摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
第一章:绪论 | 第8-16页 |
·干细胞 | 第8页 |
·诱导多能干细胞的发展历程 | 第8-10页 |
·本课题的研究背景 | 第10-14页 |
·蛋白质的乙酰化修饰在发育中的研究进展 | 第10-13页 |
·MEF2 的研究进展 | 第13-14页 |
·本课题的创新之处 | 第14-16页 |
第二章:实验材料与方法 | 第16-39页 |
·实验材料 | 第16-24页 |
·本课题所使用的细胞及来源 | 第16页 |
·主要试剂与材料 | 第16-17页 |
·本课题所用的引物总结 | 第17-20页 |
·本课题所用的抗体总结 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·培养基和一些重要试剂的配置方法 | 第21-24页 |
·实验方法 | 第24-39页 |
·MEF,TTF,MEC,MaF 和OG2 mES 细胞的分离培养 | 第24-26页 |
·饲养层细胞的制备 | 第26页 |
·多能性细胞的复苏 | 第26-27页 |
·小鼠诱导性多能干细胞/小鼠胚胎干细胞传代以及日常维护 | 第27-28页 |
·小鼠胚胎干细胞/小鼠诱导性多能干细胞冻存 | 第28页 |
·小鼠的iPS 诱导流程 | 第28-29页 |
·小鼠iPSCs 克隆挑取、培养及鉴定 | 第29-30页 |
·免疫荧光 | 第30-32页 |
·免疫蛋白印迹 | 第32页 |
·免疫共沉淀 | 第32-33页 |
·细胞浆蛋白与细胞核蛋白分离 | 第33-34页 |
·RNA 提取步骤及RT-PCR | 第34-35页 |
·提取基因组DNA | 第35-37页 |
·质粒大量抽提 | 第37-39页 |
第三章:实验结果 | 第39-56页 |
·HDAC7 能提高小鼠成纤维细胞的重编程效率 | 第39-40页 |
·Class Ⅱa HDACs 通过抑制 MEF2 的活性促进重编程 | 第40-41页 |
·MEF2 能够抑制重编程 | 第41-42页 |
·MEF2/Class Ⅱa HDACs 形成了一个变阻器以调控重编程 | 第42页 |
·Class Ⅱa HDACs 通过促进MET 提高三因子介导的重编程效率 | 第42-44页 |
·重编程过程中Class Ⅱa HDACs 发生从细胞核向细胞质的穿梭 | 第44-45页 |
·CaMKs 通过调节Class Ⅱa HDACs 的穿梭参与调控重编程 | 第45-56页 |
第四章:讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-71页 |
附录 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-74页 |
攻读硕士学位期间取得的与学术论文相关的成果 | 第74页 |