| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩写词表 | 第7-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 技术路线 | 第13-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-19页 |
| ·纤维素合酶 | 第14-16页 |
| ·玫瑰花环复合体 | 第14页 |
| ·纤维素在细胞中合成的位置 | 第14-15页 |
| ·纤维素合酶在植物中的研究 | 第15-16页 |
| ·研究细胞壁合成的网络资源 | 第16页 |
| ·实时定量PCR | 第16-19页 |
| ·实时定量PCR原理及术语 | 第16页 |
| ·荧光染料SYBR Green Ⅰ | 第16-17页 |
| ·实时定量PCR程序的优化 | 第17页 |
| ·数据分析方法 | 第17-19页 |
| 2 毛白杨CesA4基因cDNA克隆及编码蛋白分析 | 第19-33页 |
| ·材料、试剂及主要仪器 | 第19-20页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·载体及感受态细胞 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-24页 |
| ·毛白杨CesA4基因电子克隆及引物设计 | 第20页 |
| ·毛白杨总RNA提取 | 第20-21页 |
| ·毛白杨cDNA合成 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增产物回收及纯化 | 第22-23页 |
| ·目的片段连接至pGEM-T Easy载体 | 第23页 |
| ·转化大肠杆菌感受态 | 第23-24页 |
| ·菌落PCR检测 | 第24页 |
| ·毛白杨CesA4基因的生物信息学分析 | 第24页 |
| ·毛白杨CesA4蛋白结构分析及基因家族树分析 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-30页 |
| ·毛白杨纤维素合酶cDNA克隆及分析 | 第24-26页 |
| ·PtoCesA4蛋白生物信息学分析 | 第26-28页 |
| ·杨属及拟南芥CesA蛋白酶系统进化分析 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| ·毛白杨纤维素合酶基因命名 | 第30-31页 |
| ·毛白杨纤维素合酶三维结构分析 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 3 毛白杨PtoCesA4基因组DNA克隆及系统发育进化分析 | 第33-44页 |
| ·材料、试剂及主要仪器 | 第33页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·载体及感受态细胞 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-36页 |
| ·毛白杨总DNA提取 | 第33-34页 |
| ·纯化回收PCR产物 | 第34-35页 |
| ·载体pGEM-T Easy与目的片段相连 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态的转化 | 第35页 |
| ·PCR检测单克隆菌落 | 第35-36页 |
| ·PtoCesA4基因组DNA的结构及比较基因组学分析 | 第36页 |
| ·植物纤维素合酶系统进化分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·PtoCesA4基因及拟南芥纤维素合酶基因的结构 | 第36-37页 |
| ·PtoCesA4基因启动子分析 | 第37-38页 |
| ·比较基因组学分析 | 第38-39页 |
| ·植物纤维素合酶系统进化分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·纤维素合酶的比较基因组 | 第41-42页 |
| ·CesA基因启动子 | 第42页 |
| ·植物纤维素合酶系统发育进化 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 4 组织器官特异表达分析 | 第44-50页 |
| ·材料、试剂及主要仪器 | 第44页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-46页 |
| ·实时荧光定量PCR引物设计 | 第44页 |
| ·各组织器官总RNA提取 | 第44-45页 |
| ·各组织器官第一链cDNA合成 | 第45页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第45-46页 |
| ·各组织器官表达量分析 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·引物设计 | 第46页 |
| ·RNA提取质量检查 | 第46-47页 |
| ·各组织器官表达分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48页 |
| ·内参选择 | 第48页 |
| ·植物CesA4,7,8基因的表达模式及功能 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 5 PtoCesA4基因单核苷酸多态性分析 | 第50-58页 |
| ·材料、试剂及主要仪器 | 第51页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·试剂及主要仪器 | 第51页 |
| ·载体及感受态细胞 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51页 |
| ·样本总DNA提取 | 第51页 |
| ·各样品PtoCesA4基因组DNA的克隆及测序 | 第51页 |
| ·PtoCesA4基因的SNPs分析和LD检测 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-56页 |
| ·克隆基因的拼接及SNPs分析 | 第51-53页 |
| ·SNPs变化引起的氨基酸变化 | 第53-54页 |
| ·SNPs重组及连锁不平衡分析 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56页 |
| ·基于候选基因中SNPs的LD作图 | 第56页 |
| ·用于LD作图的群体选择 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-58页 |
| 6 结论与展望 | 第58-61页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| ·展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 个人简介 | 第65-66页 |
| 导师简介1——张志毅教授 | 第66-67页 |
| 导师简介2——张德强教授 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
