摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
符号说明 | 第9-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1. H1N1亚型猪流感病毒分子生物学基础 | 第14-19页 |
1.1 猪流感病毒形态 | 第14-15页 |
1.2 流感病毒分类 | 第15-16页 |
1.3 甲型H1N1流感病毒的基因组结构与功能 | 第16-19页 |
1.3.1 血凝素(Hemagglutinin,HA) | 第16页 |
1.3.2 神经氨酸酶(Neuraminidase,NA) | 第16-17页 |
1.3.3 基质蛋白(Matrix protein,MA) | 第17页 |
1.3.4 非结构蛋白(Nonstructural Protein,NS) | 第17-18页 |
1.3.5 核蛋白(Nucleoprotein,NP) | 第18页 |
1.3.6 聚合酶蛋白(Polymerse,P) | 第18-19页 |
2. H1N1亚型猪流感病毒(swine influenza virus)流行病学 | 第19-23页 |
2.1 | 第19-22页 |
2.1.1 古典型H1N1猪流感(classical swine H1N1 virus)流行病学 | 第19-20页 |
2.1.2 类禽型H1N1猪流感(avain-like swine H1N1 virus)流行病学 | 第20-21页 |
2.1.3 类人型H1N1猪流感(human-like swine H1N1 virus)流行病学 | 第21-22页 |
2.2 2009甲型H1N1流感病毒流行病学 | 第22-23页 |
2.2.1 2009甲型H1N1流感病毒的起源 | 第22-23页 |
2.2.2 我国猪群中2009甲型H1N1流感病毒的流行状况 | 第23页 |
3. H1N1型猪流感的公共卫生学意义 | 第23-25页 |
3.1 H1N1亚型猪流感的兽医公共卫生意义 | 第24页 |
3.2 H1N1亚型猪流感的人类公共卫生意义 | 第24-25页 |
4. 本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
第二章 研究内容 | 第26-39页 |
实验一 猪源2009甲型H1N1流感病毒的分离鉴定与进化分析 | 第26-35页 |
1.1 前言 | 第26页 |
1.2 实验材料 | 第26-28页 |
1.2.1 样品来源与处理 | 第26-27页 |
1.2.2 标准抗原及阳性血清 | 第27页 |
1.2.3 SPF鸡胚 | 第27页 |
1.2.4 红细胞 | 第27页 |
1.2.5 主要试剂 | 第27页 |
1.2.6 主要实验仪器 | 第27-28页 |
1.3 实验方法 | 第28-35页 |
1.3.1 实验的技术路线 | 第28页 |
1.3.2 病毒的分离与初步鉴定 | 第28-29页 |
1.3.3 血凝实验(HA) | 第29页 |
1.3.4 病毒的鸡胚克隆纯化 | 第29页 |
1.3.5 病毒亚型血凝抑制试验(HI)的鉴定 | 第29页 |
1.3.6 PCR对病毒亚型的鉴定 | 第29页 |
1.3.7 病毒RNA的提取、RT-PCR、克隆及测序 | 第29-34页 |
1.3.8 序列分析 | 第34-35页 |
实验二 猪源2009甲型H1N1流感病毒对小鼠的致病性实验 | 第35-39页 |
2.1 前言 | 第35页 |
2.2 实验材料 | 第35-36页 |
2.2.1 实验毒株 | 第35页 |
2.2.2 试验动物 | 第35-36页 |
2.2.3 细胞及试剂 | 第36页 |
2.2.4 器材与实验室条件 | 第36页 |
2.3 实验方法 | 第36-39页 |
2.3.1 病毒在MDCK细胞上的增殖 | 第36-37页 |
2.3.2 血凝试验(HA) | 第37页 |
2.3.3 组织半数感染量(TCID_(50))测定 | 第37页 |
2.3.4 BALB/c鼠感染实验 | 第37-38页 |
2.3.5 病毒的滴定 | 第38-39页 |
第三章 结果与分析 | 第39-63页 |
3.1 病毒的分离结果 | 第39页 |
3.2 阳性质粒的PCR扩增结果 | 第39-40页 |
3.3 毒株HA和NA基因的核苷酸同源性分析 | 第40-41页 |
3.4 各基因片段的进化分析 | 第41-60页 |
3.4.1 HA基因分析 | 第41-44页 |
3.4.2 NA基因分析 | 第44-47页 |
3.4.3 M基因分析 | 第47-49页 |
3.4.4 NS基因分析 | 第49-51页 |
3.4.5 NP基因分析 | 第51-53页 |
3.4.6 PA基因分析 | 第53-55页 |
3.4.7 PB1基因分析 | 第55-57页 |
3.4.8 PB2基因分析 | 第57-60页 |
3.5 A/swine/Guangxi/18/2013(H1N1)的血凝效价及TCID_(50)结果 | 第60页 |
3.6 实验小鼠的体重变化及攻毒后的临床表现 | 第60-62页 |
3.7 实验小鼠脏器中病毒的滴定结果 | 第62-63页 |
第四章 讨论 | 第63-67页 |
4.1 流行病学调查 | 第63页 |
4.2 遗传进化分析 | 第63-64页 |
4.3 致病力分析 | 第64页 |
4.4 耐药性分析 | 第64-65页 |
4.5 亲和力分析 | 第65页 |
4.6 致病性分析 | 第65-66页 |
4.7 水平传播分析 | 第66-67页 |
第五章 结论 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第80页 |