| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 主要符号表 | 第18-19页 |
| 1 文献综述 | 第19-40页 |
| 1.1 几丁质 | 第19页 |
| 1.2 含几丁质生物 | 第19-20页 |
| 1.2.1 真菌 | 第19-20页 |
| 1.2.2 线虫 | 第20页 |
| 1.2.3 节肢动物 | 第20页 |
| 1.3 几丁质的代谢与几丁质代谢关键酶 | 第20-27页 |
| 1.3.1 几丁质的合成与几丁质合酶 | 第20-22页 |
| 1.3.2 几丁质的水解与几丁质水解酶 | 第22-27页 |
| 1.4 几丁质合酶抑制剂 | 第27-30页 |
| 1.4.1 天然产物分离获得的几丁质合酶抑制剂 | 第27-30页 |
| 1.4.2 设计合成的几丁质合酶抑制剂 | 第30页 |
| 1.4.3 化合物库筛选发现的几丁质合酶抑制剂 | 第30页 |
| 1.5 β-N-乙酰己糖胺酶抑制剂 | 第30-33页 |
| 1.5.1 基于结构设计的β-N-乙酰己糖胺酶抑制剂 | 第30-32页 |
| 1.5.2 化合物库筛选发现的β-N-乙酰己糖胺酶抑制剂 | 第32-33页 |
| 1.6 几丁质酶抑制剂 | 第33-37页 |
| 1.6.1 天然产物分离获得的几丁质酶抑制剂 | 第33-35页 |
| 1.6.2 化合物筛选发现的几丁质酶抑制剂 | 第35-37页 |
| 1.7 选题依据和研究策略 | 第37-40页 |
| 1.7.1 选题依据 | 第37页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第37-38页 |
| 1.7.3 技术路线 | 第38-40页 |
| 2 几丁质合酶的抑制剂的筛选与抑制机理研究 | 第40-63页 |
| 2.1 引言 | 第40-41页 |
| 2.2 材料与方法 | 第41-43页 |
| 2.2.1 菌株、试剂和缓冲液 | 第41页 |
| 2.2.2 几丁质合酶抑制实验 | 第41-42页 |
| 2.2.3 cLogP的计算 | 第42页 |
| 2.2.4 真菌生长抑制实验 | 第42-43页 |
| 2.2.5 序列比对方法 | 第43页 |
| 2.2.6 同源模建方法 | 第43页 |
| 2.3 实验结果 | 第43-54页 |
| 2.3.1 几丁质合酶抑制剂筛选方法的建立 | 第43-46页 |
| 2.3.2 几丁质合酶抑制剂的筛选与IC_(50)值 | 第46-49页 |
| 2.3.3 几丁质合酶的保守基序 | 第49-51页 |
| 2.3.4 ScCHS1-UDP的模型结构 | 第51-52页 |
| 2.3.5 真菌生长抑制活性 | 第52-54页 |
| 2.4 讨论 | 第54-62页 |
| 2.4.1 新型几丁质合酶抑制剂骨架结构 | 第54页 |
| 2.4.2 构效关系与抑制机理 | 第54-61页 |
| 2.4.3 抑制剂的抗真菌活性 | 第61-62页 |
| 2.5 本章小结 | 第62-63页 |
| 3 β-N-乙酰己糖胺酶的抑制剂筛选及抑制机理研究 | 第63-92页 |
| 3.1 引言 | 第63-64页 |
| 3.2 材料与方法 | 第64-66页 |
| 3.2.1 试剂、酶与化合物 | 第64页 |
| 3.2.2 抑制活性的测定方法 | 第64-65页 |
| 3.2.3 同源模建方法 | 第65页 |
| 3.2.4 分子对接方法 | 第65页 |
| 3.2.5 色氨酸滴定实验 | 第65-66页 |
| 3.3 实验结果 | 第66-81页 |
| 3.3.1 OfHex2的抑制剂筛选 | 第66-68页 |
| 3.3.2 OfHex2抑制剂的Ki值 | 第68-71页 |
| 3.3.3 OfHex2抑制剂对其他β-N-乙酰己糖胺酶的抑制 | 第71-78页 |
| 3.3.4 分子对接 | 第78-79页 |
| 3.3.5 抑制剂与OfHex2的相互作用 | 第79-81页 |
| 3.4 讨论 | 第81-91页 |
| 3.4.1 构效关系 | 第81-86页 |
| 3.4.2 抑制机理 | 第86-91页 |
| 3.5 本章小结 | 第91-92页 |
| 4 几丁质酶的表达纯化、抑制剂筛选与抑制机理研究 | 第92-122页 |
| 4.1 引言 | 第92-93页 |
| 4.2 材料与方法 | 第93-101页 |
| 4.2.1 试剂、培养基与缓冲液 | 第93-94页 |
| 4.2.2 CeCht1的基因克隆 | 第94-97页 |
| 4.2.3 CeCht1的表达 | 第97-98页 |
| 4.2.4 CeCht1的分离纯化 | 第98页 |
| 4.2.5 糖基化分析 | 第98-99页 |
| 4.2.6 最适pH和温度 | 第99页 |
| 4.2.7 抑制活性的测定方法 | 第99页 |
| 4.2.8 序列比对与进化分析 | 第99-100页 |
| 4.2.9 同源模建方法 | 第100页 |
| 4.2.10 分子对接方法 | 第100-101页 |
| 4.3 实验结果 | 第101-113页 |
| 4.3.1 CeCht1的序列比对与进化分析 | 第101-103页 |
| 4.3.2 CeCht1的基因克隆 | 第103页 |
| 4.3.3 CeCht1的表达与纯化 | 第103-108页 |
| 4.3.4 CeCht1蛋白的N-糖基化分析 | 第108页 |
| 4.3.5 CeCht1的最适酶催化反应条件 | 第108-109页 |
| 4.3.6 CeCht1抑制剂的筛选 | 第109-111页 |
| 4.3.7 CeCht1抑制剂的Ki值 | 第111页 |
| 4.3.8 同源模建与分子对接 | 第111-113页 |
| 4.4 讨论 | 第113-121页 |
| 4.4.1 构效关系 | 第113-117页 |
| 4.4.2 抑制机理 | 第117-121页 |
| 4.5 本章小结 | 第121-122页 |
| 5 结论、创新点与展望 | 第122-125页 |
| 5.1 结论 | 第122-123页 |
| 5.2 创新点 | 第123-124页 |
| 5.3 未来工作展望 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-134页 |
| 作者简介 | 第134页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第134-136页 |
| 致谢 | 第136页 |
