第42-43页 |
3.3.3 扫描与透射 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-50页 |
4.1 dCATH序列的确立及进化分析 | 第45-46页 |
4.2 dCATH的生物学活性与结构 | 第46-48页 |
4.2.1 抑菌活性 | 第46页 |
4.2.2 肽结构 | 第46页 |
4.2.3 肽的毒性 | 第46-47页 |
4.2.4 稳定性 | 第47-48页 |
4.3 作用机理 | 第48-50页 |
4.3.1 膜的通透性与去极化 | 第48页 |
4.3.2 电镜观察 | 第48-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |