| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 脂肪酶 | 第12-18页 |
| 1.1.1 脂肪酶简介 | 第12页 |
| 1.1.2 脂肪酶立体结构和催化特征 | 第12-17页 |
| 1.1.2.1 脂肪酶立体结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2.2 脂肪酶催化三联体 | 第13-14页 |
| 1.1.2.3 氧负离子疏水通道 | 第14-15页 |
| 1.1.2.4 脂肪酶的代谢分泌 | 第15-16页 |
| 1.1.2.5 南极假丝酵母脂肪酶B | 第16-17页 |
| 1.1.3 脂肪酶的有机相催化 | 第17-18页 |
| 1.2 脂肪酶的固定化 | 第18-22页 |
| 1.2.1 酶固定化概述 | 第18-19页 |
| 1.2.2 脂肪酶固定化进展 | 第19-22页 |
| 1.2.2.1 吸附法固定化脂肪酶 | 第19-21页 |
| 1.2.2.2 共价结合法固定化脂肪酶 | 第21页 |
| 1.2.2.3 包埋法固定化脂肪酶 | 第21-22页 |
| 1.2.2.4 交联法固定化脂肪酶 | 第22页 |
| 1.3 维生素A衍生物 | 第22-25页 |
| 1.3.1 维生素A及其衍生物的简介 | 第22-23页 |
| 1.3.2 维生素A(视黄醇)的化学合成 | 第23-24页 |
| 1.3.3 维生素A衍生物的化学合成 | 第24-25页 |
| 1.3.3.1 基于β-紫罗兰酮作为前体化学合成维生素A衍生物 | 第24页 |
| 1.3.3.2 由二卤代化合物化学合成维生素A衍生物 | 第24-25页 |
| 1.3.4 酶法合成维生素A衍生物 | 第25页 |
| 1.4 本论文的选题意义及研究内容 | 第25-26页 |
| 1.4.1 本论文的选题意义 | 第25-26页 |
| 1.4.2 本论文的研究内容 | 第26页 |
| 参考文献 | 第26-31页 |
| 第二章 脂肪酶的固定化—吸附法与共价结合法 | 第31-51页 |
| 2.1 引言 | 第31-32页 |
| 2.2 材料和方法 | 第32-36页 |
| 2.2.1 试剂 | 第32页 |
| 2.2.2 主要实验仪器 | 第32页 |
| 2.2.3 吸附法固定化脂肪酶 | 第32-35页 |
| 2.2.3.1 载体的选择 | 第33页 |
| 2.2.3.2 载体与活化剂的质量体积比的影响 | 第33页 |
| 2.2.3.3 加酶量对固定化的影响 | 第33页 |
| 2.2.3.4 固定化的最适pH和缓冲液种类的选择 | 第33-34页 |
| 2.2.3.5 固定化温度的影响 | 第34页 |
| 2.2.3.6 固定化进程 | 第34页 |
| 2.2.3.7 固定化酶批次稳定性 | 第34页 |
| 2.2.3.8 脂肪酶酶活检测(p-NPA法) | 第34页 |
| 2.2.3.9 固定化脂肪酶吸附率的计算 | 第34-35页 |
| 2.2.4 共价结合法固定化脂肪酶 | 第35-36页 |
| 2.2.4.1 载体材料的选择 | 第35页 |
| 2.2.4.2 NaIO_4浓度的影响 | 第35页 |
| 2.2.4.3 最适pH和离子强度的影响 | 第35页 |
| 2.2.4.4 酶液浓度的影响 | 第35页 |
| 2.2.4.5 固定化进程 | 第35-36页 |
| 2.2.4.6 戊二醛聚集交联 | 第36页 |
| 2.2.5 维A棕榈酸酯的HPLC分析与转酯酶活和产率计算 | 第36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-48页 |
| 2.3.1 吸附法固定化载体的选择 | 第36-37页 |
| 2.3.2 载体与活化剂的质量体积比的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.3 吸附法固定化酶液浓度的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.4 缓冲液pH对吸附固定化的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.5 温度对吸附法固定化的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.6 吸附固定化进程 | 第41-42页 |
| 2.3.7 共价结合法固定化载体的选择 | 第42-43页 |
| 2.3.8 NaIO_4浓度的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.9 pH与离子强度对共价结合固定化的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.10 酶液浓度对共价结合固定化脂肪酶的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.11 共价结合固定化进程 | 第46-47页 |
| 2.3.12 戊二醛酶聚集交联的考察 | 第47-48页 |
| 2.3.13 吸附法和共价结合法固定化操作稳定性比较 | 第48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第三章 固定化脂肪酶催化合成维生素A酯 | 第51-67页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 材料和方法 | 第51-54页 |
| 3.2.1 试剂 | 第51-52页 |
| 3.2.2 主要实验仪器 | 第52页 |
| 3.2.3 固定化脂肪酶的制备 | 第52页 |
| 3.2.4 维A棕榈酸酯的催化合成条件优化 | 第52-54页 |
| 3.2.4.1 催化体系的选择 | 第52页 |
| 3.2.4.2 底物摩尔比的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.4.3 温度对催化的影响 | 第53页 |
| 3.2.4.4 固定化酶用量的影响 | 第53页 |
| 3.2.4.5 体系中最初加水量的影响 | 第53页 |
| 3.2.4.6 脂肪酶催化转酯反应进程 | 第53页 |
| 3.2.4.7 脂肪酶底物谱的考察 | 第53页 |
| 3.2.4.8 脂肪酶催化反应的动力学机制 | 第53-54页 |
| 3.2.4.9 维A棕榈酸酯的产率和反应初速度的计算 | 第54页 |
| 3.2.4.10 维A棕榈酸酯的色谱分析 | 第54页 |
| 3.3 结果与分析 | 第54-65页 |
| 3.3.1 催化体系的选择 | 第54-55页 |
| 3.3.2 棕榈酸与维A醋酸酯摩尔比的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.3 催化温度的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.4 加酶量对转酯催化的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.5 体系最初含水量的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.6 脂肪酶催化转酯反应进程 | 第59-60页 |
| 3.3.7 脂肪酶底物谱的研究 | 第60-61页 |
| 3.3.8 反应动力学机制 | 第61-65页 |
| 3.4 本章小结 | 第65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 第四章 维A棕榈酸酯的分离纯化及分析 | 第67-78页 |
| 4.1 引言 | 第67-68页 |
| 4.2 材料与方法 | 第68-69页 |
| 4.2.1 试剂 | 第68页 |
| 4.2.2 主要实验仪器 | 第68页 |
| 4.2.3 维A棕榈酸酯的制备 | 第68页 |
| 4.2.4 棕榈酸的去除 | 第68页 |
| 4.2.5 萃取分离 | 第68-69页 |
| 4.2.5.1 乙醇浓度对萃取效果的影响 | 第68-69页 |
| 4.2.5.2 乙醇/水与正己烷的体积比对萃取的影响 | 第69页 |
| 4.2.5.3 温度对萃取的影响 | 第69页 |
| 4.2.5.4 萃取级数对萃取效果的影响 | 第69页 |
| 4.2.6 硅胶柱层析及分析 | 第69页 |
| 4.2.7 组分HPLC检测分析 | 第69页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第69-76页 |
| 4.3.1 乙醇浓度对萃取的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.2 萃取剂配比对萃取的影响 | 第70页 |
| 4.3.3 温度对萃取的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.4 萃取级数对萃取效果的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.5 维A棕榈酸酯的薄层层析 | 第72-73页 |
| 4.3.6 维A棕榈酸酯的硅胶柱层析分离纯化 | 第73-76页 |
| 4.4 本章小结 | 第76页 |
| 参考文献 | 第76-78页 |
| 第五章 总结与展望 | 第78-80页 |
| 5.1 总结 | 第78-79页 |
| 5.2 展望 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间所取得的相关科研成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
