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ClassIIa家族组蛋白去乙酰化酶调控小鼠体细胞重编程的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
第一章:绪论第8-16页
   ·干细胞第8页
   ·诱导多能干细胞的发展历程第8-10页
   ·本课题的研究背景第10-14页
     ·蛋白质的乙酰化修饰在发育中的研究进展第10-13页
     ·MEF2 的研究进展第13-14页
   ·本课题的创新之处第14-16页
第二章:实验材料与方法第16-39页
   ·实验材料第16-24页
     ·本课题所使用的细胞及来源第16页
     ·主要试剂与材料第16-17页
     ·本课题所用的引物总结第17-20页
     ·本课题所用的抗体总结第20-21页
     ·主要仪器第21页
     ·培养基和一些重要试剂的配置方法第21-24页
   ·实验方法第24-39页
     ·MEF,TTF,MEC,MaF 和OG2 mES 细胞的分离培养第24-26页
     ·饲养层细胞的制备第26页
     ·多能性细胞的复苏第26-27页
     ·小鼠诱导性多能干细胞/小鼠胚胎干细胞传代以及日常维护第27-28页
     ·小鼠胚胎干细胞/小鼠诱导性多能干细胞冻存第28页
     ·小鼠的iPS 诱导流程第28-29页
     ·小鼠iPSCs 克隆挑取、培养及鉴定第29-30页
     ·免疫荧光第30-32页
     ·免疫蛋白印迹第32页
     ·免疫共沉淀第32-33页
     ·细胞浆蛋白与细胞核蛋白分离第33-34页
     ·RNA 提取步骤及RT-PCR第34-35页
     ·提取基因组DNA第35-37页
     ·质粒大量抽提第37-39页
第三章:实验结果第39-56页
   ·HDAC7 能提高小鼠成纤维细胞的重编程效率第39-40页
   ·Class Ⅱa HDACs 通过抑制 MEF2 的活性促进重编程第40-41页
   ·MEF2 能够抑制重编程第41-42页
   ·MEF2/Class Ⅱa HDACs 形成了一个变阻器以调控重编程第42页
   ·Class Ⅱa HDACs 通过促进MET 提高三因子介导的重编程效率第42-44页
   ·重编程过程中Class Ⅱa HDACs 发生从细胞核向细胞质的穿梭第44-45页
   ·CaMKs 通过调节Class Ⅱa HDACs 的穿梭参与调控重编程第45-56页
第四章:讨论第56-58页
参考文献第58-71页
附录第71-72页
致谢第72-74页
攻读硕士学位期间取得的与学术论文相关的成果第74页

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